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# 生物学 # 微生物学

振動がマラリア寄生虫の成長に与える影響

研究によると、振動条件がプラスモディウム・ファルシパルムの成長率にどう影響するかが明らかになった。

Pietro Cicuta, E. Kals, M. Kals, J. C. Rayner

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目次

マラリアはプラスモディウムっていう小さな寄生虫が原因で起こる深刻な病気なんだ。その中の一つ、プラスモディウム・ファルシパラムは、最も重症のマラリアのケースを引き起こすやつなんだよ。感染の影響は主に寄生虫が赤血球(RBC)の中にいる時に現れるんだ。これらの寄生虫は健康なRBCに侵入してすぐに増殖して、最終的に細胞が破裂して新しい寄生虫が放出され、さらに多くのRBCに感染するんだ。

プラスモディウム・ファルシパラムのライフサイクル

P.ファルシパラムのライフサイクルにはいくつかの段階があるよ。血流に入ると、寄生虫はRBCに侵入してシゾンという形に変わるんだ。この形は約48時間で26から32の新しい寄生虫、メロゾイトを作ることができるんだ。感染したRBCが破裂すると、メロゾイトが血流に放出され、さらに多くのRBCに侵入できるんだ。

これらの寄生虫が体内でどこで成長して侵入するのかはまだ研究中なんだ。研究では、感染したRBCが臓器の血管壁にくっつくことができることが示されていて、血管が侵入の可能性のある場所だと考えられているよ。さらに、骨髄や脾臓にもたくさんの寄生虫がいるかもしれないという証拠があるんだ。

流体の動きが寄生虫の成長に与える影響

血流の中で、寄生虫とRBCは血液の流れによる力を受けるんだ。P.ファルシパラムの成長を調べる実験はほとんどが静的な環境で行われていて、体内の実際の条件を反映していないんだ。血流をよりよく模倣するために、研究者たちは振動法を使って寄生虫の培養に動きを取り入れることができるんだ。

振動はオービタルシェイカーを使って簡単に安価に行えるんだ。過去の研究では、振動がP.ファルシパラムの成長にどう影響するかについて混合した結果が出ているよ。振動が成長を早めるとも言われているけど、遅くなるとも言われているんだ。振動の利点は、寄生虫が培養全体に分散するのを助けることができ、それが感染率に影響を与えるかもしれないんだ。

ただし、異なるラボで振動の方法が異なるから、結果を比較するのが難しいんだ。培養容器の形やサイズ、液量、振動の速さなどが、振動が寄生虫の成長に与える影響をすべて左右することがあるからね。

流体の動きの理解

振動が培養に与える影響を考えると、流体の流れは滑らか(層流)か混沌(乱流)かに分けられるよ。層流では、液体が一貫した方法で動くけど、乱流では流体が急速に混ざり合いながら不規則に動くんだ。それぞれの流れがせん断力を生むんだけど、これは液体の層が異なる速度で動く時に起こるんだ。

P.ファルシパラムの成長の研究では、こういった流れの条件を理解することが振動が寄生虫やRBCに与える影響を分析するのに役立つんだ。寄生虫の活動は、さまざまな振動条件下でRBCにかかるせん断ストレスによって影響を受けることがあるんだ。

振動条件と成長率に関する研究

この研究では、振動がP.ファルシパラムの成長にどのように影響するかを様々な条件下で調べているんだ。振動の速さ、培養の量、フラスコの形、RBCの濃度を調整して寄生虫の成長の変化を測定したんだ。

結果は、振動が寄生虫の成長を増加させたり減少させたりすることができることを示したよ。RBCが動き始め、高いせん断ストレスが血液にかかる特定の速度を特定したんだ。この特定の速度でさまざまな遺伝子改変株のP.ファルシパラムをテストした時、寄生虫がRBCに侵入するのを助ける特定のタンパク質が高せん断条件でより重要になっていることが分かったんだ。

制御された条件での寄生虫の成長

この研究では、異なる株のP.ファルシパラムをヒトのRBCで育てたよ。研究者たちは、制御された条件下で寄生虫の成長を支えるために特定の培地を使用したんだ。すべてのサンプルの人道的な取り扱いを保証するために、各実験は倫理的な承認を得た設計になっているんだ。

培養を同期させるために、研究者たちはソルビトール同期法という方法を使ったよ。この技術によって、後期の寄生虫を選択的に分解し、培養が主に若い寄生虫で構成されるようにしたんだ。

成長アッセイの実施

成長アッセイを設定して、寄生虫の成長に対する異なる振動条件の効果を測定したんだ。サンプルは注意深く準備されて、新しい血液に分割されて正確な結果が得られるようにしたよ。感染したRBCの割合、つまりパラサイトミアはフローサイトメトリーを使って測定された。

振動中に異なる速さをテストして、野生型株のP.ファルシパラムの成長率を調べたんだ。データは、低速では寄生虫が振動から利益を受けない一方、高速では株に応じて成長率が変わることを示したんだ。

振動条件下でのRBCの挙動の観察

研究者たちが振動手順中の血液の動きを撮影した時、低速ではRBCがウェルの底に沈んでいることが分かったんだ。速度が上がるにつれて、媒体の動きがRBCを吊り下げ始めたんだ。最終的に、高速ではRBCがよく混ざるようになったよ。

その後、三つの異なる株のP.ファルシパラムの成長率を分析したんだ。結果は、振動速度と成長率の間に複雑な関係があることを示したよ。一部の株は高速でのパフォーマンスが良かったけど、他の株は成長が増加しなかったんだ。これは異なる株の間の生物的な変動性を強調しているんだ。

培養容器の形状の役割

寄生虫を育てるために使用する培養容器の形とサイズも結果に大きな影響を与えたんだ。小さなウェルでは、大きなウェルと同じクラスター効果を得るために高い速度が必要だったんだ。フラスコで観察された動きのパターンは、丸いウェルよりも不規則だったから、流体の力学が異なったんだ。

この変動性は、P.ファルシパラムの培養時に異なる物理的条件を考慮する必要があるという考えを強化したよ。過去の研究からの不一致な結果は、実験設定のこれらの変動から生じる可能性があるんだ。

赤血球密度の影響

RBCの密度、つまりヘマトクリットも研究の変数だったよ。異なるヘマトクリットレベルをテストすることによって、研究者たちは密度の変化が振動速度が寄生虫の成長に与える影響に影響を与えることを発見したんだ。成長率を比較する際には、ヘマトクリットの一貫性が重要だったよ。

侵入リガンドに関する発見

研究者たちはまた、侵入プロセスに関連する特定のタンパク質が振動条件下での成長率にどのように影響するかを探求したんだ。彼らは、メロゾイトがRBCに付着する方法に重要な役割を果たすPfEBAとPfRHという二つのタンパク質群に注目したんだ。

特定の遺伝子を無効化したノックアウト実験を通じて、研究者たちは改変株の成長率を野生型株と比較したんだ。その結果、特定のノックアウト株は、静的条件に比べて振動にさらされた際に成長率が低下することが示されたんだ。これは、これらのタンパク質が寄生虫が血流中で高いせん断力に遭遇したときに不可欠だってことを示唆しているんだ。

影響の要約

要するに、この研究は振動条件下でのプラスモディウム・ファルシパラムの成長に影響を与えるいくつかの要因があることを示したよ。容器の形、振動速度、赤血球の密度などが含まれているんだ。この研究の結果は、流体力学と寄生虫のライフサイクルの間に複雑な関係があることを示唆しているんだ。

これらの相互作用を理解することは、マラリアの生物学についての知識を深めるための今後の実験の設計に役立つかもしれないし、マラリア感染の診断や治療のためのより良い戦略につながるかもしれないんだ。この発見は、寄生虫の行動の真の性質とさまざまな治療に対する反応を解明するために、生理的状態を模した制御された実験室条件を作る重要性を強調しているんだ。この研究は、特に血流と栄養の供給の文脈で、ヒトの体内の異なる環境にマラリア寄生虫がどのように適応するかに関するさらなる調査への扉を開くんだ。

全体として、この研究はマラリアの理解を深めるのに貢献していて、病気と戦うための将来の治療開発に貴重な洞察を提供するかもしれないんだ。

オリジナルソース

タイトル: Under conditions of high wall shear stress, several PfEBA and PfRH ligands are important for Plasmodium falciparum malaria blood-stage growth

概要: Malaria kills over 600,000 people annually, with all the clinical symptoms being caused by the blood stage of the infection. Malaria parasites invade red blood cells (RBCs), where they grow and multiply until daughter parasites egress to invade new RBCs. This cycle happens primarily in the blood circulation, bone marrow, and spleen, where parasites and RBCs are exposed to flow-generated forces. Despite this, almost all in vitro growth assays are carried out in static conditions, which are a poor mimic for the conditions that malaria parasites encounter in the body. Therefore, we systematically tested the impact of dynamic conditions created by orbital shaking platforms on parasite growth and explored the link between growth and the wall shear stress forces generated by fluid motion. For several strains of the deadliest malaria species, Plasmodium falciparum, we showed that strikingly, for any given vessel, there is a critical shaking speed at which growth rates are reduced, corresponding to when the RBCs start to aggregate in the centre of the well, before growth increases again at higher shaking speeds. The force that parasites are exposed to at this critical shaking speed corresponds cloesly with previous measurements for the forces that RBCs and parasites are exposed to in the microvasculature. During invasion, the early attachment of the parasites to RBCs is dependent on two families of attachment proteins, the Erythrocyte Binding Antigen (PfEBA) family and the Reticulocyte Binding Protein Homologue (PfRH) family, which are thought to be largely redundant in function. We used a panel of PfEBA and PfRH knock-out lines to show for the first time that several of these ligands have greater importance in high wall shear stress conditions. This both adds new understanding to the function of these ligand families, and indicates that the concept of the critical shaking speed can reveal new parasite growth phenotypes.

著者: Pietro Cicuta, E. Kals, M. Kals, J. C. Rayner

最終更新: 2024-12-02 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.24.614720

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.24.614720.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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