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# La biologia # Bioingegneria

Array di Microelettrodi 3D: Una Nuova Frontiera nella Neuroscienza

Rivoluzionare lo studio dei neuroni con la tecnologia 3D per avere più informazioni.

João Serra, José C. Mateus, Susana Cardoso, João Ventura, Paulo Aguiar, Diana C. Leitao

― 8 leggere min


Le matrici 3D trasformano Le matrici 3D trasformano la ricerca neuroscientifica. del cervello. comportamento dei neuroni e la funzione Metodi innovativi per studiare il
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Le Microelettrodi Array (MEA) sono strumenti speciali usati in scienza per misurare e studiare i segnali elettrici provenienti da gruppi di cellule nervose, conosciute anche come Neuroni. Pensali come minuscoli dispositivi di ascolto che possono catturare tutto il chiacchiericcio che avviene in un gruppo di neuroni, proprio come un bar affollato pieno di conversazioni. Questi dispositivi sono davvero bravi a monitorare come i neuroni comunicano tra di loro e possono anche inviare segnali di ritorno. Questa capacità rende le MEA preziose per la ricerca su disturbi cerebrali come il Parkinson e l'epilessia.

Cosa Sono le Microelettrodi Array?

Le MEA sono piccole piattaforme coperte di più Elettrodi. Questi elettrodi sono come microfoni ma progettati specificamente per captare i segnali elettrici prodotti dai neuroni. La parte emozionante? Le MEA possono registrare questi segnali da neuroni vivi mentre sono in una piastra, permettendo agli scienziati di osservare come si comportano queste cellule in tempo reale.

Tradizionalmente, queste MEA erano bidimensionali, il che è simile a leggere un libro piatto su un tavolo. Il problema? I neuroni nei veri cervelli interagiscono in tre dimensioni, quindi non è sempre facile capire il loro comportamento quando sono bloccati su una superficie piatta. Questa limitazione ha fatto grattare la testa ai ricercatori, che hanno cercato modi per creare MEA che potessero funzionare in tre dimensioni.

Il Passaggio alle MEA 3D

Sviluppi recenti hanno spostato l'attenzione dalle MEA 2D a quelle 3D. Proprio come costruire una torre di Lego invece di rimanere con pezzi piatti, questo nuovo approccio consente agli scienziati di studiare come si comportano i neuroni in uno spazio che imita più da vicino un cervello vivo. I ricercatori hanno ideato design fanciosi per creare MEA 3D usando tecniche ispirate all'origami. Sì, hai capito bene! Stanno usando tecniche di piegatura simili a quelle usate per fare le gru di carta.

Queste nuove MEA 3D possono essere realizzate utilizzando materiali speciali che possono cambiare forma quando vengono riscaldati. Questi cambiamenti fanno sì che gli elettrodi stiano in piedi invece di rimanere piatti, rendendo più facile raggiungere i neuroni da vari angoli. Questo design offre agli scienziati accesso a un livello completamente nuovo di dati su come i neuroni condividono informazioni e reagiscono a condizioni diverse.

Costruire la MEA

Il processo di costruzione delle MEA è un po' come fare una torta—se fare una torta implicasse strati di film molto sottili! La base della MEA è fatta di vetro, che fornisce una base solida. Sopra questo vetro, i ricercatori creano diversi strati, incluso uno strato sacrificial che alla fine viene rimosso, lasciando solo le parti che vogliono mantenere.

Gli elettrodi sono poi realizzati da una combinazione di metallo e polimeri speciali che possono piegarsi quando necessario. Questa piegatura è ciò che trasforma una MEA piatta in una versione 3D, permettendo migliori interazioni con i neuroni.

Per ottenere questo, gli scienziati usano alcune tecniche di calore. Controllando attentamente la temperatura e applicando stress a determinati strati, possono modellare gli elettrodi nelle posizioni 3D desiderate. Immagina un mago che tira fuori un coniglio da un cappello, tranne che il mago è uno scienziato e invece di un coniglio, sta tirando fuori un elettrodo 3D!

I Vantaggi dell'Usare MEA 3D

Il principale vantaggio del passaggio alle MEA 3D è la loro capacità di studiare i neuroni in un ambiente che somiglia di più al loro habitat naturale. Proprio come un pesce fuori dall'acqua fa fatica a respirare, anche i neuroni hanno difficoltà a comportarsi normalmente se confinati su una superficie piatta. Usando MEA 3D, i ricercatori possono osservare come i neuroni comunicano, come elaborano le informazioni e come rispondono a diversi farmaci o terapie in un modo che assomiglia molto di più a come farebbero in un cervello.

Inoltre, utilizzare materiali flessibili aiuta a far corrispondere le proprietà meccaniche delle MEA a quelle delle cellule viventi, rendendole più confortevoli e adatte per l'uso a lungo termine. Nessuno ama essere punto con un bastone, e nemmeno i neuroni, quindi essere gentili conta.

Come Testano gli Scienziati le MEA?

Una volta che le MEA sono fabricate, è essenziale testarle per assicurarsi che funzionino correttamente prima di inserire i neuroni nel mix. Gli ingegneri usano varie tecniche per misurare quanto bene gli elettrodi captano i segnali e quanto rumore c'è nelle registrazioni.

Immagina di cercare di ascoltare la tua canzone preferita alla radio, ma c'è tanta staticità—frustrante, giusto? Gli scienziati puntano a ridurre quella staticità per sentire la bellissima musica dell'attività neuronale invece. Misurano i livelli del segnale e si assicurano che tutto funzioni senza intoppi prima di introdurre i neuroni.

Coltivare Neuroni sulle MEA

Dopo aver testato, è il momento di portare in scena le stelle: i neuroni! Gli scienziati di solito coltivano questi neuroni in una sostanza gelatinoso per aiutarli a formare le connessioni necessarie. Mescolano con attenzione il gel con i neuroni, assicurandosi che si distribuiscano bene sulla MEA. Pensalo come fare un frullato di neuroni, dove la MEA è la tazza del frullatore.

I neuroni hanno bisogno di un po' di tempo per stabilirsi e crescere, quindi gli scienziati incubano le MEA. L'ambiente caldo è perfetto per i neuroni per prosperare, proprio come alcune piante hanno bisogno di temperature specifiche per fiorire. Man mano che i neuroni iniziano a stabilirsi, cominciano a comunicare tra di loro e con le MEA.

Registrare l'Attività Neuronale

Dopo aver dato un po' di tempo ai neuroni per sistemarsi, gli scienziati sono pronti a registrare la loro attività. Usando le MEA 3D, possono ascoltare i neuroni che sparano segnali elettrici. Qui avviene la magia, poiché i ricercatori possono osservare come i neuroni reagiscono a vari stimoli, come comunicano tra di loro e come si comportano in gruppo.

Durante queste registrazioni, gli scienziati notano spesso esplosioni di attività—come un improvviso aumento di energia in un'aula quando tutti si entusiasmano per un argomento! Ogni elettrodo può rilevare questi eventi, permettendo ai ricercatori di vedere come i segnali dei neuroni si muovono attraverso lo spazio 3D.

Impedenza e Livelli di Rumore

Per assicurarsi che le registrazioni siano chiare, l'impedenza degli elettrodi è attentamente monitorata. L'impedenza è come la resistenza al corrente elettrico. Se è troppo alta, la qualità delle registrazioni può risentirne. Gli scienziati puntano a specifici intervalli di impedenza per assicurarsi di catturare l'attività neuronale senza troppo rumore, proprio come accordare una chitarra prima di un concerto.

Mantengono anche d'occhio i livelli di rumore per assicurarsi di sentire bene i neuroni. Se c'è troppo rumore di fondo, è come cercare di sentire qualcuno che parla mentre c'è una costruzione in corso nelle vicinanze. L'obiettivo è mantenere il rumore basso in modo che i segnali registrati rappresentino il vero comportamento neuronale.

Sfide con le MEA 3D

Anche se le MEA 3D offrono opportunità entusiasmanti, presentano anche alcune sfide. Un ostacolo importante è assicurarsi che tutti gli elettrodi siano funzionanti. A volte, a causa di piccoli errori nel processo di fabbricazione, non tutti gli elettrodi funzionano come previsto. Gli scienziati cercano di migliorare le tecniche di fabbricazione, proprio come i cuochi perfezionano una ricetta per il biscotto perfetto.

Un'altra sfida è la stabilità a lungo termine delle MEA una volta introdotte nell'ambiente vivente. Dopo un po' di tempo, è importante controllare che gli elettrodi continuino a funzionare bene e rimangano privi di danni.

Futuro delle MEA 3D

Guardando avanti, le possibilità per le MEA 3D sono vastissime. I ricercatori possono esplorare nuovi sistemi elettroattivi, come cellule del cuore o tessuti muscolari, utilizzando questi dispositivi. La flessibilità e l'adattabilità delle MEA 3D aprono anche porte a future tecnologie, incluso l'integrazione in piattaforme microfluidiche, che possono migliorare gli studi complessivi.

Inoltre, mentre i ricercatori migliorano le tecniche di fabbricazione, potrebbero essere in grado di creare MEA con forme e design più personalizzati. In questo modo, gli elettrodi possono essere meglio adattati a specifiche applicazioni. Immagina di poter creare la tua custodia personalizzata per smartphone o gadget—questo è ciò su cui gli scienziati stanno lavorando per le loro MEA.

Conclusione

Le Microelettrodi Array stanno aprendo la strada a scoperte entusiasmanti nella neuroscienza. Passando da design 2D a intricati design 3D, i ricercatori ora possono osservare l'attività elettrica dei neuroni con maggiore precisione e rilevanza per scenari reali. Con l'avanzare della tecnologia, questi strumenti continueranno a svolgere un ruolo fondamentale nella comprensione della funzione cerebrale e nello sviluppo di trattamenti per i disturbi neurologici.

Quindi, la prossima volta che senti parlare di MEA, immagina piccoli dispositivi che non solo registrano segnali elettrici ma aiutano anche gli scienziati a svelare i segreti del cervello, un neurone alla volta—niente bacchetta magica richiesta!

Fonte originale

Titolo: Stress-actuated Flexible Microelectrode Arrays for Activity Recording in 3D Neuronal Cultures

Estratto: Microelectrode arrays (MEAs) are instrumental in monitoring electrogenic cell populations, such as neuronal cultures, allowing high precision measurements of electrical activity. Although three-dimensional neuronal cultures replicate the behavior of in vivo systems better than two-dimensional models, conventional planar MEAs are not well suited to capture activity within such networks. Novel MEA geometries can overcome this difficulty, but often at the cost of increased fabrication complexity. Here, we used the stress mismatch between thin film layers to fabricate MEAs with vertical electrodes, using methods compatible with established microfabrication protocols. A micrometric SiO2 hinge enables control over the bending angle of flexible polyimide structures with embedded electrodes. The performance of the patterned electrodes was assessed before and after stress actuation, through impedance measurements, voltage noise mapping, and neuronal activity recordings. 3D MEAs with 30x30 {micro}m2 electrodes showed an impedance of 0.96 {+/-} 0.07 M{Omega} per electrode and detected neuronal activity spikes with amplitudes as high as 400 {micro}V. These results demonstrate the potential of the developed methods to provide a scalable approach to fabricate 3D MEAs, enabling enhanced recording capabilities for in vitro neuronal cultures.

Autori: João Serra, José C. Mateus, Susana Cardoso, João Ventura, Paulo Aguiar, Diana C. Leitao

Ultimo aggiornamento: 2024-12-17 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.12.628189

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.12.628189.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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