污水モニタリングによる地域の健康向上
革新的な wastewater テストがコミュニティの健康リスクについての洞察を明らかにする。
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廃水に基づく疫学(WBE)は、コミュニティの健康をモニタリングするために、彼らが生成する廃水を分析する方法だよ。この技術は、公衆衛生の関係者が、人口の中に存在するウイルス、バイ菌、その他の病原体について、タイムリーな情報を得るのに役立つ。伝統的な健康監視方法では見落とされがちな貴重な洞察を加えるんだ。歴史的に見ても、この方法はポリオ、A型肝炎、コレラ、腸チフスを引き起こす病原体など、さまざまな病原体の監視に利用されてきた。最近では、COVID-19の原因であるSARS-CoV-2の拡散を追跡するのにWBEの重要性が増してきている。廃水を分析することで、研究者はコミュニティ内のCOVID-19の普及状況を把握し、時間の経過とともにトレンドを観察することができ、公衆衛生の対応策につなげることができる。
廃水監視の拡大
廃水監視を多くの病原体や変異株を含むように広げる必要が高まっている。これにより、人口の健康リスクの全体像がより明確になるんだ。複数の病原体を同時に検出する新しい方法があれば、迅速で正確な結果が得られるかもしれない。感染症がリスクを引き続きもたらす中、廃水を通じた監視を強化することで、データの重要なギャップを埋め、公衆衛生の取り組みを支援できる。
多病原体検出ツールの開発
廃水監視を改善するために、33の一般的な病原体(バイ菌、ウイルス、原虫、寄生虫を含む)を検出・定量化するカスタマイズされたツールが開発された。この新しいアプローチは、現在のWBEの能力を拡張することを目指していて、コミュニティ内の稀な病原体や新たに出現する病原体を特定するのに役立つんだ。ジョージア州アトランタにある4つの廃水処理プラントからのサンプルを使ってケーススタディが行われたよ。
サンプル収集プロセス
アトランタの4つの処理プラントから数か月にわたって廃水のサンプルが収集された。これらのサンプルは輸送中に冷やされ、分析の準備が整うまで冷凍保存された。処理が始まると、各サンプルが解凍され、温度やpHなどの重要な情報が記録された。水中の固形物を測定するために、各サンプルから少量が分けられた。また、特別なワクチンとコントロール材料が追加され、テストプロセスが正しく機能するようにしたんだ。
病原体を検出するために、サンプルを処理する方法はさまざまに使用された。これには、直接抽出、特別な濃縮ピペットを使用する方法、スキムミルクフロック法(スキムミルクを廃水に加えて病原体を捕まえるのを助ける技術)が含まれるよ。
サンプル処理の方法論
直接抽出
直接抽出法では、廃水の小さな部分を使って、病原体に存在する遺伝物質を抽出するための特別なキットを使用して処理されるんだ。
濃縮ピペット法
濃縮ピペット法では、廃水サンプルのより大きな部分を取り、遠心分離機で回転させる。このプロセスは、水から病原体を分離するのを助ける。そして、特別なピペットを使ってサンプルをフィルターし、病原体を集中させて検出しやすくする。
スキムミルクフロック法
スキムミルクフロック法では、スキムミルクを廃水と混ぜてpHを調整する。混合物を振って病原体がくっつくのを助ける。振った後、サンプルは遠心分離機で回転され、液体が取り除かれ、病原体を含む残りの固形物が凍結されて後でテストされる。
抽出したサンプルの分子分析
サンプルが処理された後、抽出された材料を分析するために分子テストが行われた。主に2つのテストプラットフォームが使用された:定量的PCR(qPCR)用とデジタルPCR(dPCR)用。これらのテストにより、研究者は特定の病原体の存在を特定し、廃水サンプル内の濃度を測定できるんだ。
33の病原体用の予め決められたテストがある特別なカードがqPCRプロセスで使用された。陽性と判定された各病原体は、テストの読み取り結果で明確な信号で確認された。dPCRは、特定のウイルスやマーカーに焦点を当て、追加の病原体検出に使用されたよ。
データ分析と結果
研究中に収集されたすべてのデータが分析され、さまざまな病原体の存在と濃度が特定された。腸毒素形成大腸菌(ETEC)や腸管病原性大腸菌(EPEC)が最も頻繁に検出されたバイ菌の中で、アカンタメーバやジアルジアなどのいくつかの原虫もよく見つかった。ウイルスの検出にはノロウイルスやアストロウイルスが含まれていた。興味深い発見には、ストロングロイデス・ステルコラリスなどの稀な病原体が検出されたことや、検査されたサンプルの約半分にSARS-CoV-2のRNAが見つかったことがあった。
データの正規化は、異なるサンプル間での正確な比較を確保するために特定の遺伝マーカーを使って行われた。この分析により、廃水中にかなりの濃度の病原体が存在することが明らかになり、コミュニティ内の公衆衛生トレンドに関する重要な洞察が提供されたんだ。
感度と精度の重要性
単一の方法を使用して幅広い病原体を検出できる能力は、効果的な公衆衛生の監視にとって不可欠だよ。複数の病原体検出を用いた廃水検査は、コミュニティ内の微生物の状況を包括的に把握できる。これにより、潜在的な発生やトレンドを特定し、健康に関する対応を導くことができる。
現在の方法の限界を認識すること、例えば、アーカイブされた廃水サンプルを処理する際の課題やさまざまな病原体の糞便排出率を決定することの難しさが重要なんだ。でも、WBEの進歩は、公衆衛生の脅威に対する迅速な対応を可能にし、病原体の動態を理解するのに役立つかもしれない。
廃水監視の未来の方向性
廃水監視の利点についての認識が高まる中、これらの方法を国内外で拡大することへの関心が高まっている。呼吸器ウイルスを含む多くの病原体を検査する可能性は、より包括的な監視活動への道を開くんだ。
これらの方法を適切に実装すれば、データを早期に取得でき、症状が現れる前に感染症の発生を示す可能性がある。こうした積極的なアプローチは、公衆衛生の決定や介入をより良くするのに役立つんだ。
結論
廃水ベースの疫学は、コミュニティの公衆衛生の問題を理解するための有望なツールだよ。廃水で複数の病原体を同時に検査できる能力は、監視や対応戦略を大幅に向上させることができる。これらの方法の継続的な開発と洗練が、感染症からコミュニティを守る努力には重要なんだ。継続的な研究と関与により、廃水監視は公衆衛生の監視と対応において重要な役割を果たせるんだよ。
タイトル: Simultaneous detection and quantification of multiple pathogen targets in wastewater
概要: Wastewater-based epidemiology has emerged as a critical tool for public health surveillance, building on decades of environmental surveillance work for pathogens such as poliovirus. Work to date has been limited to monitoring a single pathogen or small numbers of pathogens in targeted studies; however, few studies consider simultaneous quantitative analysis of a wide variety of pathogens, which could greatly increase the utility of wastewater surveillance. We developed a novel quantitative multi-pathogen surveillance approach (35 pathogen targets including bacteria, viruses, protozoa, and helminths) using TaqMan Array Cards (TAC) and applied the method on concentrated wastewater samples collected at four wastewater treatment plants in Atlanta, GA from February to October of 2020. From sewersheds serving approximately 2 million people, we detected a wide range of targets including many we expected to find in wastewater (e.g., enterotoxigenic E. coli and Giardia in 97% of 29 samples at stable concentrations) as well as unexpected targets including Strongyloides stercoralis (a human threadworm rarely observed in the USA). Other notable detections included SARS-CoV-2, but also several pathogen targets that are not commonly included in wastewater surveillance like Acanthamoeba spp., Balantidium coli, Entamoeba histolytica, astrovirus, norovirus, and sapovirus. Our data suggest broad utility in expanding the scope of enteric pathogen surveillance in wastewaters, with potential for application in a variety of settings where pathogen quantification in fecal waste streams can inform public health surveillance and selection of control measures to limit infections.
著者: Joe Brown, G. Rao, D. Capone, K. Zhu, A. Knoble, Y. Linden, R. Clark, A. Lai, J. Kim, C.-H. Huang, A. Bivins
最終更新: 2023-12-05 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2023.06.23.23291792
ソースPDF: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2023.06.23.23291792.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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