Comprendre le Complexe Central chez les Mouches à Fruits
Des recherches montrent les fonctions complexes du complexe central chez Drosophila melanogaster.
Gerald M. Rubin, T. Wolff, M. Eddison, N. Chen, A. Nern, P. Sundaramurthi, D. Sitaraman
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Table des matières
- Structure du Complexe Central
- Axes de la Recherche Récente
- Étude du Sommeil et de l'Activité
- Compréhension Actuelle du Connectome
- Nouvelles Lignées de Pilotes Génétiques
- Expression des Neurotransmetteurs dans les Types de Cellules
- Enquête sur les Neuropeptides dans le Cerveau Central
- Résultats sur les Modèles d'Expression des Neuropeptides
- Co-Expression des Neurotransmetteurs et Neuropeptides
- Dépistage des Types de Cellules Modifiant le Sommeil
- Résultats du Dépistage du Sommeil
- Connectivité Entre le Complexe Central et l'Horloge Circadienne
- Conclusion
- Méthodes Utilisées Dans Cette Recherche
- Génération de Lignes Split-GAL4
- Caractérisation des Lignes Split-GAL4
- Hybridation In Situ de l'ARN
- Mesure et Analyse du Sommeil
- Analyse Statistique
- Directions Futures
- Source originale
- Liens de référence
Le cerveau de la drosophile, Drosophila melanogaster, contient une zone importante appelée le complexe central (CX). Cette zone est composée d'environ 2 800 cellules organisées en 257 types différents selon leur structure et leurs connexions. Le CX est crucial pour gérer le flux d'informations entre ce que la mouche perçoit dans son environnement et sa réaction, surtout en matière d'orientation et de mouvement. Des études récentes ont bien progressé dans l'identification des différents types de cellules et circuits impliqués dans ces comportements. En plus de son rôle dans le traitement des informations sensorielles et le contrôle du mouvement, le CX joue aussi un rôle dans la régulation du sommeil et des niveaux d'activité. Cependant, il est probable que le CX ait encore d'autres fonctions qui restent inconnues.
Structure du Complexe Central
La structure du CX est complexe et se compose de plusieurs zones distinctes appelées neuropiles. Ces neuropiles sont essentiels pour le traitement de l'information. Les principaux composants incluent :
- Corps en forme de ventilateur (FB)
- Pont protocérébral (PB)
- Corps ellipsoïde (EB)
- Nodules (NO)
- Corps asymétrique (AB)
Ces zones travaillent ensemble pour accomplir les différentes fonctions du CX.
Axes de la Recherche Récente
Les chercheurs s'efforcent de comprendre la composition génétique des différents types de cellules présents dans le CX. Ils ont développé des outils spécifiques, appelés lignées de pilotes génétiques, pour mieux étudier ces types de cellules. Ces outils permettent aux scientifiques d'examiner comment certains gènes s'expriment dans les cerveaux des drosophiles adultes. L'objectif est de rassembler des infos sur comment les Neurotransmetteurs et les Neuropeptides sont utilisés dans plus de 80 types de cellules différents au sein du CX. Beaucoup de neurones dans le CX fabriquent et utilisent des neuropeptides, certains produisent même plusieurs neuropeptides avec un neurotransmetteur à action rapide.
Étude du Sommeil et de l'Activité
Le complexe central n'est pas seulement important pour l'orientation et le mouvement ; il semble aussi jouer un rôle dans la régulation du sommeil et des niveaux d'activité. Les chercheurs ont analysé comment l'activation de certains types de cellules dans le CX affecte le sommeil et l'activité. Ils ont utilisé des outils spécifiques pour découvrir de nouveaux types de cellules qui pourraient influencer ces comportements, ce qui indique un système de communication plus complexe entre l’horloge circadienne et le CX.
Connectome
Compréhension Actuelle duUn connectome est un diagramme détaillé montrant comment les différentes cellules se connectent dans le cerveau. Le connectome du CX a fourni aux chercheurs des informations vitales pour les aider à comprendre le fonctionnement du CX. Bien que le connectome montre de nombreuses connexions, la plupart des fonctions spécifiques des types de cellules dans le CX ne sont pas encore claires. L'un des moyens d'apprendre sur leurs fonctions est de mesurer et contrôler l'activité de types de cellules individuels. Les chercheurs pensent que des outils génétiques spécifiques aux types de cellules faciliteront énormément ces expériences.
Nouvelles Lignées de Pilotes Génétiques
Pour mieux étudier le CX, les chercheurs ont créé de nouvelles lignées de pilotes génétiques spécifiquement pour différents types de cellules dans le CX. Ils ont utilisé une méthode qui avait déjà été utilisée dans d'autres parties du cerveau de la drosophile, comme le corps champignon et le système visuel. En générant ce nouvel ensemble de lignées de pilotes, ils ont augmenté leur capacité à examiner presque un tiers des types de cellules dans le CX définis par des études de connectome précédentes. Ces nouvelles lignées offrent un moyen plus fiable d'étudier la fonction de ces types de cellules.
Expression des Neurotransmetteurs dans les Types de Cellules
Pour savoir quels types de neurotransmetteurs les types de cellules dans le CX utilisent, les chercheurs ont appliqué une méthode appelée EASI-FISH. Cette méthode permet aux scientifiques d'examiner des gènes spécifiques responsables de la création de neurotransmetteurs dans le cerveau. Ils ont étudié plus de 100 types de cellules différents pour mieux comprendre quels neurotransmetteurs sont présents et actifs. Par exemple, des chimies pour produire de l'acétylcholine, du GABA, du glutamate, de la dopamine, de la sérotonine, et d'autres ont été analysées. Ces informations sont cruciales pour comprendre comment les cellules communiquent au sein du CX.
Enquête sur les Neuropeptides dans le Cerveau Central
Les neuropeptides sont une autre partie essentielle de la communication cérébrale ; ils peuvent envoyer des signaux sur de plus grandes distances par rapport aux neurotransmetteurs traditionnels. Les chercheurs ont utilisé une liste sélectionnée de neuropeptides pour évaluer leur expression dans le CX. En examinant des gènes de récepteurs de neuropeptides spécifiques, les chercheurs visaient à étudier comment ces neuropeptides pourraient influencer le comportement et la fonction cérébrale de la mouche.
Résultats sur les Modèles d'Expression des Neuropeptides
Dans leur examen, les chercheurs ont découvert que les neuropeptides se répartissent en deux catégories. Certains neuropeptides sont présents dans moins de cellules, mais plus grandes, tandis que d'autres sont exprimés dans des dizaines à des centaines de cellules. Cette large distribution suggère que les neuropeptides permettent une communication locale dans plusieurs voies au sein du cerveau. De plus, les récepteurs de neuropeptides semblent avoir des modèles d'expression plus larges que les neuropeptides eux-mêmes.
Co-Expression des Neurotransmetteurs et Neuropeptides
Un résultat intéressant est que tous les types de cellules qui expriment un neuropeptide expriment aussi un petit neurotransmetteur. Ce résultat suggère que la communication au sein du CX implique souvent les deux types de molécules de signalisation. Les petits neurotransmetteurs courants identifiés incluent l'acétylcholine et le glutamate, avec quelques cas impliquant le GABA, la dopamine et la sérotonine. Bien qu'il soit rare que deux neurotransmetteurs à action rapide coexistent dans le même type de cellule, il est plus fréquent que des neurotransmetteurs à action rapide et modulatoires coexistent.
Dépistage des Types de Cellules Modifiant le Sommeil
Le sommeil est un comportement complexe qui a été étudié chez les drosophiles. Le CX a été identifié comme une zone essentielle pour la régulation du sommeil, mais beaucoup de ses types de cellules n'ont pas été explorés à cette fin. En employant les lignées de pilotes génétiques, les chercheurs ont pu dépister les types de cellules dont l'activation influençait significativement le sommeil et l'activité des mouches.
Résultats du Dépistage du Sommeil
Pendant le dépistage, les chercheurs ont identifié plusieurs types de cellules spécifiques qui n'avaient pas été reconnus auparavant pour leurs rôles dans la modification du sommeil. Par exemple, un type de cellule, hDeltaF, a été trouvé pour promouvoir l'éveil. D'autres types de cellules identifiés ont également montré un potentiel d'influence sur le comportement de sommeil lorsqu'ils étaient activés.
Connectivité Entre le Complexe Central et l'Horloge Circadienne
Le connectome révèle que de nombreux types de cellules intrinsèques du CX liés au sommeil sont connectés par des voies câblées. Certaines voies de l'horloge circadienne vers le CX ont été notées dans des études précédentes. Cependant, les résultats montrent que certains types de cellules, comme SMP368 et SMP531, pourraient être des parties intégrales de nouvelles voies qui relient l'horloge circadienne au CX.
Conclusion
La recherche a amélioré les outils génétiques disponibles pour étudier les types de cellules dans le CX, ce qui aidera à découvrir les nombreuses fonctions de cette zone cérébrale complexe. Le travail en cours se concentre sur la compréhension de la façon dont ces fonctions peuvent être liées à la régulation du sommeil et de l'activité. En examinant l'expression des neuropeptides et des neurotransmetteurs, les chercheurs peuvent obtenir un aperçu de la communication au sein du CX, ouvrant la voie à de futures découvertes sur les réseaux complexes du cerveau.
Méthodes Utilisées Dans Cette Recherche
Génération de Lignes Split-GAL4
Pour créer les lignes split-GAL4, les chercheurs ont filtré un grand nombre de fragments génomiques pour trouver ceux qui montraient une expression dans les types de cellules souhaités. Ces lignées ont ensuite été testées et évaluées par imagerie confocale pour confirmer la spécificité du type cellulaire.
Caractérisation des Lignes Split-GAL4
Les lignes ont été caractérisées en imagerie de l'ensemble du motif d'expression dans le cerveau et le cordon nerveux ventral. Des images à plus fort grossissement et un marquage stochastique ont également été utilisés pour visualiser des cellules individuelles.
Hybridation In Situ de l'ARN
Pour analyser l'expression des gènes dans les cellules, les chercheurs ont utilisé EASI-FISH. Ils ont visualisé les motifs d'expression de différents neuropeptides et récepteurs dans le cerveau adulte.
Mesure et Analyse du Sommeil
Pour les études sur le sommeil, les mouches split-GAL4 ont été croisées avec d'autres lignées génétiques et maintenues dans des conditions contrôlées. Les chercheurs ont mesuré divers paramètres de sommeil à l'aide de systèmes spécialisés pour collecter des données sur l'activité des mouches.
Analyse Statistique
Les données des expériences sur le sommeil ont été analysées statistiquement pour déterminer les effets de l'activation de différents types de cellules sur le sommeil et l'activité. Les comparaisons ont été effectuées en utilisant des méthodes statistiques établies pour en tirer des conclusions.
Directions Futures
Cette recherche pose les bases de futures investigations sur le rôle du CX dans divers comportements. Les futures études s'appuieront probablement sur les outils génétiques et les découvertes établis pour analyser en profondeur les connexions entre le CX et d'autres régions du cerveau, notamment en ce qui concerne le sommeil, les niveaux d'activité et des réponses comportementales plus complexes. Alors que les chercheurs continuent d'améliorer leur compréhension de ces réseaux complexes, on s'attend à ce que de nouvelles perspectives émergent sur le fonctionnement du cerveau aussi bien chez les drosophiles que chez d'autres organismes.
Titre: Cell type-specific driver lines targeting the Drosophila central complex and their use to investigate neuropeptide expression and sleep regulation
Résumé: The central complex (CX) plays a key role in many higher-order functions of the insect brain including navigation and activity regulation. Genetic tools for manipulating individual cell types, and knowledge of what neurotransmitters and neuromodulators they express, will be required to gain mechanistic understanding of how these functions are implemented. We generated and characterized split-GAL4 driver lines that express in individual or small subsets of about half of CX cell types. We surveyed neuropeptide and neuropeptide receptor expression in the central brain using fluorescent in situ hybridization. About half of the neuropeptides we examined were expressed in only a few cells, while the rest were expressed in dozens to hundreds of cells. Neuropeptide receptors were expressed more broadly and at lower levels. Using our GAL4 drivers to mark individual cell types, we found that 51 of the 85 CX cell types we examined expressed at least one neuropeptide and 21 expressed multiple neuropeptides. Surprisingly, all co-expressed a small neurotransmitter. Finally, we used our driver lines to identify CX cell types whose activation affects sleep, and identified other central brain cell types that link the circadian clock to the CX. The well-characterized genetic tools and information on neuropeptide and neurotransmitter expression we provide should enhance studies of the CX.
Auteurs: Gerald M. Rubin, T. Wolff, M. Eddison, N. Chen, A. Nern, P. Sundaramurthi, D. Sitaraman
Dernière mise à jour: 2024-10-22 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.21.619448
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.21.619448.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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