電気刺激の炎症への影響
健康な細胞と炎症がある細胞における電流が炎症に与える影響を調査中。
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身体的な刺激を使った治療法の研究は色々な分野があるよ。この多様性は、生物学的な知識へのアプローチの違いや共通の方法がないことから来てるんだ。だから、結果を比較したり、実用的な治療に結果を反映させるのが難しい。最近の議論では、こういう問題が医療においてどう現れるかが明らかになった。私たちは、身体的な刺激の効果をより明確に理解することが、特に炎症に関して価値があると考えてる。
3Dモデルの作成
これらの課題に対処するために、特定の配置で人間の細胞を含むシンプルな3Dモデルを開発したんだ。このモデルには線維芽細胞(結合組織を形成する手助けをする細胞)がコラーゲン構造に埋め込まれていて、その上にケラチノサイト(皮膚細胞)が置かれてる。これによって実験を標準化できるんだ。このモデルを使って、様々な身体的刺激が炎症にどう影響するかを観察したいんだ。
刺激の種類
四種類の電流を試すことにしたよ:1ボルトと5ボルトの直流(DC)、および5ボルトで周波数が10Hzと100Hzの交流(AC)を用意した。全てのテストで、正常(健康)な状態と炎症がある状態の両方を見るつもり。治療前、治療後1時間、治療後48時間の3つの重要な時間ポイントで測定するよ。
初期の発見
初期の分析では、ACタイプが炎症に直接的な影響を与えてるわけではないみたい。ただ、細胞の成長には影響を与えるんだ、モデルの状態や周波数によって。対照的に、5ボルトのDCタイプは炎症を解消するのに役立つことが分かって、1ボルトのDCタイプは健康なサンプルで炎症を長引かせるみたい。この研究は、様々な電気刺激が異なる細胞タイプや状態に及ぼす影響を見た過去の研究に追加されたものなんだ。
実験の設定
3Dモデルを作成するために、コラーゲン、水、線維芽細胞を混ぜてゼル状の物質を作った。これを固めて真皮層を作ったよ。3日後に、上層にケラチノサイトを追加した。このモデルは細胞が適切に成長するために2週間維持されたんだ。
炎症を模擬するために、モデルに既知の炎症物質(TNF-α)を追加してから電気刺激を加えた。細胞を健康で活発に保つために、条件を厳密に管理して定期的に培地を交換した。電気刺激は実験の最初に無菌の鍼を使って1回だけ適用したよ。
分析技術
異なる条件が遺伝子発現や代謝活動にどう影響するかを分析するために、高度な技術を使った。サンプルからRNAを抽出してシーケンシングして、異なる条件下でどの遺伝子が活性化されているかを確認した。代謝については、NMR分光法を使って成長培地の変化を理解して、実験中に存在したり使われたりした様々な代謝物を特定したよ。
結果
結果は、電流が細胞に与える影響が状態(健康か炎症か)や使用した電流の種類によって明確に異なることを示してる。健康なサンプルでは、直流の一種(DC1)と高周波数交流(AC100)のみが炎症活動に持続的な変化をもたらしたよ。
面白いことに、DC1は炎症と特定の免疫機能の活動を増加させたけど、AC100は免疫応答に関連する細胞プロセスを抑制してるみたいで、異なる形式の電流が炎症に対して逆の効果を持つことを示してる。
一方、炎症のあるサンプルを見ると、すべての種類の電流が1時間後に一時的に炎症活動を増加させたけど、この効果は48時間後には減少した。ただし、5ボルトの直流(DC5)は、傷の治癒に関連する効果を持続的に示したんだ。
時間依存の効果
効果が時間とともにどう変化するかを見たら、炎症のあるサンプルでは実験の間に細胞成長に関連するいくつかのマーカーが減少してた。これは、炎症が初期の反応を刺激するかもしれないけど、最終的には効果的な治癒が減少することを示唆してる。
健康なサンプルでは、直流タイプが炎症マーカーに長続きする影響を持っていて、最初の刺激がなくても時間とともによりプロ炎症状態に向かう道があることを示したよ。
状態による違い
サンプルの状態(健康か炎症か)が電気刺激への反応に大きく影響した。私たちの発見では、炎症のあるサンプルは一般的に健康なサンプルと比べて細胞応答においてより顕著な違いを示してた。
例えば、交流(AC)は炎症のあるサンプルでは炎症の測定値が減少する結果になったけど、健康なサンプルでは時には炎症に関連する細胞活動を増加させることがあった。
今後の方向性
この初期調査の結果を踏まえて、今後の研究の方向性はいくつかあるよ。まず、異なる電圧や周波数の直流と交流を探ることが重要だよ。これによって、組織の異なる状態にどう影響するかについてより包括的なデータが集められるはず。
次に、観察された効果の背後にある正確な生物学的メカニズムを調べるのが有益だと思う。これは、異なる免疫細胞や代謝経路の役割を見てみることが含まれるかも。
最後に、これらの実験室の結果を実用的な治療法に翻訳するには、より複雑な生物学的システムでのさらなるテストが必要で、理想的には人間の炎症状態を治療するための電気療法の安全性と効果を評価する臨床試験につながることが望まれるよ。
まとめ
要するに、この研究は電気的刺激と異なる組織の生物学的反応の間の複雑な相互作用を浮き彫りにしてる。まだ学ぶことはたくさんあるけど、結果は電気療法が炎症を管理する役割を果たせる可能性があることを示唆している、特に特定の条件下でね。この分野のさらなる探求が、炎症性疾患に苦しむ患者にとってより効果的な治療法につながるかもしれない。
タイトル: Differential Anti-Inflammatory Effects of Electrostimulation in a Standardized Setting
概要: The therapeutic usage of physical stimuli is framed in a highly heterogeneous research area, with variable levels of maturity and of translatability into clinical application. In particular, electrostimulation is deeply studied for its application on the autonomous nervous system, but less is known about the anti-inflammatory effects of such stimuli beyond the inflammatory reflex. Further, reproducibility and meta-analyses on existing results are extremely challenging, owing to the limited rationale on dosage and experimental standardization. In this work we propose a series of controlled experiments on the effects of electrical stimuli (in direct and alternate current) delivered on a standardized 3D bioconstruct constituted by fibroblasts and keratinocytes in a collagen matrix. Transcriptomics backed by metabolomics at selected time points allow to obtain a first systematic overview of the biological functions at stake, highlighting the differential anti-inflammatory potential of such approaches, with promising results for 5V direct current stimuli. We hope that our results will trigger an interest and a facilitation in the study of the anti-inflammatory effects of physical stimuli, highlighting not only the potential but also the limitations of such approaches, offering, ultimately, solid evidence for future translation into the clinic.
著者: Christine Nardini, B. Di Pietro, S. Villata, S. Dal MOnego, M. Degasperi, V. Ghini, T. Guarnieri, A. Plaksienko, Y. Liu, V. Pecchioli, L. Manni, L. Tenori, D. Licastro, C. Angelini, L. Napione, F. Frascella
最終更新: 2024-07-10 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.05.602081
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.05.602081.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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