Progressi nelle Tecniche di Isolamento dei Miosatelliti Usando Microfluidica

La Cina è uno dei principali produttori e consumatori di carne di pollo. L'industria allevamento di polli è fondamentale per il settore agricolo e contribuisce in modo significativo all'economia rurale. Con la crescita di questo settore, ha migliorato le diete delle persone che vivono in città e villaggi, fornendo nutrienti importanti come le proteine. È diventata anche un attore importante nel mercato globale della carne, con una crescente domanda di pollo di qualità.

#Importanza dei Mioblasti

I mioblasti sono cellule speciali che formano le fibre muscolari. Provengono da cellule staminali e giocano un ruolo chiave nella riparazione dei muscoli dopo un infortunio. I ricercatori sono interessati a queste cellule perché possono diventare diversi tipi di cellule muscolari e aiutare con l'ingegneria dei tessuti. Per studiare i mioblasti, devono essere Isolati dai tessuti muscolari. I metodi tradizionali per separare i mioblasti, come l'uso di diverse tecniche di adesione, gradienti di densità e citometria a flusso, hanno le loro sfide, come essere dispendiosi in termini di tempo e costosi.

#Nuova Tecnologia: Microfluidica

La microfluidica è un nuovo modo per separare le cellule che sfrutta il comportamento dei fluidi in spazi ristretti. Questa tecnica è più veloce, utilizza meno campione ed è più facile da impostare rispetto ai metodi tradizionali. La microfluidica è stata utilizzata con successo per isolare e rilevare diversi tipi di cellule. Ci sono due approcci principali nella microfluidica: metodi attivi e passivi. I metodi attivi usano forze come luce o elettricità, mentre i metodi passivi utilizzano il design del chip per ordinare le cellule nel fluido. Tra le tecniche passive, un metodo popolare è la Dislocazione Laterale Deterministica (DLD), che è semplice ed efficace nella separazione di vari tipi di cellule.

#Come Funziona la DLD

La DLD utilizza un design speciale di colonne in un fluido per separare le particelle in base alla loro dimensione. Quando le cellule passano attraverso gli spazi tra queste colonne, le cellule più piccole seguono il percorso di flusso originale mentre quelle più grandi vengono spostate lateralmente. Questa separazione consente ai ricercatori di isolare tipi specifici di cellule come i mioblasti da una miscela.

Ad esempio, in un setup DLD, vengono testati due tipi di cellule: mioblasti che sono piccoli e cellule raggruppate che sono più grandi. A seconda delle loro dimensioni, queste cellule prenderanno percorsi diversi attraverso il chip. Questo metodo è efficace per isolare i mioblasti da altri tipi di cellule presenti nel tessuto muscolare.

#Sviluppo dei Mioblasti nei Polli

Negli polli Wenchang, lo sviluppo del tessuto muscolare è un processo cruciale che avviene durante le fasi embrionali. A partire dal giorno 7 fino al giorno 15, le cellule muscolari (mioblasti) crescono e si preparano a formare le fibre muscolari mature. Le ricerche mostrano che il momento migliore per isolare questi mioblasti è intorno al giorno 12, quando il loro numero è massimo e non hanno ancora iniziato a formare strutture più complesse.

#Metodi per Isolare i Mioblasti

Per isolare i mioblasti, i ricercatori iniziano preparando il tessuto muscolare di pollo. Dopo aver pulito e lavorato i campioni, usano sostanze chimiche specifiche per scomporre il tessuto e ottenere una sospensione cellulare. Questa miscela passa attraverso il chip DLD per la separazione.

Il design del chip gioca un ruolo importante in questo processo. I ricercatori hanno usato colonne triangolari, che si sono dimostrate più efficaci nella separazione delle cellule. Il chip può essere regolato per controllare il flusso e aiuta a massimizzare il recupero dei mioblasti mantenendoli vivi.

#Osservazione e Conteggio delle Cellule

Dopo il processo di separazione, i ricercatori raccolgono le cellule che fluiscono fuori dai vari uscite del chip. Osservano queste cellule al microscopio per controllare le loro dimensioni e contare quante ce ne sono di ciascun tipo. I ricercatori valutano anche la purezza dei mioblasti raccolti per assicurarsi che non siano mescolati con altre cellule indesiderate.

#Identificazione dei Mioblasti

Per confermare che le cellule siano effettivamente mioblasti, vengono utilizzati marcatori specifici. Dyes fluorescenti aiutano a evidenziare i mioblasti al microscopio. I mioblasti mostrano certi colori quando vengono colorati, rendendoli facili da identificare, mentre altri tipi di cellule, come i fibroblasti e i gruppi più grandi, non mostrano questi marcatori.

#Analisi dei Risultati

I risultati di questi processi di isolamento mostrano che il chip DLD raccoglie efficacemente un'alta percentuale di mioblasti. La maggior parte delle cellule provenienti dalla prima uscita del chip sono confermate come mioblasti, mentre le altre uscite contengono un mix di diversi tipi di cellule.

#Conclusione

Lo studio indica che la tecnologia microfluidica, in particolare il metodo DLD, può isolare con successo ed efficienza i mioblasti dal Muscolo di pollo. Questo approccio non solo migliora i tassi di recupero delle cellule, ma mantiene anche la vitalità delle cellule. Isolare i mioblasti è importante per ulteriori studi sulla crescita e riparazione dei muscoli, e con i progressi nella tecnologia microfluidica, i ricercatori possono continuare a migliorare la loro comprensione dello sviluppo muscolare negli animali da allevamento e in altri animali.