ライブセルイメージング技術の進展
新しい顕微鏡の方法が、生きている細胞や生物の観察を強化するよ。
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光学顕微鏡は生物学や医学の研究で重要なツールだよ。細胞や組織、そして小さな生き物をリアルタイムで詳細に観察できるんだ。年々、科学者たちは脳の活動を観察するための特別な方法を開発してきた。この方法はニューロン同士のコミュニケーションを可視化するのを手助けしてる。線虫のC.elegansやヤツメウナギのP.marinus、果物バエのD.melanogasterなんかは、その小さいサイズと透明性のおかげで、研究でよく使われてるよ。
生きた顕微鏡の課題
生きた顕微鏡での大きな課題は、標準的な顕微鏡が平面の2次元画像しか取れないことだよ。でも、生き物は3次元なんだ。3Dビューを得るためには、研究者は通常、異なる深さで一連の平面画像を撮る必要があって、これが遅くなることもある。特に細胞が動いたり、細胞内の分子がシフトするような速い変化がある時は特にそう。従来の方法では、こうした迅速な生物学的イベントに対応しきれず、重要な瞬間を捉えるのが難しいんだ。
制限を克服する新技術
光シート蛍光顕微鏡(LSFM)は、この問題を解決するための新しい技術だよ。一度にサンプルの1層だけを明るく照らすために、細い光の線を使うんだ。この方法はサンプルへのダメージを減らし、指標の光が消えるのを防ぐのに役立つ。でも、LSFMはまだ一度に1層ずつ画像を収集する必要があって、急速な変化を捉えるには限界があるんだ。
いくつかの研究者は、光フィールド顕微鏡のように、同時に3D画像をキャッチしようと新しい方法を試みている。でも、多くのこれらの方法はまだ明瞭さに苦戦していて、複雑な処理を必要とすることがあって、クリアな結果が得られないこともある。別の方法である拡張フォーカス顕微鏡は、同時により大きな3Dエリアをカバーできるけど、その分画像の品質が犠牲になるんだ。
補正された多焦点顕微鏡の力
有望な解決策は補正された多焦点顕微鏡(MFM)という方法から来ているよ。これは特別な光学素子を使って、同時に多くの画像を撮影して、1回のショットで層の全スタックをキャッチするんだ。グレーティングを使って、顕微鏡の部品を動かさずに複数の画像の層を1つのカメラセンサーに焦点を合わせることができるんだ。この技術はデータを素早くキャッチするだけでなく、サンプルの深さ全体を通して明瞭さも保つんだ。
エラーを減らすように設計された高品質のレンズを使用することで、MFMはサンプルのすべての層から詳細な画像を集めることができるよ。これは、試料に深く焦点を合わせるとエラーが増えるから重要なんだ。具体的には、焦点が正しくないと画像がぼやけて、研究に役立たなくなっちゃう。
明瞭さに加えて、素早く画像をキャッチすることは生物学の研究では必須だよ。速いプロセスを見るとき、キャッチされる光の量や信号の強さが重要なんだ。研究者たちは、MFMで使用される光の効率を改善するための進展を遂げたよ。
イメージングの色の課題に対処する
回折光学を使う際の課題は、画像の色を歪めてしまうことなんだ。これは蛍光顕微鏡では特に重要で、様々な構造を観察するためには異なる色が必要だからね。これを修正するために、色散補正という方法が使われる。これにより、色の歪みがクリアな画像を捉えるのを妨げないようにするんだ。
最近では、色散がどのように補正されるかを改善するための新しいデザインが出てきているよ。複雑なセッティングを必要とせず、最近のデザインではシンプルな光学部品のペアだけで機能するようになった。これにより、システムが使いやすくなって、ハイクオリティのイメージングを維持できるんだ。
25プレーンカメラアレイ顕微鏡の進展
光学顕微鏡における重要な進展の一つは、25プレーンカメラアレイ顕微鏡、通称M25だよ。この装置は、複数のカメラを使って25プレーンの画像を同時にキャッチすることで、生きたサンプルの迅速なイメージングを可能にしているんだ。この設定は、1秒間に100以上の画像ボリュームを撮影できるから、研究者たちは速い生物学的イベントを自然な環境で捉えることができるんだ。
M25の設定は、以前のデザインよりもシンプルで、色の歪みを補正するためのストリームラインされたアプローチを持っている。だから、さまざまな生物学的研究に簡単に使えるようになっていて、他のシステムでは難しいかもしれない深い試料も扱えるんだ。
M25を使って、研究者たちは生きた生物がどのように機能するかを貴重な洞察を得られるんだ。細胞がどのように振る舞うかや、組織がどのように協調して働くかを追跡できるし、動いている動物でもこれが可能なんだ。リアルタイムでこれらのプロセスを可視化できるのは、生物学の多くの分野にとって大きな変化だよ。
M25顕微鏡の応用
M25顕微鏡は、果物バエや線虫のような様々なモデル生物でテストされてきたよ。研究者たちは、これらの動物がどのように動くか、そしてニューロンがどのように反応するかを観察するのに使ってるんだ。一度に複数の層の画像をキャッチすることで、M25は生物の異なる部分がどのように相互作用し、異なる刺激にどう反応するかを見せてくれるんだ。
例えば、研究者たちはM25を使って果物バエの心臓を調べ、心臓が打つときに細胞核がどのように動くかを追跡している。このことは、心臓がどのように発達し、機能するかをリアルタイムで理解する手助けとなるんだ。
C.elegansの研究では、研究者たちは筋肉がどのように収縮し、運動中にニューロンがどのようにコミュニケーションを取るかを観察できる。この洞察は、基本的な生物学を理解するのと同時に、これらのシステムが人間のようなより複雑な動物でどのように機能するかを理解するのに重要だよ。
M25の性能評価
M25顕微鏡の性能は注意深くテストされているんだ。小さな蛍光ビーズを使うことで、研究者たちはシステムが画像をどれだけうまく収集できるか、そしてどれだけ明瞭に詳細をキャッチできるかを評価している。結果は、M25が高品質の画像を生成できることを示していて、重要な情報を失うことなく、速く動くサンプルを効果的に追跡できることを証明しているんだ。
研究者たちが生きたサンプルのイメージングにM25を使うと、細胞が異なる条件下でどのように振る舞うかを分析できる。この機能は、細胞生物学、神経生物学、さらには薬剤開発の研究において、細胞の相互作用や振る舞いを理解するために非常に重要なんだ。
結論
光学顕微鏡の進展、特にM25顕微鏡の導入は、生物学研究の分野に大きな影響を与えてるね。これらの新しいツールは、生きた標本の高速で高解像度のイメージングを可能にし、以前は捉えにくかったプロセスを観察する窓を提供しているんだ。画像の明瞭さ、速度、色の歪みに関する課題を克服することで、研究者たちは以前には探求できなかった生命の複雑さを探ることができるようになったんだ。
これらの技術の潜在的な応用は広範で、基本的な生物学研究から医療や環境科学での実際の応用まで及んでいる。技術がさらに進化していく中で、顕微鏡の未来は明るいよ。さらなる洗練されたイメージング方法の開発に向けた研究も続いているからね。
タイトル: High-speed 3D Imaging with 25-Camera Multifocus Microscope
概要: We here report an aberration-corrected 25-plane camera array Multifocus microscope (M25) for high-speed, high-resolution wide-field optical microscopy in three spatial dimensions (3D). We demonstrate live imaging of 25-plane 3D volumes of up to 180x180x50um at >100 volumes per second. 3D data is recorded simultaneously by an array of 25 small, sensitive, synchronized machine-vision cameras. M25 employs aberration-corrected Multifocus microscopy--an optical method where diffractive Fourier optics are used for multiplexing and refocusing light-- with a simplified design for chromatic dispersion correction where a corrective diffractive gratings is placed on each camera in the array. This elegant architecture for chromatic correction will be applicable in a broad range of diffractive imaging applications. M25 is a powerful optical tool for high-speed 3D microscopy in that it allows both non-invasive, label-free bright-field and highly sensitive fluorescence microscopy. We showcase M25 capabilities in 3D particle tracking, bright-field, and fluorescence imaging in D. melanogaster, and locomotion and neural activity studies in C. elegans.
著者: Eduardo Hirata-Miyasaki, A. A. Bajor, G. M. Petterson, M. L. Senftleben, K. E. Fouke, T. G. W. Graham, D. D. John, J. R. Morgan, G. Haspel, S. Abrahamsson
最終更新: 2024-09-24 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.23.614351
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.23.614351.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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