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エンドサイトーシスにおけるユビキチンの役割

ユビキチンはエンドサイトーシスを安定させて、細胞が重要な物質をしっかり取り込めるようにしてるんだ。

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ユビキチンのエンドサイトーユビキチンのエンドサイトーシスへの影響めっちゃ大事だよ。ユビキチンは、細胞の物質取り込みにとって
目次

エンドサイトーシスは、細胞が外膜からタンパク質や脂質などの物質を取り込むためのプロセスだよ。このプロセスは、コミュニケーション、栄養の取得、材料のリサイクルなど、いろんな細胞機能にとってめっちゃ重要なんだ。エンドサイトーシスでよく研究されている経路の一つが、クロトリン介在エンドサイトーシスだよ。

クロトリン介在エンドサイトーシスの間に、特定のタンパク質が集まってプロセスを始めるんだ。最初のタンパク質は、Eps15やインターセクチンみたいなのがあって、エンドサイトーシスが行われる膜上のサイトを作るんだ。これらが並ぶと、アダプタタンパク質が集まって荷物タンパク質を集めるのを助けるんだ。荷物タンパク質は、細胞が取り込む必要がある物質を運ぶからすごく重要なんだよ。

このプロセスの重要な部分は、クロトリンの役割。クロトリンは膜を袋の形に整えるタンパク質で、その袋が閉じて小さな泡、つまり小胞を形成するんだ。この小胞は細胞内に移動して、内容物を放出して使えるようになるんだ。

ユビキチンの役割

このエンドサイトーシスプロセスを調整するキープレイヤーの一つが、ユビキチンっていう小さなタンパク質だよ。ユビキチンは、細胞内でいろんなタスクにタンパク質をマークするのを手伝ってる。これにより、エンドサイトーシス中に正しいタンパク質だけが取り込まれるようにするのが大事なんだ。

エンドサイトーシスのプロセス内で、Eps15みたいな特定のタンパク質にはユビキチンに結合できる領域があるんだ。この相互作用がエンドサイトーシスの安定性を良くして、タンパク質が十分に長くその場に留まって必要な荷物を取り込むのを手助けするんだ。

最近の研究では、ユビキチンレベルが崩れるとエンドサイトーシスサイトの安定性が低下することが示されてる。この不安定さは、細胞が必要な材料を効率よく取り込めなくなる原因になるんだよ。

クロトリン介在エンドサイトーシスの初期ステップ

クロトリン介在エンドサイトーシスの最初のステップは、イニシエータタンパク質が集まるところから始まるんだ。これらのタンパク質、Eps15やその仲間たちがプラズマ膜に移動して集まって、エンドサイトーシスプロセスのスタート地点を作るんだ。

これらのタンパク質が整ったら、アダプタタンパク質が集まってきて、細胞が取り込みたい荷物タンパク質をつなげる役割を果たすんだ。これらの荷物タンパク質は、細胞の生存や機能に必要な重要な物質を運んでるんだよ。

タンパク質の組み立てが進むと、クロトリンがその成長してる構造にくっつくんだ。クロトリンは、荷物タンパク質の周りにバスケットのような枠組みを作って、膜を内側に引き込んで曲げさせるんだ。この曲げるのがすごく重要で、小胞が膜から切り離されることにつながるんだよ。

荷物募集におけるユビキチンの役割

荷物タンパク質は、アダプタタンパク質に結合するための特定の特徴を持ってることが多いんだ。この特徴がアダプタタンパク質に認識されて、荷物タンパク質が形成されている小胞に含まれるようにしてくれるんだ。

ユビキチン化、つまりタンパク質にユビキチンを追加するプロセスもここで重要な役割を果たすんだ。特定の荷物タンパク質を小胞に取り込むためにマークするのを助けるんだ。ユビキチン化された荷物タンパク質は、アダプタタンパク質に対する結合親和性が増すから、細胞に取り込まれやすくなるんだ。

細胞がこれらの荷物タンパク質を適切にユビキチン化できないと、取り込まれる荷物の量が減って、細胞の全体的な健康や機能に影響を与えちゃうんだ。

エンドサイトーシスネットワークのダイナミクス

エンドサイトーシスネットワークのダイナミクスは面白いよ。全体の組み立てが柔軟でないと、構造が急速に変化できないから、もっとタンパク質が取り込まれたり、小胞が形成されて切り離されたりできなくなるんだ。ネットワークが固すぎたり不安定になったりすると、細胞が重要な物質を取り込む能力に影響が出るんだよ。

最近の発見では、エンドサイトーシスの開始に関与するタンパク質が、細胞内で柔軟な液滴状の構造を形成することが示されてるんだ。この液滴はすごく早く変わって、成分をすばやく交換できるんだ。この柔軟性は、エンドサイトーシスプロセスのバランスを維持するために重要なんだよ。

エンドサイトーシスネットワークの安定性に対するユビキチンの影響

ユビキチンの存在は、エンドサイトーシスに関与するタンパク質ネットワークを安定させるのに重要なんだ。ユビキチンがあると、Eps15みたいなタンパク質は互いにしっかりとつかまえられるから、短命だったり不安定なエンドサイトーシスの集合体の可能性が減るんだ。

ユビキチンがない状況になると、タンパク質同士の結合が弱くなるんだ。この弱体化は、エンドサイトーシスネットワーク内の成分が早く入れ替わる原因になって、重要なエンドサイトーシスサイトが不安定になって、その役割を果たすのが難しくなるんだよ。

ユビキチンの役割に関する実験

研究者たちは、ユビキチンがエンドサイトーシスにどのように影響を与えるかを理解するためにいろんな実験を行ってるんだ。一つのアプローチは、研究室で精製したタンパク質を使って、ユビキチンを追加したり取り除いたりすることで液滴の形成や安定性の変化を観察することなんだ。

これらの実験では、ポリユビキチンの存在が、モノユビキチンだけの場合と比べてタンパク質の液滴の安定性を高めることが示されてるんだ。研究者たちは、ポリユビキチンがエンドサイトーシスを助ける構造に対して、はるかに効果的な安定化効果を持つってことを確認したんだ。

ライブ細胞イメージング技術を使えば、科学者たちはユビキチンがエンドサイトーシスに与える影響をリアルタイムで観察できるんだ。タンパク質に蛍光マーカーを付けることで、エンドサイトーシス構造がどれぐらい持続するか、ユビキチンの有無によってどれだけの荷物が取り込まれるかを確認できるんだよ。

脱ユビキチン酵素の募集とその影響

ユビキチンの役割をさらに探るために、研究者たちは脱ユビキチン酵素(DUB)をシステムに導入したんだ。これらの酵素は、タンパク質からユビキチンを取り除く働きをするんだ。この追加によって、ユビキチンを取り除くことでエンドサイトーシスのダイナミクスにどのような影響があるかを明確に見ることができるんだよ。

DUBを導入すると、エンドサイトーシスサイトの安定性が低下して、短命の構造が増えるんだ。この現象は、ユビキチンがエンドサイトーシスプロセスのバランスと効率を維持するのに非常に重要であることを示しているんだ。

光誘導型募集による発見

革新的なアプローチを使用して、研究者たちはDUBの活性化のタイミングを制御できるシステムを設計したんだ。特定の光を当てることで、これらの酵素をエンドサイトーシスサイトに誘導できるんだよ。

この光で誘発される方法によって、ユビキチンが取り除かれるときのエンドサイトーシスへの即時の影響を観察できるんだ。DUBの活性化から数分以内に、エンドサイトーシスサイトの安定性が大幅に低下することがわかったんだ。この急速な不安定化は、ユビキチンが機能的なエンドサイトーシスサイトを維持する上での重要な役割を果たしていることを確認しているんだよ。

エンドサイトーシスにおけるユビキチンの役割に関する結論

行われた研究は、ユビキチンがエンドサイトーシスプロセス内のタンパク質とどのように相互作用するかについての包括的な理解を明らかにしているんだ。ユビキチンの追加は、効果的なエンドサイトーシスに必要な初期タンパク質ネットワークを安定させるのに役立つんだ。

これらの相互作用が壊れると、ユビキチンがなくなったりDUBを使って取り除いたりしたときに、エンドサイトーシスの効率が低下するんだ。細胞は重要な荷物を取り込むのが難しくなるんだよ。

ユビキチンがこれらのプロセスにどのように影響するかを調べることで、研究者たちは細胞の健康やエンドサイトーシスに関連するさまざまな病気のメカニズムへの深い調査の舞台を整えているんだ。これらの関係を理解することで、エンドサイトーシス経路をターゲットにした治療法の可能性が開かれるんだよ。

今後の方向性

これからは、ユビキチンやそのさまざまなタンパク質との相互作用を操作する方法を引き続き探ることが重要なんだ。これらのダイナミクスを理解することで、エンドサイトーシスが障害を持つ状態の治療法への進展につながるかもしれないんだ。

さらに、ユビキチンと一緒に働く他のタンパク質の複雑な役割についても、さらなる研究が必要だよ。これらの相互作用を深く理解することで、細胞が重要な栄養素や薬を取り込むのを促進する新しい戦略を発見できるかもしれない。そしてそれが、最終的には人間の健康や医療治療に役立つことになるんだ。

進化した技術や手法を使って、エンドサイトーシスの研究は細胞生命の基本的なプロセスに関する洞察を提供し続けるんだ。

要約

エンドサイトーシスのプロセスは、細胞が環境から必要な材料を得るために重要なんだ。このプロセスは、Eps15やアダプタタンパク質、そして最も重要なユビキチンなど、いろんなタンパク質に大きく依存してるんだ。ユビキチンはエンドサイトーシスの機構の安定性と効率を高めて、重要な荷物が効率よく内部化されるようにしてるんだよ。最近の研究は、ユビキチンレベルを維持することの重要性を強調していて、何かが崩れるとエンドサイトーシスの効率が下がって、細胞機能に悪影響を及ぼす可能性があるんだ。革新的なアプローチを活用することで、科学者たちはこのプロセスの複雑さや健康や病気への影響をさらに解明できるようになるんだ。

オリジナルソース

タイトル: Ubiquitin-driven protein condensation initiates clathrin-mediated endocytosis

概要: Clathrin-mediated endocytosis is an essential cellular pathway that enables signaling and recycling of transmembrane proteins and lipids. During endocytosis, dozens of cytosolic proteins come together at the plasma membrane, assembling into a highly interconnected network that drives endocytic vesicle biogenesis. Recently, multiple groups have reported that early endocytic proteins form flexible condensates, which provide a platform for efficient assembly of endocytic vesicles. Given the importance of this network in the dynamics of endocytosis, how might cells regulate its stability? Many receptors and endocytic proteins are ubiquitylated, while early endocytic proteins such as Eps15 contain ubiquitin-interacting motifs. Therefore, we examined the influence of ubiquitin on the stability of the early endocytic protein network. In vitro, we found that recruitment of small amounts of polyubiquitin dramatically increased the stability of Eps15 condensates, suggesting that ubiquitylation could nucleate endocytic assemblies. In live cell imaging experiments, a version of Eps15 that lacked the ubiquitin-interacting motif failed to rescue defects in endocytic initiation created by Eps15 knockout. Furthermore, fusion of Eps15 to a deubiquitylase enzyme destabilized nascent endocytic sites within minutes. In both in vitro and live cell settings, dynamic exchange of Eps15 proteins, a hallmark of liquid-like systems, was modulated by Eps15-Ub interactions. These results collectively suggest that ubiquitylation drives assembly of the flexible protein network responsible for catalyzing endocytic events. More broadly, this work illustrates a biophysical mechanism by which ubiquitylated transmembrane proteins at the plasma membrane could regulate the efficiency of endocytic recycling. Significance StatementThe assembly of proteins into dynamic, liquid-like condensates is an emerging principle of cellular organization. During clathrin-mediated endocytosis, a liquid-like protein network catalyzes vesicle assembly. How do cells regulate these assemblies? Here we show that ubiquitin and endocytic proteins form a dynamic, mutually-reinforcing protein network in vitro and in live cells. To probe the impact of ubiquitylation on the dynamics of endocytosis, we engineered opto-genetic control over recruitment of proteins to nascent endocytic sites. While recruitment of wildtype proteins promoted endocytosis, recruitment of deubiquitylases, enzymes capable of removing ubiquitin, resulted in disassembly of endocytic sites within minutes. These results illustrate that ubiquitylation can regulate the fate of endocytic structures, elucidating a functional connection between protein condensates, endocytosis, and ubiquitin signaling.

著者: Jeanne Stachowiak, F. Yuan, S. Gollapudi, K. Day, G. Ashby, A. Sangani, B. Malady, L. Wang, E. M. Lafer, J. Huibregtse

最終更新: 2024-05-19 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.08.21.554139

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.08.21.554139.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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