コメの炭酸脱水酵素をシフトさせて、より良い光合成を目指す
研究者たちはコハク酸脱水素酵素を稲に移動させて、光合成と成長を改善したんだ。
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光合成は、植物が空気中の二酸化炭素をエネルギーに変えるための重要なプロセスなんだ。これは、環境に入るほとんどすべての炭素にとって欠かせないプロセスだよ。ほとんどの陸上植物はC3光合成っていう方法を使ってる。このプロセスでは、ルビスコっていうタンパク質が二酸化炭素を捕まえて、3-ホスホグリセリン酸(3-PGA)っていう化合物に変えるんだけど、ルビスコは酸素とも反応しちゃって、フォトレストレーションっていう問題が起きることもあるんだ。これが起きると、2-ホスホグリコレートっていう物質ができて、植物の代謝に干渉しちゃうんだ。つまり、植物はこの不要な反応のせいで、エネルギーの最大50%を失っちゃうことがあるんだよ、特に今の大気条件の下ではね。だから、植物はフォトレストレーションを抑える方法を発展させる理由があるんだ。
植物の適応
120種類以上の陸上植物が、ルビスコの周りの二酸化炭素レベルを上げるための特別な適応を発展させてきたんだ。これがフォトレストレーションの影響を減らすのに役立ってる。これらの適応は、主に2つのタイプの光合成に分類できる:クラスルセナ酸代謝(CAM)とC4光合成。これらの植物は、二酸化炭素を直接3-PGAに変える代わりに、炭酸脱水酵素(CA)っていう酵素を使ってる。この酵素は二酸化炭素から重炭酸塩を作り出して、さまざまな反応を経て二酸化炭素レベルを上げるんだ。これが酸素との反応を制限する方法で、フォトレストレーションによるエネルギーの損失を減らして、植物内の水と窒素の使用効率を改善するんだ。
これらのCO2濃縮メカニズムの成功により、コメのようなC3植物に似た適応を導入するためのグローバルな取り組みが進んでる。異なる植物の種類がこれらの適応を実施する具体的な方法は異なるけど、共通の特徴がある:炭酸脱水酵素が葉緑体(光合成が行われる細胞の部分)から細胞質(細胞の液体部分)に移動することだ。
炭酸脱水酵素の移動に関する研究
これまで、科学者たちはC4植物のたった2つの種で炭酸脱水酵素の移動がどのように行われるかを調べたんだ。この場合、移動は主に葉緑体に存在する炭酸脱水酵素遺伝子の葉緑体ターゲティング配列の変異によって引き起こされている。
C3植物では、炭酸脱水酵素はアルファ-CA、ベータ-CA、ガンマ-CAの3タイプが存在していて、ベータ-CAタイプがこれらの植物の葉で最も一般的なんだ。科学者たちは、これらのさまざまなタイプの炭酸脱水酵素が光合成において多くの機能を持っていると提案しているけど、主な役割はルビスコのために二酸化炭素レベルを安定に保つことみたい。いくつかの研究では、炭酸脱水酵素の活性を減らしても光合成には大きな影響がないことが示されているけど、これは非常に効率的に働く能力によるものだと思われる。
炭酸脱水酵素には、光合成過程の重要な部分である光合成系IIのレドックス状態に影響を与えるような追加的な機能があるかもしれない。これにより、炭酸脱水酵素が葉緑体から細胞質に移動すると、光合成系IIの機能や植物の全体的な成長に何が起こるのかっていう質問が生まれたんだ。
実験
この質問に答えるために、研究者たちは遺伝子編集を通じて稲植物の葉緑体から細胞質に炭酸脱水酵素の活性を移動させることを目指したんだ。具体的には、炭酸脱水酵素の葉緑体の局在に関与する遺伝子をターゲットにして、活動を細胞質に移す変異を作ることにした。
研究の結果、遺伝子編集された稲植物は二酸化炭素を捕まえる能力や成長に悪影響は見られなかったんだ。興味深いことに、この研究は光合成系II内の速い電子移動をサポートする新たな役割を炭酸脱水酵素に発見したんだ。
炭酸脱水酵素の変異体の分析
成熟した稲の葉における異なる炭酸脱水酵素の変異体の豊富さと機能を評価するために、研究者たちは特定のデータセットを評価した。この分析で、最も発現が多かった炭酸脱水酵素の遺伝子が特定されたんだ。研究者はまた、この遺伝子からの複数の転写変異を発見し、その発現の複雑さを浮き彫りにした。
その後、科学者たちは炭酸脱水酵素の葉緑体の局在に関与する遺伝子の特定部位をターゲットにするためのガイドRNAを設計したんだ。これにより、葉緑体での炭酸脱水酵素の活性を失ったと予測される複数の遺伝子編集された稲の系統が作られた。
タンパク質の局在の確認
次に、研究者たちは編集された炭酸脱水酵素のタンパク質が正しく細胞質に局在しているかを確認したいと思ったんだ。彼らは計算モデリングや実験室での実験など、さまざまな技術を用いて、タンパク質が細胞の適切な部分に移動したかを分析した。
最初の予測では、一部の変異体がまだ葉緑体をターゲットにしているかもしれないと示唆されていたけど、テストの結果、すべての編集系統が実際に細胞質に局在していることが示された。これにより、編集が葉緑体から炭酸脱水酵素の活性を無事に移動させたことが確認されたんだ。
炭酸脱水酵素の活性の測定
次に、科学者たちはこれらの編集された植物内の炭酸脱水酵素の活性を調べた。炭酸脱水酵素遺伝子からの転写を分析することで、以前は葉緑体で見つかった活性が今や細胞質にのみ存在していることが確認された。この活性のシフトは、葉緑体に関連する炭酸脱水酵素の量が大幅に減少したことを示していて、成功した移動を示唆している。
光合成と成長への影響
炭酸脱水酵素の移動が確認された後、研究者たちはこの変化が植物の成長と光合成に影響を与えるかどうかを探ったんだ。彼らは遺伝子編集された系統と野生型植物を比較して、物理的な特徴、成長速度、全体的な健康を詳しく見てみた。驚くべきことに、成長や光合成速度に悪影響は見られなかったんだ。つまり、炭酸脱水酵素の活性を移動させても、植物の光合成能力には支障がなかったんだ。
重炭酸塩のダイナミクスと光合成系IIの機能
でも、研究者たちは葉緑体の炭酸脱水酵素活性が減少すると、葉緑体内の重炭酸塩の濃度に影響を与えるかもしれないって仮定したんだ。重炭酸塩は、光合成の間にエネルギー転送に重要な役割を果たす光合成系IIの機能に大きく関与しているからね。
この考えを検証するために、彼らは遺伝子編集された植物と野生型植物の葉緑体での蛍光誘導の速度を分析したんだ。その結果、編集された植物は最大蛍光に達するのに時間がかかることがわかって、重炭酸塩の欠乏が光合成系IIの機能に影響を与えていることを示唆している。
結論:重要な発見と今後の影響
この研究で行われたことは、光合成と植物の成長に関する理解を大きく進めるものだ。稲植物の葉緑体から細胞質に炭酸脱水酵素を成功裏に移動させることで、植物の炭素濃縮メカニズムの進化における重要なステップを模倣することが可能であることが示されたんだ。
酵素の移動にもかかわらず、植物は安定した成長と光合成速度を維持していて、炭酸脱水酵素の活性は二酸化炭素を捕まえるだけでなく、植物が光の変化に迅速に反応する能力にも寄与していることが確認された。
この研究は、植物遺伝学における今後の探求の基盤を築いていると言える。これまでに得られた進展は、既にこれらの適応を進化させた植物から有益な特性を取り入れることで、作物の生産性と耐性を向上させるのに役立つかもしれない。
世界が気候変動と食料安全保障に関連する課題に直面する中、こういった研究はますます重要になってくる。遺伝子編集技術の進歩が続く中で、二酸化炭素の捕集や光合成の効率を改善した作物を作り出す可能性が広がっていて、これが農業の実践や環境管理に利益をもたらすことになるんだ。
タイトル: Realisation of a key step in the evolution of C4 photosynthesis in rice by genome editing.
概要: C4 photosynthesis is a repeatedly evolved adaptation to photosynthesis that functions to reduce energy loss from photorespiration. The recurrent evolution of this adaptation is achieved through changes in the expression and localisation of several enzymes and transporters that are conventionally used in non-photosynthetic metabolism. These alterations result in the establishment of a biochemical CO2 pump that increases the concentration of CO2 around rubisco in a cellular environment where rubisco is protected from oxygen thus preventing the occurrence of photorespiration. A key step in the evolution of C4 photosynthesis is the change in subcellular localisation of carbonic anhydrase (CA) activity from the mesophyll cell chloroplast to the cytosol, where it catalyzes the first biochemical step of the C4 pathway. Here, we achieve this key step in C4 evolution in the C3 plant Oryza sativa (rice) using genome editing. We show that editing the chloroplast transit peptide of the primary CA isoform in the leaf results in relocalisation of leaf CA activity from the chloroplast to the cytosol. Through analysis of fluorescence induction kinetics in these CA relocalisation lines we uncover a role a new role for chloroplast CA in photosynthetic induction. We also reveal that relocalisation of CA activity to the cytosol causes no detectable perturbation to plant growth or leaf-level CO2 assimilation. Collectively, this work uncovers a novel role for chloroplast CA in C3 plants, and demonstrates that it is possible to achieve a key step in the evolution of C4 photosynthesis by genome editing. Significance statementC4 photosynthesis is a highly efficient adaptation to photosynthesis that fuels the worlds most productive crop plants. It evolved from conventional C3 photosynthesis through a series of changes in leaf biochemistry and anatomy. Here we achieve a key evolutionary step on the path to C4 photosynthesis in rice using genome editing. Specifically, we alter the primary location of carbonic anhydrase activity in the rice leaf from the chloroplast to the cytosol. In doing so, we uncover a novel role for carbonic anhydrase in facilitating the rapid induction kinetics of photosystem II, and initiate a new era of C4 engineering using precision breeding techniques.
著者: Steven Kelly, J. Jethva, F. Hahn, R. Giuliani, N. Peeters, A. Cousins
最終更新: 2024-05-21 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.21.595093
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.21.595093.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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