Avanços na Pesquisa de Órgãos Quiméricos de Humano e Porco
Pesquisas sobre órgãos quiméricos trazem esperança para a falta de transplantes de órgãos.
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Índice
Nos últimos anos, os cientistas têm pesquisado órgãos de porcos como possíveis substitutos para órgãos humanos danificados. Alguns estudos testaram rins de porcos em pessoas, mas ainda há problemas com a reação do corpo humano a esses órgãos. Ao mesmo tempo, os pesquisadores têm tentado criar novos órgãos usando Células-tronco humanas, mas ainda não descobriram totalmente como fazer esses órgãos funcionarem como deveriam.
Outro método que ganhou interesse é chamado de organogênese quimérica. Isso envolve injetar células humanas em embriões de porcos que são projetados para não desenvolver certos órgãos. Porém, existem muitas questões éticas sobre esse método, especialmente em relação a quão bem as células humanas podem se integrar aos órgãos de porco.
A ideia de criar órgãos Quiméricos misturando células humanas com células de porco tem sido vista como uma forma promissora de atender à necessidade de substitutos de órgãos. Pesquisas anteriores conseguiram criar rins quiméricos em outros animais usando diferentes técnicas. Além disso, estudos mostraram que usar rins de porcos em testes com macacos resultou em menos casos de rejeição em comparação com órgãos de adultos.
Desafios na Produção de Órgãos
Apesar dos avanços, existem obstáculos significativos para fazer esses órgãos funcionarem de forma eficaz. Estudos indicam que a sobrevivência e a integração de células humanas em rins quiméricos são limitadas. Também há diferenças na velocidade com que os órgãos se desenvolvem em porcos em comparação com outros animais, o que sugere que misturar células humanas e animais não é simples. Além disso, pesquisas anteriores se concentraram principalmente em animais menores, como camundongos, e não se sabe se técnicas semelhantes podem ser aplicadas a animais maiores, como porcos.
Os porcos têm muitas vantagens quando se trata de transplantes de órgãos. O tamanho e a função dos órgãos deles são similares aos humanos, eles crescem rápido e é relativamente fácil obter os órgãos deles. Essas qualidades os tornam fortes candidatos para a criação de órgãos quiméricos, especialmente Organoides de rins quiméricos usando células humanas. No entanto, não há relatos de métodos bem-sucedidos para criar tais organoides a partir de rins de porcos.
Otimizando Condições de Cultura
Para criar um sistema de cultura para órgãos quiméricos humano-porcos, os pesquisadores começaram modificando sistemas existentes que funcionavam para órgãos humano-camundongo. O objetivo era melhorar a sobrevivência das células e as condições de desenvolvimento dos órgãos. Depois de otimizar esses métodos para células de porco, eles conseguiram criar organoides quiméricos feitos de células de rins humanas e de porcos.
O processo de formação de organoides renais a partir de células de porcos e camundongos indica claramente que o meio usado durante a reagregação e maturação das células desempenha um papel vital no desenvolvimento dos organoides. Diferentes combinações desses meios produziram resultados variados em termos de forma e tamanho dos organoides.
Avaliação dos Organoides Quiméricos
Os pesquisadores avaliaram como os organoides que criaram estavam se desenvolvendo usando marcadores específicos para identificar estruturas-chave dentro dos organoides. Essa avaliação mostrou que todas as condições testadas levaram à formação de estruturas quiméricas que incluíam tanto células humanas quanto animais. Porém, algumas condições resultaram em uma melhor mistura de células humanas e de porco, enquanto outras favoreceram estruturas de células de porco.
Uma descoberta importante foi que usar um meio específico para reagregação levou a uma maior proporção de células humanas nos organoides. Isso sugere que as condições em torno das células desempenham um papel significativo na sua sobrevivência e desenvolvimento.
Criando Organoides de Rins de Porco Fetal
Além de criar organoides quiméricos, os pesquisadores examinaram quão bem podiam criar organoides a partir de rins de porco fetal. Eles descobriram que esses rins de porco estavam em um estágio mais avançado de desenvolvimento do que os rins de camundongos. A equipe realizou procedimentos semelhantes aos anteriores para criar organoides a partir de rins de porcos, testando vários meios para ver quais produziam os melhores resultados.
A análise revelou que todos os métodos levaram à criação de organoides com estruturas renais, embora os tamanhos e proporções de tipos específicos de células variem. No geral, eles notaram que as condições que funcionaram bem para organoides de rins de camundongos também funcionaram de forma eficaz para rins de porcos, resultando em resultados promissores.
Formação de Organoides Quiméricos Humano-Porcos
Baseando-se no conhecimento adquirido, os pesquisadores prosseguiram para cultivar organoides renais quiméricos humano-porcos. Eles ajustaram as proporções de células humanas e de porco na mistura para ver como isso afetava a formação de estruturas quiméricas. As células humanas que usaram eram derivadas de células-tronco engenheiradas que são capazes de se desenvolver em células renais.
A criação desses organoides quiméricos mostrou que eles eram realmente capazes de desenvolver estruturas renais distintas, incluindo algumas que continham componentes tanto de células humanas quanto de porcos. Embora o número de glomérulos (as unidades de filtragem dos rins) fosse limitado, havia algumas estruturas quiméricas indicando integração bem-sucedida de células humanas dentro dos componentes renais do porco.
Injetando Células Humanas em Rins de Porco
Em uma abordagem diferente, os pesquisadores investigaram a injeção de células renais humanas nos rins de camundongos fetais. Isso foi feito para ver se poderiam criar estruturas quiméricas fornecendo as condições adequadas de suporte para as células humanas prosperarem. Os resultados iniciais indicaram que as células humanas injetadas conseguiram sobreviver e formar estruturas organizadas dentro do Rim do camundongo.
A sobrevivência dessas células foi encorajadora, pois elas conseguiram formar uma estrutura tridimensional, sugerindo que mais pesquisas poderiam levar a uma melhor integração de células humanas em órgãos. Imagens de alta resolução confirmaram que as células humanas estavam até conectando-se às estruturas renais nos camundongos, mostrando potencial para Desenvolvimentos futuros.
Conclusão
Este estudo estabelece uma base sólida para o desenvolvimento de rins quiméricos humano-porcos. Ao otimizar as condições de cultura, os pesquisadores criaram um sistema que poderia melhorar as chances de sucesso no desenvolvimento de órgãos no futuro. Ainda há muito a aprender, especialmente sobre como garantir que as células humanas se integrem completamente aos órgãos de porco e como lidar com as considerações éticas em torno desse tipo de pesquisa. No entanto, os achados apoiam a ideia de que a exploração adicional desses métodos poderia ajudar a enfrentar a crise contínua de escassez de órgãos para pacientes em transplante.
Título: Generation of human-pig chimeric renal organoids using iPSC technology
Resumo: The potential of using porcine organs and human induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived organoids as alternative organs for human transplantation has garnered growing attention. However, both approaches still face technological challenges. Interspecies chimeric organ production using human iPSCs is expected to be another promising approach that addresses the challenges associated with organ production. Our research group successfully generated human-mouse chimeric renal organoids by utilizing human iPSC-derived nephron progenitor cells (NPCs) and fetal mouse kidneys. However, the current technology has limited engraftment and development capabilities for human NPCs, and there have been no reports of generating interspecies chimeric renal organoids in larger animals, limited only to rodents. Therefore, in this study, we embarked on the production of human-pig chimeric renal organoids using the pig kidney, which is considered the most promising source of organs for interspecies transplantation to humans. To construct a human-pig chimeric renal organoid culture system, we first modified the existing human-mouse chimeric renal organoid culture system and developed a method that enables the survival and continued renal development of both species. This method was found to be applicable to porcine fetal kidney cells, and ultimately, we successfully produced human-pig chimeric renal organoids. Furthermore, this culture method can also be applied to the generation of human interspecies chimeric kidneys for future clinical applications. The findings of this study serve as a foundational technology that will greatly accelerate future research in humanized pig kidney production for clinical purposes, and are also expected to be used as an evaluation technique to ensure the quality of human NPCs for xenotransplantation.
Autores: Takashi Yokoo, K. Fujimori, S. Yamanaka, K. Shimada, K. Matsui, S. Kawagoe, T. Kuroda, A. Ikeda, M. Inoue, E. Kobayashi
Última atualização: 2024-03-20 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.19.584036
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.19.584036.full.pdf
Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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