Insights genômicos sobre Rhodamnia argentea e Ferrugem do Mirto
Estudo revela que dados genômicos são essenciais para a conservação de plantas contra a ferrugem do myrtle.
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Índice
- A Importância da Sequência Genômica Precisa
- Genômica na Conservação de Plantas
- O Caso da Ferrugem Myrtle
- Desafios com Contaminantes no Sequenciamento
- Avanços na Genômica de Ácaros
- Os Objetivos do Estudo
- Processo de Coleta e Sequenciamento
- Montagem do Genoma e Remoção de Contaminantes
- Checagem de Qualidade e Tamanho do Genoma
- Anotação do Genoma
- Filogenética de Ácaros e Genômica Comparativa
- Identificando Contaminação na Montagem
- Estratégias de Extração e Sequenciamento
- Genoma de Ácaro Telômero-a-Telômero
- Direções Futuras e Oportunidades de Integração
- Conclusão
- Fonte original
Nos últimos anos, os avanços na tecnologia de sequência de DNA facilitaram e baratearam o estudo dos genomas de diferentes organismos. Isso levou a um aumento na criação de informações genéticas para plantas e animais que não são tão conhecidos. No entanto, um desafio significativo que os cientistas enfrentam é a Contaminação nos dados de sequência. A contaminação pode acontecer quando o DNA de outros organismos se mistura com a amostra alvo, o que pode distorcer os resultados e levar a mal-entendidos sobre o organismo em estudo.
A Importância da Sequência Genômica Precisa
Sequenciamento genômico preciso é fundamental para estudar a composição genética de espécies, especialmente aquelas que estão ameaçadas ou afetadas por doenças. Dados limpos e confiáveis ajudam cientistas e conservacionistas a tomar decisões informadas sobre como gerenciar e proteger essas espécies. Quando os dados de sequenciamento contêm contaminação, isso pode dificultar os esforços para entender a diversidade genética e a relação entre diferentes espécies.
Existem várias ferramentas disponíveis para verificar a qualidade dos dados de sequenciamento e identificar e remover contaminantes. Uma dessas ferramentas é o NCBI Foreign Contamination Screen, que ajuda a identificar DNA estrangeiro em sequências genômicas. Em uma triagem de um grande número de amostras genômicas, contaminação foi encontrada em uma porcentagem notável delas. Isso indica que a contaminação é um problema comum no sequenciamento.
Genômica na Conservação de Plantas
O uso de dados genômicos se tornou mais proeminente nos esforços para proteger espécies de plantas em risco, incluindo aquelas ameaçadas por espécies invasoras e doenças. Conhecer o genoma de uma planta pode fornecer insights valiosos sobre sua diversidade genética e história, o que pode ser essencial para estratégias de conservação. Por exemplo, entender como as plantas se adaptam aos seus ambientes pode ajudar os responsáveis pela conservação a tomarem melhores decisões sobre como preservar a variedade genética.
Uma área crítica de preocupação é a Ferrugem da Myrtle, uma doença fúngica que afeta muitas plantas da família Myrtaceae. A doença se espalhou rapidamente na Austrália e representa uma ameaça significativa às espécies nativas. Portanto, os pesquisadores estão se concentrando em gerar recursos genômicos para essas plantas a fim de apoiar os esforços de conservação.
O Caso da Ferrugem Myrtle
A ferrugem myrtle, causada por um fungo chamado Austropuccinia psidii, tem uma ampla gama de hospedeiros dentro da família Myrtaceae, que inclui muitas plantas importantes. Inicialmente introduzida na Austrália em 2010, essa doença causou quedas substanciais nas espécies nativas. Os pesquisadores estão ansiosos para entender melhor a genética das plantas afetadas pela ferrugem myrtle para ajudar nos esforços de conservação.
Vários genomas de espécies de Myrtaceae comercialmente significativas já foram sequenciados. No entanto, mais trabalho é necessário, especialmente para as espécies nativas australianas que são vulneráveis à ferrugem myrtle. Existem lacunas nos dados genômicos, particularmente para espécies como Rhodamnia, que sofrem com a doença.
Desafios com Contaminantes no Sequenciamento
Um grande problema durante o processo de sequenciamento é a contaminação por diversos pragas e patógenos. Organismos como ácaros são tão pequenos que podem não ser vistos durante a coleta, facilitando que sejam incluídos na amostra de DNA. Isso pode levar a resultados enganosos quando os cientistas analisam os dados sequenciados.
Por exemplo, contaminação foi encontrada mesmo quando os pesquisadores sequenciaram um ácaro predador, que pegou DNA da sua presa. Da mesma forma, contaminantes podem se misturar com o DNA da planta, complicando a análise.
Avanços na Genômica de Ácaros
Ácaros eriophyoides, que são criaturas minúsculas que se alimentam de plantas, têm sido o foco de estudos genômicos recentes. Apesar do seu tamanho, eles podem ter impactos significativos como pragas agrícolas. Esforços para entender sua composição genética aumentaram, levando a um conhecimento melhor sobre seu comportamento e como interagem com as plantas.
O primeiro genoma completo de um ácaro eriophyoide foi sequenciado recentemente, fornecendo insights sobre sua biologia. Pesquisas adicionais sobre os dados genômicos desses ácaros podem ajudar nas estratégias de manejo de pragas para combater seus efeitos nocivos.
Os Objetivos do Estudo
Este estudo teve como objetivo criar um genoma de alta qualidade para a árvore Rhodamnia argentea, que é parcialmente resistente à ferrugem myrtle. Os pesquisadores usaram técnicas avançadas de sequenciamento para montar o genoma. Eles também enfatizaram a importância de verificar a contaminação durante o sequenciamento do genoma e demonstraram como os contaminantes foram identificados e tratados em um genoma de ácaro separado.
Processo de Coleta e Sequenciamento
Folhas jovens de Rhodamnia argentea foram coletadas para análise. As folhas foram armazenadas cuidadosamente para manter sua qualidade até serem processadas. Vários métodos foram aplicados para extrair DNA, garantindo que as amostras permanecessem isentas de contaminação.
O processo de sequenciamento envolveu várias etapas, começando com a extração de DNA de alta qualidade. Várias tecnologias, incluindo sequenciamento de leitura longa e sequenciamento de leitura vinculada, foram usadas para reunir o máximo de dados possível. Os dados brutos foram então limpos e filtrados para garantir que apenas sequências de alta qualidade fossem retidas.
Montagem do Genoma e Remoção de Contaminantes
O processo de montagem do genoma incluiu a compilação de dados de diferentes métodos de sequenciamento. Os pesquisadores primeiro criaram uma montagem inicial do genoma, identificando áreas que mostravam sinais de contaminação. Com a ajuda de dados de sequenciamento adicionais, eles refinou a montagem para eliminar contaminantes.
Um esforço significativo foi feito para garantir que o genoma final fosse preciso. Houve várias rodadas de polimento e checagens de qualidade para eliminar qualquer contaminante. Essa abordagem minuciosa permitiu uma representação mais confiável do genoma de Rhodamnia argentea.
Checagem de Qualidade e Tamanho do Genoma
Para medir a qualidade do genoma montado, os pesquisadores usaram softwares especializados que verificam quão completo o genoma está. A montagem inicial do genoma mostrou um alto grau de completude, confirmando que a montagem era confiável.
O genoma montado de Rhodamnia argentea consistia em múltiplos scaffolds, e o tamanho geral estava de acordo com as expectativas. Isso permitiu que os pesquisadores concluíssem que o genoma estava bem caracterizado e adequado para pesquisas futuras.
Anotação do Genoma
Uma vez que o genoma foi montado, o próximo passo foi anotá-lo, o que envolve identificar genes e suas funções dentro do genoma. Uma variedade de ferramentas de software foi usada para prever o número de genes codificadores de proteínas, bem como identificar genes de RNA ribossômico e RNA transportador.
O processo de anotação forneceu uma riqueza de informações sobre as capacidades genéticas de Rhodamnia argentea. Os pesquisadores conseguiram reunir dados sobre contagens de genes e seus papéis potenciais, o que é crucial para entender a biologia da espécie e sua resposta à ferrugem myrtle.
Filogenética de Ácaros e Genômica Comparativa
Para colocar o genoma do ácaro em contexto, os pesquisadores o compararam com genomas de ácaros disponíveis. Através da análise comparativa, eles aprenderam mais sobre as relações evolutivas entre diferentes espécies de ácaros.
A análise filogenética ajudou a esclarecer a posição do novo ácaro sequenciado dentro de sua superfamília, revelando como ele se compara com outros ácaros e sua diversidade genética. Esta informação pode ser essencial para estudos futuros sobre manejo populacional e métodos de controle de pragas.
Identificando Contaminação na Montagem
O estudo destacou o desafio da contaminação durante os processos de sequenciamento e montagem. Contaminantes complicam os dados, dificultando a obtenção de resultados claros. Os pesquisadores enfatizaram a necessidade de uma revisão cuidadosa para identificar e remover quaisquer sequências contaminantes.
Melhorar as técnicas de detecção e triagem desempenha um papel vital na montagem do genoma. Novas ferramentas surgiram para agilizar o processo de detecção, ajudando os pesquisadores a identificar contaminantes de forma mais eficaz.
Estratégias de Extração e Sequenciamento
Os métodos usados para extração de DNA e sequenciamento podem influenciar muito a presença de contaminação. Tecnologias de sequenciamento de leitura longa geralmente levam a menos erros durante a montagem em comparação com métodos de leitura curta. Garantir uma amostra de alta qualidade é um passo significativo para reduzir a contaminação.
Em organismos não modelo como Rhodamnia, encontrar protocolos de extração eficazes pode ser essencial para obter amostras puras. Os pesquisadores notaram que compartilhar técnicas bem-sucedidas entre cientistas pode ajudar a avançar o campo e melhorar os resultados em estudos futuros.
Genoma de Ácaro Telômero-a-Telômero
O estudo também alcançou um marco significativo ao produzir uma montagem completa de um genoma de ácaro, de ponta a ponta. Os cromossomos foram finalizados com sequências de telômero identificáveis, levando a uma representação mais precisa do genoma do organismo.
Essas descobertas podem ter aplicações mais amplas na compreensão de características genéticas em outras espécies de ácaros. Ao estudar os telômeros dos ácaros eriophyoides, os pesquisadores poderiam obter insights sobre sua biologia e comportamento, possibilitando melhores estratégias de manejo de pragas.
Direções Futuras e Oportunidades de Integração
A pesquisa indica um futuro promissor para estudos genômicos nas interações entre plantas e pragas. Uma abordagem integrativa poderia permitir o sequenciamento simultâneo de plantas hospedeiras e suas pragas, fornecendo insights sobre suas relações. Isso poderia levar a melhores estratégias para gerenciar doenças e pragas que ameaçam a saúde das plantas.
Ao examinar os genomas tanto das plantas quanto das pragas que as afetam, os cientistas podem aprimorar sua compreensão da biologia subjacente que impulsiona essas interações. Esse conhecimento é essencial para desenvolver técnicas eficazes de conservação e manejo na agricultura e ecologia.
Conclusão
O esforço para sequenciar e entender o genoma de Rhodamnia argentea oferece recursos valiosos para conservacionistas e cientistas. À medida que a tecnologia continua a melhorar, os cientistas estarão mais bem equipados para enfrentar os desafios da contaminação e descobrir informações genéticas críticas para plantas e suas pragas associadas. O conhecimento adquirido a partir deste estudo contribuirá para informar pesquisas futuras e estratégias de conservação para a família Myrtaceae, especialmente diante de ameaças como a ferrugem myrtle. A importância de investigações contínuas sobre a composição genética tanto de plantas quanto de pragas desempenhará um papel fundamental nos esforços de conservação da biodiversidade daqui pra frente.
Título: Small but mitey: long-read assembly of a streamlined mite genome from contaminated host plant sequencing data
Resumo: Technological advances have propelled DNA sequencing of non-model organisms, making sequencing more accessible and cost effective, which has also increased the availability of raw data in public repositories. However, contamination is a significant concern, and the use and reuse of sequencing data requires quality control and curation. A reference genome for the Australian native rainforest tree Rhodamnia argentea Benth. (malletwood) was assembled from Oxford Nanopore Technologies (ONT) long-reads, 10x Genomics Chromium linked-reads, and Hi-C data (N50 = 32.3 Mbp and BUSCO completeness 98.0%) with 99.0% of the 347 Mbp assembly anchored to 11 chromosomes (2n = 22). The R. argentea genome will inform conservation efforts for Myrtaceae species threatened by the global spread of the fungal disease myrtle rust. We observed contamination in the sequencing data and further investigation revealed an arthropod source. Here, we demonstrate the feasibility of assembling a high-quality gapless telomere-to-telomere mite genome using contaminated host plant sequencing data. The mite exhibits genome streamlining and has a 35 Mbp genome (68.6% BUSCO completeness) on two chromosomes, capped with a novel TTTGG telomere sequence. Phylogenomic analysis suggests that it is a previously unsequenced eriophyoid mite. Despite its unknown identity, this complete nuclear genome provides a valuable resource to investigate invertebrate genome reduction. This study emphasises the importance of checking sequencing data for contamination, especially when working with non-model organisms. It also enhances our understanding of two species, including a tree that faces substantial conservation challenges, contributing to broader biodiversity initiatives. SignificanceThe genomes of Rhodamnia argentea and an associated eriophyoid mite, which contaminated the tree raw sequencing data, were assembled for the first time. We generated valuable chromosome-level genomic resources for the conservation of myrtle rust impacted tree species, pest genomics, and understanding genome streamlining. The research underscores the growing prevalence of sequencing experiments in non-model organisms while emphasising the importance of quality control and curation of sequencing data.
Autores: Richard J Edwards, S. H. Chen, A. Jones, P. Lu-Irving, J.-Y. S. Yap, M. van der Merwe, J. G. Bragg
Última atualização: 2024-05-20 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.17.594625
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.17.594625.full.pdf
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