モノクローナル抗体作成の新しい技術
革新的な方法がモノクローナル抗体開発のスピードと効果を向上させる。
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目次
最近、モノクローナル抗体(mAbs)を素早く効果的に作る方法の必要性が明らかになってきたよ、特にCOVID-19のパンデミック中にね。COVID-19から回復した人の抗体は、治療法や検査法の開発に使えるんだ。この抗体は、他の患者にも緊急の場合に使えるし、人間用に調整するための余分な手順はいらないんだ。抗体を作るのは高くつくことがあるけど、哺乳類細胞を使った技術の進歩で、プロセスは簡単で速くなってきているよ。
抗体を分離する伝統的な方法
mAbsを作るクラシックな方法はハイブリドーマ技術と呼ばれていて、1975年に発明されたんだ。特定の細胞を合体させて、長期間にわたって働き続ける抗体を生み出す方法なんだ。この方法は信頼できて正確だけど、時間がかかるし、熟練した技術者が必要だよ。新しい技術も出てきていて、B細胞を長く生き延びさせたり、単一細胞レベルで分析したり、抗体のライブラリを使ったテストを短い待機時間で行ったりできるようになっているよ。
次世代シーケンシング技術
mAbsの分離を早くするために、研究者たちは次世代シーケンシング(NGS)を使い始めたんだ。この技術は、免疫細胞の多くの遺伝子を一度に見ることができるんだ。例えば、新しい方法のおかげで、特定のターゲットに関連する何千もの遺伝子を迅速に見つけることが可能になったんだ。NGSはこれらの遺伝子を素早く分析できるけど、抗体の効果を同時にテストする良い方法はまだないんだ。
新しい機能スクリーニング法
この研究では、NGSと連携して特定のターゲットに反応する抗体のクローンを見つける新しい方法が開発されたよ。抗体の両方の部分を1つの細胞から発現できる特別なベクターを作ることで、研究者たちは従来の方法よりも早くターゲットに結合する抗体を集めることができたんだ。この新技術は、マウスのインフルエンザウイルスに対する抗体を探すためにテストされて、さまざまなウイルス株に有効なワクチンの作成につながる可能性があるよ。
迅速スクリーニングシステム
従来の抗体スクリーニング方法は時間がかかるステップがいくつもあるんだけど、これを早くする新しいシステムが設けられたんだ。これは、抗体を生成する細胞を全部混ぜて、その中から正しいターゲットに結合するものを探すっていう方法なんだ。この一括ソート方式で、研究者たちは一つ一つ調べるのではなくて、多くの候補をすぐに集めることができるんだ。
データベースの構築と抗体の分析
異なるインフルエンザウイルスのタンパク質を使った実験で、広範に反応する抗体を見つける試みが行われたよ。研究者たちは抗体を生成する細胞をたくさん見つけて分離したんだ。この細胞を集めて、インフルエンザウイルスのタンパク質にしっかり結合するものを遺伝子解析していったよ。成功した遺伝子と抗体の機能の組み合わせは期待できる結果を示していて、さまざまなインフルエンザ株に結合できる抗体が多様に存在することが分かったんだ。
抗体の反応性テスト
研究者たちは、いくつかの有望な候補を詳しく調べて、異なるインフルエンザウイルスのタンパク質にどれだけ反応するかを見たんだ。特別な形の抗体を生産して、それぞれがどれだけしっかりとさまざまなターゲットに結合できるかを測定したんだ。単に反応を見つけるだけではなく、どれが多くのインフルエンザウイルス株に効果的に結合できるかを確認するのが目的だったよ。
効率的な抗体分離の必要性
効果的な治療用抗体の需要が高まる中で、医療に使える抗体を効率よく見つけることの課題が残っているんだ。従来の方法では、一度に限られた数の抗体しか作れないし、新しい技術、たとえば抗体生産のための特別なヒト細胞株を使う方法が人気になってきているよ。この研究は、感染時に強い反応を示すことで知られるメモリB細胞に焦点を当てたんだ。
新しい抗体提示システム
抗体の効果をその遺伝情報と直接リンクさせるために、新しいシステムが設計されたよ。このアプローチは、従来の方法の利点と最新のシーケンシング技術を組み合わせたものなんだ。抗体を発現する方法を工夫して、結合特性をそれをコードする遺伝データに直結させることを目指しているんだ。
新システムの利点
この新しいシステムにはいくつかの利点があるよ。まず、抗体を細胞表面で発現させることで、抗体の結合機能を遺伝情報と直接結びつけることができるんだ。これによって、どの抗体をさらに研究するかを選別するプロセスが簡単になるんだ。次に、抗体の重鎖と軽鎖を結びつけることで、別々に扱う方法に比べて時間やリソースを節約できるんだ。最後に、信頼性が高くて早いクローン技術で抗体ライブラリの作成が速くなって、研究者たちは効率的な候補に早く注目できるようになるんだ。
ワクチン開発への広範な影響
この新しいシステムをロボット自動化と組み合わせることで、研究者たちは有用なmAbsをより効率的に分離する作業ができるようになるんだ。これはさまざまな病気に対するワクチン開発に大きな影響を与えて、アウトブレイクに対する迅速な対応を可能にするかもしれないよ。
結論
モノクローナル抗体の分離と生産の進展は、新しい治療法や診断ツールの道を切り開いているよ。次世代シーケンシングと機能スクリーニング法の統合は、感染症に対する適切な抗体を見つけるための有望な道筋を提供していて、これらの技術の進化が今後の健康問題へのより効果的な対応につながると思うよ。
タイトル: Development of a new genotype-phenotype linked antibody screening system
概要: Antibodies are powerful tools for the therapy and diagnosis of various diseases. In addition to conventional hybridoma-based screening, recombinant antibody-based screening has become a common choice; however, its application is hampered by two factors: 1) screening starts after Ig gene cloning and recombinant antibody production only, and 2) the antibody is composed of paired chains, heavy and light, commonly expressed by two independent expression vectors. Here, we introduce a method for the rapid screening of recombinant monoclonal antibodies by establishing a Golden Gate-based dual-expression vector and in-vivo expression of membrane-bound antibodies. Using this system, we demonstrate the rapid isolation of influenza cross-reactive antibodies with high affinity from immunized mice within 7 days. This system is particularly useful for isolating therapeutic or diagnostic antibodies, e.g., during foreseen pandemics. Impact StatementA Golden Gate-based dual-expression vector enables rapid screening, which facilitates efficient isolation of high-affinity cross-reactive antibodies for therapeutic or diagnostic use and provides a crucial advance for pandemic preparedness.
著者: Takashi Watanabe, H. Hata, Y. Mochizuki, F. Yokoyama, T. Hasegawa, N. Kumar, T. Kurosaki, O. Ohara, H. Fukuyama
最終更新: 2024-06-29 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.06.581777
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.06.581777.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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