病原菌が植物の防御を出し抜く方法
病原体は植物の免疫システムを弱めるためにタンパク質を使って、重要な防御メカニズムを明らかにするんだ。
Lennart Wirthmueller, S. Kaur, T. Colby, D. Thieme, C. Proksch, S. Matschi, I. Matic
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植物には、有害な微生物、つまりバイ菌やカビから守る免疫システムがあるんだ。でも、一部の病原体はこの防御をかいくぐる方法を見つけちゃった。よくある戦略の一つは、植物の細胞にタイプIIIエフェクターと呼ばれる特別なタンパク質を注入すること。これらのタンパク質は、植物の防御を妨害して、病原体がより簡単に植物に感染できるようにするんだ。
病原体が植物を攻撃する方法
バイ菌のPseudomonas syringaeは、そんな病原体の一つで、植物に感染するんだ。こいつはタイプIIIエフェクターを29個も持ってて、これを植物の細胞に送り込む。これらのエフェクターは、植物の免疫システムを混乱させることができて、これは通常、植物が病原体に関連する特定のパターンを認識するときに引き起こされるんだ。
植物がこれらのパターンを認識すると、パターン誘導免疫(PTI)という第一の防衛ラインを活性化する。でも、もし病原体がその特定の植物を攻撃するのに適していれば、エフェクターを植物の細胞に送り込むことでPTIを無効化できる。
植物には、ヌクレオチド結合ドメインロイシンリッチリピート受容体(NLR)という特別なタンパク質からなる第二の防御層がある。これらの受容体は、病原体のエフェクターによって引き起こされる変化を検出して、エフェクター誘導免疫(ETI)と呼ばれるより強力な免疫反応を引き起こす。これらの免疫反応の成功は、病原体が注入したエフェクターの種類と、植物に存在する特定のNLRに依存しているんだ。
ADP-リボシル化の役割
多くのバイ菌のエフェクタータンパク質は、植物のタンパク質を修飾して免疫反応を弱める酵素なんだ。一般的な修飾の一つはADP-リボシル化と呼ばれるもので、このプロセスでは、ADP-リボースという小さな分子を植物のタンパク質中の特定のアミノ酸に付けるんだ。
Pseudomonas syringaeからのエフェクターの一つ、HopF2は、植物のMITOGEN-ACTIVATED PROTEIN KINASE KINASE 5(MKK5)というタンパク質をADP-リボシル化できる。これが起こると、植物の防御を活性化する信号を妨害することができる。
研究者たちは、HopF2がもう一つのタンパク質RIN4にも影響を与えることを発見した。植物にHopF2がたくさんあると、別のエフェクターAvrRpt2によってRIN4が切断されるのを防ぐことができる。RIN4は重要で、他のさまざまなエフェクターによっても標的にされるから、植物はRPM1やRPS2といったNLRを通じてこれらの操作から守ることができるんだ。
タンパク質修飾の特定
科学者たちは、バイ菌のエフェクターによって修飾されるタンパク質を特定するためにさまざまな方法を開発してきた。一部の技術は、特定のラベリング方法や生化学的アッセイを使用して、どのタンパク質が影響を受けているのかを調べることを含んでいる。
効果的な戦略の一つは、ADP-リボシル化されたタンパク質に結合できるAf1521マクロドメインという特殊なタンパク質を使うこと。これを使うことで、科学者たちは植物内のどのタンパク質がバイ菌のエフェクターによって修飾されたのかを特定できるんだ。
ADP-リボシル化に関する実験
実験では、科学者たちはエフェクタータンパク質AvrRpm1とHopF2を発現するように遺伝子操作された植物系統を使った。修飾されたRIN4タンパク質を治療後に検出できるか見たかったんだ。
AvrRpm1を発現する植物では、RIN4が修飾されたことを示すバンドがゲル上に見られたけど、HopF2を発現する植物では同じようなバンドは現れなかった。これは、HopF2によって修飾されたタンパク質が少ないか、植物組織から十分に抽出されていないことを示しているんだ。
ある実験では、Af1521ドメインを使ってADP-リボシル化されたタンパク質を濃縮し、質量分析でRIN4タンパク質に対応するいくつかのペプチドマッチを見つけた。
他の標的を見つける
研究者たちは、AvrRpm1によって修飾される他のタンパク質も発見した、植物のシグナル伝達や光の認識に関わるものもあって、これが病原体が植物の防御を抑えるさらなる方法を示唆するかもしれない。ADP-リボシル化された全てのタンパク質は見つけられなかったけど、この方法で、病原体の機能を理解するために重要かもしれないいくつかの修飾された標的を特定できたんだ。
これからの進展
これらの実験からの発見は、タンパク質修飾を検出するために開発されている方法が効果的であることを示唆している。このプロセスは、他のバイ菌エフェクターによって標的にされるタンパク質をプロファイリングするためにも使えるんだ。
例えば、科学者たちは植物で別のエフェクター、HopU1も試した。このエフェクターはGRP7というタンパク質をADP-リボシル化する。同じ検出方法を使うことで、科学者たちはGRP7が修飾されたことを確認できた。
意義
Pseudomonas syringaeのような病原体が植物のタンパク質を操作する方法を理解することは、科学者たちが植物の防御を強化する新しい方法を見つけるのに役立つ。どのタンパク質が影響を受けていて、どうなるのかを知ることで、研究者たちはこれらの感染に対して強い抵抗力を持つ植物を開発できるかもしれない。
この情報は、農業実践にも重要なんだ。病原体が現在の制御手段に対する耐性を強める中で、免疫反応を向上させた植物を育成または工学的に改良することは、より持続可能な農業に繋がる可能性がある。
結論
要するに、科学者たちは植物の免疫システムとバイ菌の病原体の相互作用を理解しようと努力している。バイ菌のエフェクターが植物のタンパク質をどう修飾するかを特定することで、研究者たちは植物の防御メカニズムについての洞察を得て、その抵抗力を高める方法を見つけることができる。植物の病原体が進化する中で、この知識は食料安全保障や持続可能な農業にとってますます重要になっていくんだ。
タイトル: Untargeted proteomics identifies plant substrates of the bacterial-derived ADP-ribosyltransferase AvrRpm1
概要: One class of enzymes that plant pathogens employ to manipulate innate immunity and physiology of the infected cells are host-targeted ADP-ribosyltransferases. The bacterial pathogen Pseudomonas syringae uses its type III secretion system to inject several effector proteins with ADP-ribosyltransferase activity into plant cells. One of them, AvrRpm1, ADP-ribosylates the plasma membrane-associated RPM1-INTERACTING PROTEIN 4 (RIN4) in Glycine max and Arabidopsis thaliana to attenuate targeted secretion of defense-promoting compounds. Substrate identification of host-targeted ADP-ribosyltransferases is complicated by the biochemical lability of the protein modification during plant protein extraction and in several cases required prior knowledge on plant immune signaling pathways that are impaired by the ADP-ribosylating type III effector. Using the AvrRpm1-RIN4 pair as a proof-of-concept, we present an untargeted proteomics workflow for enrichment and detection of ADP-ribosylated proteins and peptides from plant cell extracts that in several cases provides site-resolution for the modification.
著者: Lennart Wirthmueller, S. Kaur, T. Colby, D. Thieme, C. Proksch, S. Matschi, I. Matic
最終更新: 2024-10-20 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.09.25.558804
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.09.25.558804.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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