Repix: Uma Nova Abordagem para Registros Neurais Crônicos
A Repix simplifica gravações neurais crônicas com as sondas Neuropixels pra melhorar a pesquisa.
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Medir a atividade neural é super importante na neurociência. Com o tempo, os métodos melhoraram pra captar pequenas variações de voltagem em animais vivos. Uma dessas inovações recentes são as Sondas Neuropixels, que deixam os cientistas medirem vários neurônios ao mesmo tempo em diferentes animais, como camundongos, ratos, primatas, humanos e até polvos. Isso ajudou os pesquisadores a entenderem melhor como o cérebro dos mamíferos funciona.
A implantação crônica dessas sondas, ao contrário das gravações agudas que duram pouco tempo, tem várias vantagens. Permite que os animais se movam livremente e apresentem uma variedade de comportamentos, tipo procurar comida, tomar decisões, socializar e fugir de ameaças. Essas gravações de longo prazo ajudam os pesquisadores a monitorar como neurônios individuais se comportam enquanto os animais aprendem ou mudam seu comportamento.
Porém, implantar cronicamente não é fácil. As sondas precisam ser estáveis, mas também removíveis pra reutilização. Nos primeiros testes, usaram cimento pra fixar as sondas, o que complicava a reutilização depois. Pra resolver isso, novos sistemas foram desenvolvidos pra possibilitar a fixação e remoção das sondas de forma fácil. Esses sistemas mostraram potencial, mas os pesquisadores ainda buscavam maneiras de facilitar o processo pra quem quisesse usar a tecnologia no futuro.
Desenvolvimento do Repix
Pra lidar com alguns desafios da implantação crônica, um novo sistema chamado Repix foi desenvolvido. É um sistema de implante simples pra sondas Neuropixels que pode ser usado em várias situações, incluindo interações sociais. O Repix tem três componentes principais: uma cassete, postes e uma tampa. O uso de alumínio na construção do Repix garante resistência e durabilidade pro uso a longo prazo, mantendo o sistema leve.
O principal objetivo do Repix é facilitar a adoção de métodos de gravação crônica pelos pesquisadores, com estabilidade por períodos prolongados, às vezes até um ano. O Repix é compatível com todos os tipos de sonda Neuropixels e pode ser usado tanto em camundongos quanto em ratos. O design foi testado em diversos laboratórios, levando a melhorias contínuas com base no feedback dos usuários.
Princípios de Design do Repix
Pra tornar o Repix fácil de usar, vários fatores foram considerados:
Confiabilidade e Repetibilidade
O Repix foi projetado pra garantir uma implantação consistente e confiável das sondas Neuropixels. O sistema é composto por uma cassete de sonda, postes pra fixação e tampas pra proteger a parte eletrônica. O design permitiu que a sonda fosse fixada de forma segura no crânio, com parafusos mantendo tudo no lugar. Isso minimiza as chances de falhas nas peças ou de não se encaixarem corretamente, garantindo que os implantes possam ser produzidos de forma confiável.
Flexibilidade e Reutilização
O processo de implantação envolve várias etapas, como abrir a pele, criar um buraco no crânio, fixar o sistema e depois fechar o local. Com o Repix, isso se simplifica em três etapas: conectar a sonda à cassete, fixar os postes e cobrir a sonda implantada. Esse processo simplificado torna mais fácil pros pesquisadores implantarem o sistema, aumentando as chances de sucesso.
Uma vez que a sonda está no lugar, a estabilidade é crucial pra gravações a longo prazo. O Repix é projetado pra minimizar o movimento entre a sonda e o tecido cerebral, o que é essencial pra manter gravações estáveis ao longo de dias ou meses. Os usuários encontraram altas taxas de sucesso de implantações, coleta de dados e remoção da sonda depois.
Experiência do Usuário com o Repix
O sistema Repix foi compartilhado com vários outros laboratórios, permitindo que muitos pesquisadores com diferentes níveis de experiência o testassem. Isso levou a uma avaliação abrangente de como o sistema funcionou em diferentes cenários. O feedback mostrou que a maioria dos usuários obteve uma alta taxa de sucesso na implantação das sondas e na gravação de dados, o que apoiou a ideia de que o Repix pode ser facilmente adotado por novos usuários.
No total, mais de 175 implantações foram realizadas em vários laboratórios, com usuários relatando problemas mínimos com o sistema Repix. Até pesquisadores sem experiência anterior em cirurgia conseguiram um bom nível de proficiência em algumas tentativas, sugerindo que o Repix ajuda a derrubar as barreiras pra novos usuários começarem a trabalhar com gravações crônicas.
Capacidades de Gravação a Longo Prazo
Um dos principais objetivos do Repix é permitir gravações a longo prazo da atividade neural. Os pesquisadores testaram o sistema pra ver se ele poderia manter gravações estáveis por vários meses. Os resultados mostraram que o rendimento da unidade - o número de neurônios ativos gravados - se manteve alto e estável em diferentes áreas do cérebro, tanto em camundongos quanto em ratos.
O período mais longo de gravação durou cerca de um ano, demonstrando que o Repix pode funcionar de forma eficaz por longos períodos. Isso é importante pra estudos que precisam observar como a atividade neural muda ao longo do tempo em relação ao comportamento.
Reutilização de Sondas
Outra vantagem do Repix é a possibilidade de reutilizar as sondas. Isso pode reduzir significativamente o custo dos experimentos, já que os pesquisadores não precisam comprar novas sondas pra cada estudo. Os usuários começaram a reutilizar sondas à medida que se sentiam mais confortáveis com o sistema, e o rendimento inicial das sondas reutilizadas não mostrou declínio significativo na qualidade.
Poder reutilizar as sondas também apoia a sustentabilidade na pesquisa, já que menos recursos são consumidos.
Flexibilidade em Configurações Experimentais
O Repix é versátil e pode ser usado em várias condições experimentais. Isso é evidente na sua aplicação em diferentes paradigmas comportamentais. Os pesquisadores testaram o Repix em situações sociais, tarefas de realidade virtual, navegação espacial e mais. O sistema foi projetado pra causar mínima interrupção no comportamento natural do animal, garantindo que as gravações reflitam atividades genuínas.
Quando os pesquisadores compararam o movimento de camundongos com e sem o implante durante interações sociais, não encontraram diferenças significativas. Isso sugere que o Repix não atrapalha os movimentos dos animais, permitindo que eles se comportem normalmente enquanto recebem gravações neurais.
Conclusão
Pra concluir, o sistema Repix oferece uma solução confiável e flexível pra gravações neurais crônicas usando sondas Neuropixels. Seu design simples, baixo custo pela reutilização, compatibilidade com vários tipos de sondas e adaptabilidade pra diferentes estudos comportamentais fazem dele uma opção atraente pros pesquisadores em neurociência. As experiências positivas dos usuários em vários laboratórios indicam que o Repix pode facilitar a adoção mais ampla de técnicas de gravação crônica e contribuir pra avanços na compreensão da atividade neural.
Direções Futuras
À medida que a tecnologia continua a evoluir, esforços futuros podem se concentrar em refinar ainda mais o sistema Repix. Melhorias possíveis podem incluir tornar o sistema ainda mais leve ou permitir a inserção simultânea de múltiplas sondas. Garantir que o Repix atenda às necessidades de pesquisadores que trabalham em diferentes contextos continua sendo uma prioridade.
No geral, o Repix é uma ferramenta promissora pra cientistas que buscam investigar as complexidades da função neural ao longo do tempo, promovendo facilidade de uso e reutilização em um ambiente de pesquisa.
Título: Repix: reliable, reusable, versatile chronic Neuropixels implants using minimal components
Resumo: Neuropixels probes represent the state-of-the-art for high-yield electrophysiology in neuroscience: the simultaneous recording of hundreds of neurons is now routinely carried out in head-restrained animals. In contrast, neural recording in unrestrained animals, as well as recording and tracking neurons over days, remains challenging, though it is possible using chronic implants. A major challenge is the availability of simple methods that can be implemented with limited or no prior experience with Neuropixels probes, while achieving reliable, reusable, versatile high-density electrophysiology. Here we developed, deployed, and evaluated the real-world performance of Repix, a chronic implantation system that permits the repeated re-use of Neuropixels probes. The lightweight system allows implanted animals to express a full range of natural behaviors, including social behaviors. We show that Repix allows the recording of hundreds of neurons across many months, up to a year, with implants across cortical and subcortical brain regions. Probes can be reused repeatedly with stable yield. Repix has been used by 16 researchers in 10 laboratories to date, and we evaluated the real-world performance of Repix in a variety of chronic recording paradigms in both mice and rats with a combined 209 implantations. We found that the key advantage of Repix is robustness and simplicity. Adopters of Repix became proficient at five procedures on average, regardless of prior experience with in vivo electrophysiology. With the companion protocol alongside this article, the performance and user-friendliness of Repix should facilitate a wide uptake of chronic Neuropixels recordings.
Autores: Yoh Isogai, M. Horan, D. Regester, C. Mazuski, T. Jahans-Price, S. Bailey, E. J. Thompson, Z. Slonina, V. Plattner, E. Menichini, I. Toksoz, S. R. Pinto, M. Burrell, I. Varsavsky, H. W. P. Dalgleish, C. Bimbard, A. Lebedeva, M. Bauza, F. Cacucci, T. Wills, A. Akrami, J. Krupic, M. Stephenson-Jones, C. Barry, N. Burgess, J. O'Keefe
Última atualização: 2024-04-30 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.25.591118
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.25.591118.full.pdf
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