Repensando a Cultura Celular para Produção Sustentável de Carne
Hidrolisados de proteína podem reduzir o uso de soro na carne cultivada.
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Até 2050, espera-se que nosso mundo tenha 10 bilhões de pessoas. Esse Crescimento vai trazer um grande desafio: como garantir comida suficiente para todo mundo. Especialistas dizem que vamos precisar produzir 70% mais carne pra atender essa demanda. Dentre os diferentes tipos de carne, o peixe é importante porque representa cerca de 20% da proteína animal que consumimos globalmente.
Uma solução pra esse desafio é a carne cultivada. Esse método envolve crescer células animais em um ambiente especial que ajuda no desenvolvimento delas. Ele oferece vantagens em relação à produção de carne tradicional, como reduzir a pressão sobre as populações de peixes selvagens, ser mais gentil com os animais e diminuir os riscos à saúde associados ao processamento de carne. A carne cultivada é uma maneira Sustentável e ética de atender à necessidade mundial de proteína, enquanto resolve problemas encontrados na produção padrão de frutos do mar.
O Papel do Meio de Cultura
O meio de cultura é essencial na produção de carne cultivada. Esse meio suporta o crescimento e a proliferação das células, mas o custo desses meios pode ser muito alto, muitas vezes representando mais de 99% do custo total de produção da carne cultivada. Pra tornar esse processo mais acessível, os pesquisadores estão buscando formas de desenvolver alternativas mais baratas pro meio de cultura atualmente em uso.
O Soro fetal bovino (FBS) tem sido a escolha tradicional na cultura celular porque contém nutrientes importantes que as células precisam pra crescer. No entanto, o FBS é caro e levanta preocupações éticas, além de riscos de espalhar doenças. Isso levou os pesquisadores a buscar opções mais sustentáveis e econômicas.
Alternativas ao Soro Fetal Bovino
Os hidrolisados de proteína são uma dessas alternativas. Eles são derivados do quebra de proteínas e podem ser usados pra fornecer nutrientes essenciais e fatores de crescimento pras células durante o processo de crescimento. Pesquisadores já usaram hidrolisados de proteína de várias fontes, incluindo plantas e animais, pra ajudar as células a crescer. Peptídeos, que são pedaços pequenos de proteínas, também podem desempenhar um papel na sinalização dentro das células e podem ser adicionados ao meio de cultura.
Peptídeos de soja e outras fontes têm sido usados pra ajudar o crescimento de diferentes tipos de células em laboratório. Eles fornecem aminoácidos, que são os blocos de construção das proteínas que as células precisam. Meios livres de soro também podem ser melhorados com peptídeos pra ajudar as células a crescerem melhor e serem mais sustentáveis.
Enquanto estudos mostram que os hidrolisados de proteína podem melhorar o crescimento celular, usar altas concentrações pode ter efeitos negativos e até causar morte celular. Além disso, o impacto ambiental do uso de hidrolisados de proteína ainda não foi totalmente explorado. Então, essa pesquisa visa analisar como diferentes concentrações de soro e hidrolisados de proteína afetam células de peixe em termos de crescimento, aparência, viabilidade e desempenho. Também vai considerar as emissões de gases de efeito estufa em diferentes condições.
Materiais e Métodos
Materiais e Produtos Químicos
Pra esse estudo, várias fontes de proteína foram utilizadas, incluindo algas e proteína de ervilha. Cogumelos brancos frescos também foram obtidos de um mercado local. Vários outros materiais necessários, como hidrolisado de levedura, soro e certos componentes do meio de crescimento, foram adquiridos de fornecedores respeitáveis. Além disso, células-tronco embrionárias de zebrafish foram obtidas de uma coleção de culturas.
Produção de Hidrolisado de Proteína
O processo de criação de hidrolisados de proteína começou com a mistura de matérias-primas com água e, em seguida, aplicando uma enzima pra quebrar as proteínas. A mistura foi aquecida, e depois o produto resultante foi coletado e liofilizado pra uso futuro.
Análise de Aminoácidos e Conteúdo de Proteína
A composição de aminoácidos e o conteúdo de proteína de todas as amostras foram avaliados. Essa avaliação seguiu métodos padrão estabelecidos por químicos agrícolas pra garantir resultados precisos. Isso incluiu determinar quão bem a proteína poderia ser digerida e sua qualidade geral com base em um sistema de pontuação que considera os aminoácidos essenciais presentes.
Avaliando Propriedades Funcionais
Várias propriedades dos hidrolisados de proteína, como capacidade de retenção de óleo e capacidade emulsificante, foram analisadas. Essas propriedades funcionais são importantes porque podem afetar quão bem os hidrolisados atuam na cultura celular.
Cultura e Manutenção de Células
Pra a primeira rodada de culturas celulares, foi usada uma mistura de diferentes tipos de meios que incluíam soro. As células tiveram tempo pra se aderir aos frascos de cultura antes de serem gradualmente expostas a concentrações mais baixas de soro. Assim que as células atingiram um certo nível de crescimento, foram tratadas pra desagregar do frasco e contadas.
Experimentos com Meios de Soro Reduzido
Os experimentos se concentraram em testar como diferentes concentrações de soro e hidrolisados de proteína afetaram o crescimento e a viabilidade celular. Mudando os níveis de soro nos meios e adicionando várias concentrações de hidrolisados de proteína, os pesquisadores puderam ver como as células prosperaram.
Imagem e Teste da Saúde Celular
Usando um corante fluorescente, os pesquisadores puderam observar e fotografar as células pra avaliar sua saúde e forma. Além disso, a atividade de certas enzimas celulares foi medida pra dar uma ideia do bem-estar geral das células.
Avaliação do Impacto Ambiental
Dados sobre emissões de gases de efeito estufa foram coletados para as várias fontes de proteína, incluindo FBS. Essa análise teve como objetivo comparar os efeitos ambientais do uso de soro tradicional versus hidrolisados de proteína.
Análise de Dados
Os dados foram conferidos quanto à precisão e normalidade. Vários métodos estatísticos foram empregados pra interpretar os resultados, garantindo que comparações válidas pudessem ser feitas entre diferentes condições.
Resultados e Discussão
Propriedades dos Hidrolisados de Proteína
O rendimento dos hidrolisados de proteína é essencial pra produção em maior escala. O estudo indicou que apenas pequenas quantidades de hidrolisados são necessárias pra um crescimento celular eficaz, posicionando-os como opções viáveis pra produção sustentável de carne cultivada.
Perfil de Aminoácidos e Qualidade da Proteína
Todos os hidrolisados de proteína incluíram altos níveis de aminoácidos específicos que aumentam o crescimento celular. Dentre os vários hidrolisados, alguns apresentaram qualidade superior, o que é importante pra sua eficácia na cultura celular.
Propriedades Funcionais dos Hidrolisados
A habilidade dos hidrolisados de proteína de reter óleo e emulsificar é crucial pra seu uso na cultura celular. O estudo descobriu que diferentes fontes se saíram de maneiras variadas nessas áreas, indicando benefícios e desvantagens potenciais de cada fonte.
Efeitos da Concentração de Soro no Crescimento Celular
Experimentos iniciais demonstraram que ter uma concentração mais alta de soro é melhor pro crescimento celular. No entanto, à medida que o soro foi diminuindo, o número de células caiu significativamente, mostrando uma ligação direta entre os níveis de soro e a saúde celular.
Papel dos Hidrolisados de Proteína na Cultura Celular
Quando os hidrolisados de proteína foram adicionados em certas concentrações, mostraram melhorias no crescimento e viabilidade celular. Menores quantidades desses suplementos se mostraram benéficas quando os níveis de soro foram reduzidos, destacando seu potencial pra substituir componentes tradicionais na cultura celular.
A Importância da Concentração de Hidrolisados
Foi determinado que usar altas concentrações de hidrolisados de proteína poderia impactar negativamente o crescimento e a saúde celular. Por outro lado, concentrações menores geraram melhores resultados, apoiando seu uso na redução da dependência de soro.
Observações a partir de Imagens Fluorescentes
Imagens microscópicas revelaram que as células mantinham uma melhor estrutura e aparência quando suplementadas com hidrolisados de proteína, mesmo em níveis mais baixos de soro. Isso pode sugerir um caminho promissor pra criar meios mais eficientes pra produção de carne cultivada.
Medindo a Atividade da Lactato Desidrogenase
A atividade da lactato desidrogenase indicou os níveis de estresse celular. Uma atividade mais alta foi notada em condições sem soro, sugerindo que a falta de nutrientes levou a danos celulares. Essa métrica enfatizou ainda mais o papel nutricional que o soro e os hidrolisados de proteína desempenham na viabilidade celular.
Avaliando as Emissões de Gases de Efeito Estufa
Calcular as emissões de gases de efeito estufa associadas a cada tipo de proteína ajudou a destacar o impacto ambiental de várias opções. Embora os hidrolisados de proteína tenham mostrado emissões mais altas em comparação com o FBS, suas concentrações mais baixas no uso de meios diminuíram significativamente as emissões totais.
Conclusão
Resumindo, essa pesquisa destaca o potencial dos hidrolisados de proteína pra substituir o soro tradicional na cultura celular, oferecendo uma abordagem mais sustentável pra produção de carne cultivada. Ao reduzir efetivamente a necessidade de soro enquanto mantém, ou até melhora, o crescimento e a saúde celular, os hidrolisados de proteína se mostram como uma alternativa promissora na cultivo de carne.
Explorações contínuas sobre as fontes e formulações mais eficazes dos hidrolisados de proteína podem ainda melhorar sua aplicação nessa indústria em crescimento. À medida que a conscientização sobre os impactos ambientais continua a aumentar, desenvolver métodos sustentáveis de produção de alimentos se torna um foco crítico, e os hidrolisados de proteína podem desempenhar um papel significativo na formação desse futuro.
Título: Evaluation of Plant- and Microbial-Derived Protein Hydrolysates as Substitutes for Fetal Bovine Serum in Cultivated Seafood Cell Culture Media
Resumo: This study seeks to explore alternatives by substituting or reducing the conventional 10% serum concentration in Zebrafish embryonic stem cell (ESC) growth media with protein hydrolysates sourced from peas, mushrooms, yeast, and algae. Notably, algae exhibited the highest protein content, optimal amino acid balance, and favorable functional properties. When applied at concentrations ranging from 1 to 10 mg/mL, all protein hydrolysates demonstrated pro-apoptotic effects and inhibited cell growth, particularly when used in conjunction with 10% serum. However, concentrations ranging from 0.001 to 0.1 mg/mL displayed anti-apoptotic properties and promoted cell proliferation. The study found that media containing 1% or 2.5% serum, along with 0.01 mg/mL of protein hydrolysates, supported cell growth effectively. Lactate Dehydrogenase (LDH) Activity served as an indicator of cell health and integrity under the specified conditions of protein hydrolysate supplementation. Cells cultured in serum-free media exhibited significantly decreased cell membrane integrity (P < 0.05) compared to those in regular media or media containing low serum (1% and 2.5%) along with low concentrations (0.01 mg/mL) of protein hydrolysates. Furthermore, analysis of Greenhouse Gas emissions (GHG) suggested that media formulations containing 1% serum combined with low concentrations of protein hydrolysates present a sustainable approach for cell-based seafood production.
Autores: Reza Ovissipour, A. Amirvaresi
Última atualização: 2024-03-30 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.27.587063
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.27.587063.full.pdf
Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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