フルオルフェニコールが豚の腸内健康に与える影響
研究がフロルフェニコールが子豚の腸内細菌と耐性遺伝子にどう影響するかを明らかにした。
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目次
抗菌剤耐性が人間と動物にとって大きな問題になってきてる。豚の飼育では、抗菌剤って呼ばれる薬がよく使われて、病気の治療や予防に役立てられてる。でも、これを使うことで豚の中のバイ菌が耐性を持つようになっちゃって、必要な時に薬が効かなくなることがあるんだ。これって、豚の腸内にいる普通のバイ菌も変えちゃうことがある。
農場では、豚は通常、餌や飲み水、または注射でこれらの薬を受け取る。フロルフェニコールっていう薬もその一つで、これは抗生物質の一種。バイ菌が成長するために必要なタンパク質の生成を止めることで働く。フロルフェニコールは動物用に作られてるけど、人間用の抗生物質であるクロラムフェニコールに似てる。フロルフェニコールは比較的新しくて、2004年にカナダで豚用に認可された。
豚には注射でフロルフェニコールが与えられ、いろんなバイ菌による呼吸器系の病気を治療するために使われる。豚に注射すると、その効果は数時間続くこともあるんだけど、バイ菌は特定の遺伝子を通じてフロルフェニコールへの耐性を持つようになることがあるんだ。この耐性は、いろんなバイ菌の間で簡単に伝わっちゃう。
今まで、フロルフェニコールを使った時に豚の腸内のバイ菌にどう影響があるかを調べた研究はなかった。この研究は、フロルフェニコールを乳豚に与えた時に腸内のバイ菌と耐性遺伝子がどう変わるかを見ようとしてる。また、母豚がこの変化にどう関与してるかも調べたいんだ。
動物と実験デザイン
この研究は動物のケアに関するガイドラインに従い、研究に使われるすべてのプロセスが承認されてた。一群の雌豚(サウ)が出産して、その子豚たちをモニターした。子豚はフロルフェニコールを受けるグループと、受けないコントロールグループに分けられた。
フロルフェニコールのグループの子豚は、生まれて早い段階で2回注射を受けた。研究中、子豚は母乳だけを飲んで、離乳するまでは他のものは食べなかった。成長に伴い、研究者たちは異なる時点で子豚のサンプルを集めて、フロルフェニコールがどんな影響を与えるかを理解しようとした。
母豚からも異なる時点でサンプルを集めて、母豚が子豚の腸内バイ菌や耐性遺伝子にどんな影響を与えてるのかを見た。
DNAの抽出
収集したサンプルを分析するために、特別なキットを使ってDNAを抽出した。サンプルをテスト用に準備するために、バイ菌からDNAを分離するためのクリーニングや処理が行われた。
腸内バイ菌の分析
子豚の腸内サンプルからのDNAを分析するために特別な技術が使われた。これは、さまざまなバイ菌を特定するのに役立つDNAの特定の領域を見ることを含んでいる。データを処理してクリーニングすることで、研究者たちはどのバイ菌がいるのか、そしてその個体数がどう変わったのかを確認できた。
ショットガンメタゲノムシーケンシング
研究者たちはまた、いくつかのサンプルに高度なシーケンシング技術を使って、腸内のバイ菌に関する詳細な情報を集めた。これには、さまざまな種類のバイ菌やその耐性遺伝子を特定して分類することが含まれた。
メタゲノムアセンブルゲノム
研究者たちはDNA配列をグループ化し分析して、サンプルの中のバイ菌の多様性を明確に理解した。彼らは新しいバイ菌種をたくさん見つけて、それらの関係性をよりよく理解できた。
耐性遺伝子の定量化
特定の耐性遺伝子がフロルフェニコール治療によって顕著に変化したため、研究者たちはそれらの遺伝子の存在量を理解するためにさらに調べた。qPCRという技術を使って、これらの遺伝子レベルを測定した。
耐性バイ菌の培養とシーケンシング
研究者たちは、フロルフェニコールに耐性のあるバイ菌を分離して、それらの耐性遺伝子の働きをよりよく理解しようとした。特別な条件でこれらのバイ菌を増やし、DNAをシーケンスして、どんな耐性遺伝子を持っているのかを調べた。
耐性バイ菌のゲノム分析
耐性バイ菌のゲノムを分析して耐性遺伝子の配列を調べた。研究者たちは、これらの遺伝子がしばしば移動可能なDNAの断片に一緒に現れることを見つけた。これにより、バイ菌がそれらを共有しやすくなる。
フロルフェニコールの腸内マイクロバイオームへの影響
フロルフェニコールを投与することは、特に注射後すぐに子豚の腸内バイ菌に大きな影響を与えた。特定のバイ菌の種類が治療を受けた子豚の中でより一般的になり、治療を受けてない子豚の中では別の種類が多く見られた。これらのバイ菌の違いは、最初の注射から約4日後に最も顕著で、140日後でも小さな変化が残っていることがあった。
子豚が成長するにつれて、腸内バイ菌の全体的な多様性にも影響が出て、治療を受けた子豚はしばらくの間、腸内のバイ菌の種類のバラエティが少なかった。
フロルフェニコールの腸内耐性遺伝子への影響
腸内バイ菌への影響と同じように、フロルフェニコール治療は子豚の腸内に存在する耐性遺伝子の種類にも大きな影響を与えた。研究者たちは、フロルフェニコールの影響を生き残るのを助ける特定の耐性遺伝子がかなり増加しているのを見つけた。
面白いことに、フロルフェニコールはフェニコールクラスの抗生物質に特化しているけど、この治療は他のクラスの抗生物質への耐性も高めてしまった。これって、フロルフェニコールの使用がただそれに対して抵抗するだけじゃなくて、他の重要な抗生物質に対しても抵抗するバイ菌を促す可能性があるってこと。
母豚の役割
研究者たちは、母豚のバイ菌と耐性遺伝子が子豚にどう影響するかを詳しく調べた。初乳、つまり母豚の最初のミルクからのバイ菌が、子豚の腸内バイ菌を出生直後に形成するのに大きな役割を果たしていることが発見された。さらに、母豚の糞も、子豚の初期の生活を通じて耐性遺伝子の重要な源泉であるように見えた。
研究結果のまとめ
フロルフェニコール治療は、フロルフェニコールだけじゃなく他の抗生物質に関連する耐性遺伝子の数を増加させた。研究中に分離された耐性バイ菌の中には、同じ移動可能なDNAの断片に複数の耐性遺伝子を持つものがあって、異なるバイ菌の間でこれらの遺伝子が移るリスクを示している。
治療中に大きな変化があったにもかかわらず、子豚が離乳した後、腸内バイ菌と耐性遺伝子はより正常なレベルに戻った。ただし、一部の小さな影響は数週間後でもまだ見られた。
ここで説明した広範な研究は、抗生物質治療、腸内バイ菌、そして子豚における抗生物質耐性の発展の間の複雑な相互作用を示している。抗生物質の使用を慎重に管理して、他の重要な薬への耐性の拡散を防ぐ必要性が強調されてる。
結論
全体として、この研究は、早い段階でフロルフェニコールを使用することで、子豚の腸内のバイ菌と耐性遺伝子がどのように変わるかを示してる。こうした治療の長期的な影響に関する重要な疑問を提起していて、家畜の健康を確保しながら、抗生物質耐性に関するリスクから人間の健康を守るために継続的な研究が必要だってことを強調してる。
タイトル: Florfenicol administration in piglets co-selects for multiple antimicrobial resistance genes
概要: Florfenicol is a broad-spectrum phenicol antibiotic used in swine for various indications. However, information regarding its effect on the pig gut microbiome and resistome is lacking. Therefore, this study investigated those effects by treating piglets with an intramuscular injection of florfenicol at 1 and 7 days of age. Fecal samples were collected from treated (n =30) and untreated (n = 30) pigs at nine different time points up until 140 days of age and their microbiomes were profiled using both 16S rRNA gene and shotgun metagenomic sequencing. The gut microbiomes of the two groups of piglets were most dissimilar in the immediate period following florfenicol administration. These differences were driven in part by an enrichment in Clostridium scindens, Enterococcus faecalis, and Escherichia spp. in the florfenicol-treated piglets and Fusobacterium spp., Pauljensenia hyovaginalis, and Ruminococcus gnavus in the control piglets. In addition to florfenicol resistance genes including floR, fexA, and fexB, florfenicol also selected for genes conferring resistance to the aminoglycosides, beta-lactams, peptides, or sulfonamides up until weaning at 21 days of age. Florfenicol-resistant Escherichia coli isolated from these piglets were found to carry a plasmid with a floR, along tet(A), aph(6)-Id, aph(3)-Ib, sul2, and blaTEM-1/ blaCMY-2. A plasmid carrying fexB and poxtA was identified in florfenicol-resistant Enterococcus avium, Enterococcus faecium, and E. faecalis isolates from the treated piglets. This study highlights the potential for co-selection and perturbation of the gut microbial community in pre-weaned piglets administered florfenicol. ImportanceAntimicrobial use and resistance remain a serious challenge in food-animal production systems. Understanding how specific antimicrobials affect the gut microbiome and resistome is an important step in reducing antimicrobial use and resistance. Florfenicol is an antimicrobial used in swine production, yet very little is known about its effect on the pig gut microbiome and resistome. In this study, we administered florfenicol to piglets at 1 and 7 days of age and characterized their fecal metagenomes through to 140 days of age. Florfenicol altered the fecal microbiome and selected for many unrelated antimicrobial resistance genes up until weaning at 21 days of age. Part of this co-selection process appeared to involve an Escherichia coli plasmid carrying a florfenicol resistance gene along with genes conferring resistance to at least four other antimicrobial classes. These results demonstrate the potential for certain antimicrobials to co-select for multiple, unrelated antimicrobial resistance genes in pigs.
著者: Devin B. Holman, K. E. James-Gzyl, A. Kommadath
最終更新: 2024-06-04 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.03.597168
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.03.597168.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。