MEAs en Graphène Transparent : Une Nouvelle Approche pour Étudier les Neurones
Des scientifiques utilisent des MEAs en graphène transparent pour étudier le fonctionnement des neurones dans la maladie de Niemann-Pick.
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Table des matières
- L'Importance de la Surveillance des Neurones
- Le Parcours des MEAs Transparents Utilisant le Graphène
- Étudier la Maladie de Niemann-Pick de Type C
- Résultats de l'Étude
- Techniques d'Imagerie Avancées
- Apprentissage Automatique pour l'Analyse des Données
- Conclusions et Perspectives Futures
- Source originale
- Liens de référence
Les scientifiques cherchent toujours de meilleures façons de comprendre comment fonctionne notre cerveau. Un domaine de recherche est la façon dont les neurones, ces cellules qui aident à transmettre les signaux dans le cerveau, communiquent entre eux. Les méthodes traditionnelles pour étudier le comportement des neurones peuvent être assez limitées. Récemment, de nouveaux outils appelés Réseaux de microélectrodes (MEAs) ont été développés pour aider les chercheurs à surveiller les neurones sur de plus longues périodes et à plus grande échelle. Les MEAs peuvent capturer des données sans avoir besoin de pénétrer dans la cellule, ce qui rend le processus moins intrusif.
Cependant, de nombreux MEAs existants ont un inconvénient : ils ne sont pas transparents. Ce manque de transparence rend difficile pour les scientifiques de les utiliser avec des techniques d'imagerie avancées, qui peuvent offrir une compréhension visuelle de la structure et de la fonction des neurones. Pour surmonter ce problème, les scientifiques ont développé des MEAs transparents, ce qui leur permet de combiner les enregistrements électriques de l'activité neuronale avec des observations visuelles à l'aide de microscopes. Pourtant, ces dispositifs transparents ont souvent du mal à maintenir des signaux électriques de haute qualité tout en étant transparents.
Le matériau de graphène a émergé comme une solution. Le graphène est une fine couche d'atomes de carbone agencés en une seule couche. Il est connu pour ses excellentes propriétés électriques et sa transparence, ce qui en fait un candidat idéal pour une utilisation dans des MEAs transparents. Le graphène permet aux scientifiques de surveiller à la fois les structures et les activités des neurones de manière efficace. Dans cet article, nous allons explorer les avantages des MEAs en graphène et comment ils peuvent être utilisés pour étudier des troubles cérébraux importants, notamment la maladie de Niemann-Pick de type C (NPC).
L'Importance de la Surveillance des Neurones
Les neurones communiquent par des signaux électriques appelés potentiels d'action. Quand un neurone envoie un signal, il peut échanger des informations avec de nombreux autres neurones dans le cerveau, permettant une réponse coordonnée. Cependant, lorsque les scientifiques surveillent les neurones, ils captent souvent des signaux de plusieurs neurones en même temps, ce qui rend difficile de localiser l'activité de cellules individuelles. Ce problème de signaux qui se chevauchent complique l'analyse des données recueillies à partir des MEAs.
Les efforts pour résoudre cela ont amené les chercheurs à explorer des méthodes d'Apprentissage automatique (ML) pour analyser les données neuronales, en particulier pour trier ces signaux qui se chevauchent. En utilisant des techniques ML, il est possible d'améliorer la précision de l'identification des neurones qui tirent et quand.
Le Parcours des MEAs Transparents Utilisant le Graphène
Pour créer des MEAs transparents, les chercheurs se sont tournés vers le graphène en raison de ses propriétés remarquables. Le graphène est non seulement très conducteur, mais il est aussi presque invisible sous la lumière. Cela permet aux scientifiques d'utiliser des techniques d'imagerie avancées tout en recueillant des données sur l'activité électrique.
La combinaison des MEAs transparents en graphène et des techniques d'imagerie permet aux scientifiques de visualiser le comportement et la structure des neurones en même temps. Par exemple, ils peuvent voir comment les neurones interagissent entre eux tout en suivant leur activité électrique. Cette double fonctionnalité est vitale pour étudier les fonctions et les maladies cérébrales complexes, facilitant l'observation de l'impact de certains médicaments ou conditions sur l'activité neuronale.
Étudier la Maladie de Niemann-Pick de Type C
La maladie de Niemann-Pick de type C (NPC) est un trouble génétique rare qui affecte la manière dont le cholestérol est traité dans le corps, entraînant une accumulation de cholestérol à l'intérieur des cellules. Cette accumulation peut perturber le fonctionnement normal des neurones et leur communication, entraînant finalement un déclin cognitif et d'autres symptômes.
Dans les études sur la NPC, les chercheurs se sont concentrés sur la façon dont ces problèmes liés au cholestérol impactent le comportement des neurones. En utilisant des MEAs transparents en graphène, les scientifiques peuvent surveiller comment la NPC affecte l'activité neuronale au fil du temps, leur permettant de voir comment la maladie progresse et impacte la structure cellulaire.
L'Approche Expérimentale
Dans le labo, les chercheurs ont cultivé des neurones hippocampiques primaires sur des MEAs en graphène. Ces neurones ont pu grandir et mûrir pendant quelques semaines avant de commencer la collecte de données. Pendant ce temps, les neurones ont été transduits avec un virus spécial qui les a fait briller sous une lumière spécifique, permettant l'imagerie du calcium. Les niveaux de calcium dans les neurones sont étroitement liés à leur activité, donc mesurer ces niveaux est essentiel pour comprendre comment les neurones communiquent.
Après avoir établi une ligne de base de comment les neurones se comportent dans des conditions normales, les chercheurs ont introduit une substance appelée U18666A pour simuler les symptômes de la NPC. En comparant le comportement des neurones avant et après le traitement, les scientifiques peuvent observer des changements significatifs dans l'activité neuronale et le comportement en réseau.
Résultats de l'Étude
En utilisant la combinaison de MEAs en graphène et de techniques d'imagerie, les scientifiques ont pu recueillir des données importantes sur comment la NPC affecte les neurones. Ils ont découvert que les neurones traités ont montré une baisse de l'activité électrique au fil du temps, suggérant que la maladie perturbe les processus de signalisation normaux. Fait intéressant, il y a eu une brève augmentation des signaux de calcium avant qu'ils ne chutent brutalement, indiquant que la NPC peut d'abord amener les neurones à se comporter de manière erratique avant de conduire à la dégénérescence.
Des changements correspondants dans la structure neuronale ont également été observés. À mesure que les neurones commençaient à perdre leur fonction, les chercheurs ont noté des changements dans la densité cellulaire et la santé, ce qui correspondait à des résultats précédents dans des modèles de NPC. Cette corrélation est cruciale pour comprendre comment la NPC progresse et les mécanismes cellulaires impliqués.
Techniques d'Imagerie Avancées
Pour obtenir des idées plus approfondies, les chercheurs ont utilisé une méthode d'imagerie haute résolution appelée Microscopie à illumination structurée (SIM). Cette technique a fourni une vue plus claire des structures neuronales individuelles et de leurs changements au fil du temps. Les capacités d'imagerie avancées du SIM ont permis aux scientifiques d'observer des détails fins que la microscopie traditionnelle pourrait manquer, comme la façon dont la forme des structures neuronales change en réponse à l'activité du calcium.
Lors de leurs observations, les chercheurs ont noté que les structures synaptiques, qui sont essentielles pour la communication entre neurones, montraient des altérations dynamiques. Les résultats ont révélé que les boutons synaptiques et d'autres composants pouvaient changer de taille et de forme pendant l'activité neuronale, fournissant des informations sur les processus sous-jacents qui affectent la fonction neuronale.
Apprentissage Automatique pour l'Analyse des Données
Étant donné la complexité des données collectées à partir des MEAs en graphène, les chercheurs ont utilisé l'apprentissage automatique pour améliorer le processus d'analyse. En introduisant de grands ensembles de données dans le système, les scientifiques ont pu améliorer l'identification de l'activité neuronale et renforcer leur compréhension de la façon dont ces neurones interagissent dans des réseaux fonctionnels.
Des techniques d'apprentissage automatique, telles que le clustering profond, ont été appliquées pour distinguer les signaux qui se chevauchent de plusieurs neurones. En identifiant efficacement des motifs de pics distincts, les chercheurs ont pu trier et catégoriser avec précision l'activité neuronale, fournissant une image plus claire de la façon dont les neurones interagissent les uns avec les autres.
Conclusions et Perspectives Futures
L'intégration des MEAs transparents en graphène avec des techniques d'imagerie avancées et de l'apprentissage automatique offre une plateforme puissante pour étudier les neurones et leur comportement. Cette combinaison permet aux chercheurs de surveiller simultanément l'activité et la structure neuronales, ouvrant de nouvelles voies pour comprendre la fonction cérébrale et les maladies.
À l'avenir, la recherche continue utilisant cette technologie innovante pourrait révéler d'autres informations non seulement sur la maladie de Niemann-Pick de type C, mais aussi sur d'autres maladies et troubles neurodégénératifs. Alors que les scientifiques affinent leurs approches et surmontent les défis techniques, tels que l'amélioration de la fabrication des MEAs, le potentiel de découvertes révolutionnaires en neurosciences reste significatif.
Comprendre comment des maladies comme la NPC impactent les neurones à la fois à des niveaux cellulaires et structurels est vital pour développer des traitements et des thérapies efficaces. Avec des MEAs transparents en graphène, les chercheurs ont une opportunité sans précédent d'explorer les complexités du comportement neuronal en santé et en maladie, faisant avancer notre compréhension du cerveau et améliorant les résultats pour les personnes affectées par des conditions neurodégénératives.
Titre: Graphene microelectrode arrays, 4D structured illumination microscopy, and a machine learning-based spike sorting algorithm permit the analysis of ultrastructural neuronal changes during neuronal signalling in a model of Niemann-Pick disease type C
Résumé: Simultaneously recording network activity and ultrastructural changes of the synapse is essential for advancing our understanding of the basis of neuronal functions. However, the rapid millisecond-scale fluctuations in neuronal activity and the subtle sub-diffraction resolution changes of synaptic morphology pose significant challenges to this endeavour. Here, we use graphene microelectrode arrays (G-MEAs) to address these challenges, as they are compatible with high spatial resolution imaging across various scales as well as high temporal resolution electrophysiological recordings. Furthermore, alongside G-MEAs, we deploy an easy-to-implement machine learning-based algorithm to efficiently process the large datasets collected from MEA recordings. We demonstrate that the combined use of G-MEAs, machine learning (ML)-based spike analysis, and four-dimensional (4D) structured illumination microscopy (SIM) enables the monitoring of the impact of disease progression on hippocampal neurons which have been treated with an intracellular cholesterol transport inhibitor mimicking Niemann-Pick disease type C (NPC) and show that synaptic boutons, compared to untreated controls, significantly increase in size, which leads to a loss in neuronal signalling capacity.
Auteurs: Gabriele S. Kaminski Schierle, M. Lu, E. Hui, M. Brockhoff, J. Trauble, A. Fernandez-Villegas, O. J. Burton, J. Lamb, E. Ward, P. J. Hooper, W. Tadbier, N. F. Laubli, S. Hofmann, C. F. Kaminski, A. Lombardo
Dernière mise à jour: 2024-02-24 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.22.581570
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.22.581570.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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