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# Biologia # Bioengenharia

Alvo de Células com Nanostruturas de DNA

Cientistas usam origami de DNA pra melhorar a entrega de remédios direcionados pra doenças.

Indra Van Zundert, Elena Spezzani, Roger R. Brillas, Lars Paffen, Angelina Yurchenko, Tom F. A. de Greef, Lorenzo Albertazzi, Alessandro Bertucci, Tania Patiño

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As interações na superfície das células são super importantes pra várias funções biológicas. Elas ajudam em como as células se comunicam, como nosso sistema imunológico funciona e como as células se grudam. Essas interações também são cruciais pra manter nossos tecidos saudáveis. Quando algo sai errado, pode rolar doenças. Então, entender como essas interações funcionam pode ajudar os cientistas a desenvolverem novos remédios e ferramentas pra diagnosticar condições.

O Papel da Nanotecnologia

Recentemente, os cientistas perceberam um grande potencial em usar partículas minúsculas, conhecidas como Nanopartículas, pra mirar em Receptores específicos das células. Essas nanopartículas podem ser personalizadas em tamanho e ter superfícies especiais que permitem que elas grudem em várias moléculas. Essa personalização pode torná-las mais eficazes em atingir determinadas células. Por exemplo, grudar mais sinais ou “ligantes” em uma única nanopartícula pode aumentar a capacidade dela de encontrar e se grudar em receptores específicos.

O Desafio de Mirar

Embora tenha rolado alguns avanços no uso de nanopartículas pra miras, controlar quantos sinais estão em uma partícula e onde eles estão posicionados é bem complicado. Aí que entra o Origami de DNA. Usando um pedaço longo de DNA, os cientistas conseguem criar formas e estruturas que são precisas e programáveis. Eles podem colocar diferentes moléculas nessas estruturas de DNA exatamente onde querem, o que pode melhorar como elas miram nas células.

Origami de DNA: Uma Revolução

O origami de DNA permite que os pesquisadores construam estruturas minúsculas em 1D, 2D e até 3D a partir do DNA. Essas estruturas podem agir como pequenas vans, levando moléculas importantes pra células específicas. A capacidade de colocar essas moléculas em lugares específicos é crucial pra miras. A distância entre os sinais pode influenciar quão bem eles se ligam às células. Por causa dessa flexibilidade de design, o origami de DNA mostra promessa pra estudar como as células interagem.

Aplicações do Mundo Real do Origami de DNA

Nos últimos dez anos, os cientistas têm trabalhado duro pra garantir que o origami de DNA seja seguro pra uso em organismos vivos. Isso significa garantir que não cause dano ou seja destruído rapidamente no corpo. Eles pretendem aplicar o origami de DNA em várias áreas, incluindo tratamento de câncer, terapia gênica e desenvolvimento de vacinas. Por exemplo, o origami de DNA pode entregar medicamentos contra o câncer diretamente nas células tumorais, minimizando o dano às células saudáveis.

Desafios na Pesquisa Atual

Até agora, a maioria dos estudos analisou quão bem o origami de DNA mira nas células, mas ainda tem muitos detalhes desconhecidos. Não se sabe muito sobre como o origami de DNA interage com as células em uma escala pequena. A maior parte das pesquisas focou em medir resultados após um certo tempo, sem olhar as interações iniciais entre as estruturas de DNA e as membranas celulares.

Os Próximos Passos

Pra preencher essas lacunas, os pesquisadores estão estudando como o origami de DNA interage com as membranas celulares desde o começo. Eles estão usando um método chamado rastreamento de partículas únicas (SPT). Essa técnica permite que eles observem o movimento de estruturas de DNA individuais ao longo do tempo. Ao observar como essas estruturas se difundem, se ligam e entram nas células, eles podem obter insights de como a entrega de medicamentos direcionada funciona em tempo real.

Experimentando com Nanobarras de DNA

Nos experimentos, os cientistas criaram nanobarras de DNA que foram funcionalizadas com anticorpos ou Aptâmeros especiais. Esses são como pequenas bandeiras que ajudam a barra a encontrar e se ligar a receptores específicos na superfície das células de câncer de mama, que têm muito de um receptor chamado EGFR. Ao observar como essas nanobarras se movem e se ligam, os pesquisadores podem aprender mais sobre quão eficazes são seus métodos de mira.

A Montagem Experimental

Os pesquisadores usaram dois tipos de células: células de câncer de mama (com alto EGFR) e células renais (com baixo EGFR) pra comparação. O objetivo era ver quão bem as nanobarras conseguiam diferenciar entre os dois tipos de células com base no número de receptores que elas têm. Isso pode ajudar a estabelecer se a abordagem deles é seletiva.

Monitorando Interações

Pra monitorar quão bem as nanobarras de DNA estavam se ligando às células, os pesquisadores capturaram imagens dessas interações. Eles usaram microscópios avançados pra visualizar como as nanobarras de DNA se comportaram após serem introduzidas nas células. Analisando as fotos, eles puderam ver quantas barras estavam se ligando às células e por quanto tempo permaneceram grudadas.

Observando Movimento

Nas observações, as nanobarras de DNA não funcionalizadas (as simples, sem bandeirinhas especiais) se moviam aleatoriamente, como uma criança correndo no parquinho. Em contraste, as nanobarras funcionalizadas mostraram padrões de movimento diferentes quando encontraram seu alvo. Algumas desaceleravam perto da superfície celular, indicando que estavam se ligando com sucesso à célula.

Estatísticas de Ligação

Os pesquisadores calcularam quantas dessas nanobarras se ligaram com sucesso às células-alvo ao longo do tempo. Eles notaram que as barras funcionalizadas tinham uma porcentagem de ligação significativamente mais alta em comparação com as não funcionalizadas. Isso sugere que a abordagem de mira deles funcionou bem.

A Especificidade Importa

Curiosamente, as nanobarras decoradas com aptâmeros (um tipo de bandeira) mostraram um padrão de ligação diferente em comparação com as que tinham anticorpos (outro tipo de bandeira). Enquanto os anticorpos tiveram uma queda acentuada na ligação após um pico inicial, as barras cobertas por aptâmeros aumentaram sua ligação com o tempo. Essa observação pode indicar que os aptâmeros podem fornecer uma interação mais forte e estável com o receptor-alvo.

Testando Diferentes Tipos de Células

Em seguida, os pesquisadores queriam ver como as nanobarras se saíam em células com menor expressão de receptores. Comparando a ligação de nanobarras em células com alto e baixo níveis de EGFR, eles puderam avaliar quão eficaz era o método de mira deles. Eles observaram que as nanobarras miravam as células de forma mais eficaz com altos níveis de EGFR, sugerindo que a seletividade deles era boa.

A Cinética da Ligação

Pra entender melhor como as nanobarras interagiam com os receptores, os pesquisadores examinaram a cinética dessas interações. Eles focaram em quão rápido as nanobarras se anexavam aos receptores e quão logo se desprendiam. Analisando quanto tempo as barras ficavam grudadas, os pesquisadores podiam descobrir a força da ligação.

Decifrando a Dinâmica de Ligação

Os resultados revelaram algumas surpresas. Por exemplo, mesmo com mais bandeirinhas de ligação nas nanobarras, o tempo de ligação não aumentou significativamente para as barras decoradas com anticorpos. Isso pode ser devido ao tamanho maior dos anticorpos causando alguma interferência, enquanto os aptâmeros, sendo menores, permitiram melhores interações.

Implicações para Pesquisas Futuras

As descobertas desses experimentos iluminam como o origami de DNA pode mirar efetivamente em tipos específicos de células. Essas percepções têm implicações significativas para o design de sistemas de entrega de medicamentos melhores. Os cientistas podem usar esse conhecimento pra criar tratamentos mais eficazes e seletivos pra doenças, incluindo o câncer.

Em Resumo: O Grande Quadro

Pra concluir, os pesquisadores estão fazendo avanços empolgantes em entender como o origami de DNA interage com as superfícies celulares. Usando técnicas avançadas como o rastreamento de partículas únicas, eles podem investigar essas interações mais a fundo do que nunca. As descobertas deles não apenas aumentam o conhecimento científico, mas também abrem novas portas pra criar terapias direcionadas e sistemas de entrega de medicamentos. O futuro parece promissor enquanto os pesquisadores continuam a desvendar os mistérios das nanostruturas de DNA e seu potencial na medicina.

Por Que Isso É Importante

Colocando de forma mais simples, a capacidade de mirar células específicas é como mandar um míssil guiado pra uma área-alvo evitando inocentes no caminho. À medida que os cientistas se tornam mais habilidosos em usar o origami de DNA pra esses fins, eles não só melhoram as terapias, mas também garantem menos efeitos colaterais pros pacientes. No mundo da ciência, cada descoberta pode levar a novas e melhores abordagens pra enfrentar desafios de saúde complexos.

E quem sabe? No futuro, a gente pode ter nanobots zanzando pelo nosso fluxo sanguíneo, entregando remédios bem onde eles são necessários, enquanto evitam o tráfego chato do nosso corpo!

Fonte original

Título: Unveiling DNA Origami Interaction Dynamics on Living Cell Surfaces by Single Particle Tracking

Resumo: Due to the unique spatial addressability of DNA origami, targeting ligands (e.g. aptamers or antibodies) can be specifically positioned onto the surface of the nanostructure, constituting an essential tool for studying ligand-receptor interactions at the cell surface. While the design and ligand incorporation into DNA origami nanostructures are well-established, the study of cell surface interaction dynamics is still in the explorative phase, where in depth fundamental understanding on the molecular interactions remains underexplored. This study uniquely captures real-time encounters between DNA origami and cells in-situ using single particle tracking (SPT). Here, we functionalized DNA nanorods (NRs) with antibodies or aptamers specific to the epidermal growth factor receptor (EGFR) and used them to target EGFR-overexpressing cancer cells. SPT data revealed that ligand coated NRs selectively bound to the receptors expressed in target cancer cells, while non-functionalized NRs only display negligible cell interactions. Furthermore, we explored the effect of ligand density on the DNA origami, which revealed that aptamer-decorated NRs exhibit non-linear binding characteristics, whereas this effect in antibody-decorated NRs was less pronounced. This study provides new mechanistic insights into the fundamental understanding of DNA origami behaviour at the cell interface, with unprecedented spatiotemporal resolution, aiding the rational design of ligand-targeted DNA origami for biomedical applications.

Autores: Indra Van Zundert, Elena Spezzani, Roger R. Brillas, Lars Paffen, Angelina Yurchenko, Tom F. A. de Greef, Lorenzo Albertazzi, Alessandro Bertucci, Tania Patiño

Última atualização: 2024-12-23 00:00:00

Idioma: English

Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.23.628980

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.23.628980.full.pdf

Licença: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Alterações: Este resumo foi elaborado com a assistência da AI e pode conter imprecisões. Para obter informações exactas, consulte os documentos originais ligados aqui.

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