合成生物学の進展:ライフライクなシステムの創造
研究者たちは、複製して進化する合成細胞を開発しようとしてるんだ。
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合成生物学は、生物学、工学、コンピュータサイエンスを組み合わせて新しい生物システムを作ったり、既存のものを再設計したりする分野だよ。主な目標の一つは、生き物のように振る舞う合成システムを構築すること。これらのシステムを作ることで、医学、農業、基本的な生物学的プロセスの理解について進展をもたらすことができるんだ。
生き物の大きな特徴の一つは進化する能力だね。進化は種がさまざまな環境に適応して繁栄するのを可能にする。何十億年もの間、地球の生命は多様な形に進化し、多くの挑戦を乗り越えてきた。科学者たちは、進化の仕組みを理解することで合成生命体を作り出す助けになると考えているんだ。
合成細胞を作る挑戦
合成細胞を作るためには、研究者が生きた細胞の重要な特徴を複製する必要がある。これには自分自身を再生産できるシステムを作ることが含まれるよ。DNAの複製は生物における遺伝の基盤となるプロセスだから、重要なんだ。DNAが主な分子だけど、初期の生命形態には他の分子も関与する可能性があるって考えられている。
実験室では、DNAを使わずに自己複製を可能にするさまざまなシステムが作られている。これにはRNAやペプチドなどが含まれるかも。でも、今の構造は遺伝子型(遺伝情報)と表現型(観察可能な特徴)を分離していないから、進化の能力が制限されているんだ。
遺伝子型と表現型を分離する重要性
遺伝子型と表現型を分離するのは進化の重要な部分だよ。これにより、より大きな変異性と適応能力が得られる。研究者たちは、RNAを遺伝物質、タンパク質を機能的成分として使うプロトセルの研究を進めているけど、RNAの不安定さや、ほとんどの生命体がDNAを使っていることから、完全にRNAだけで機能するシステムを作るのは難しいんだ。
研究者たちは、これらの合成細胞を作るために、DNAベースのシステムを探求している。たとえば、DNAウイルスを効率的に複製できるものを使う研究も進められている。これらのメカニズムを使って、複製と進化が可能な合成細胞を作ろうとしているんだ。
合成細胞におけるDNA複製の重要な概念
研究者たちはいくつかのDNA複製の方法を探求している。たとえば、ローリングサークル複製(RCR)というプロセスがあって、円形のDNAが自己複製できる。しかし、この方法は長い繰り返しのDNA構造を生成しがちで、進化のプロセスを複雑にするという限界があるんだ。
別の方法では、線状DNA複製システムを使うことで、長い構造を生成せずにDNAをより効率的に複製できる。この方法なら、合成細胞の次の世代に何の特徴を受け渡すかをより良いコントロールができるかもしれない。
合成生物学における区画化の役割
生きた細胞では、膜が異なる機能やプロセスを分けている。研究者たちは、リポソームと呼ばれる人工構造を使ってこの区画化を模倣できる。これらのリポソームは、DNAの複製と進化に適した孤立した環境を作り出すことができるよ。これらは、これらのプロセスに必要な分子的機械を囲むことによって機能する。
リポソームを使うことで、科学者たちは異なるDNAの配列やその機能をテストできて、進化の追跡が簡単にできる。異なる区画でDNAをミックス・マッチする能力は、より生きた細胞を模倣するシステムを発展させることができるんだ。
合成プロトセルを使った進化実験
研究者たちは、これらの合成プロトセルを使って、DNAが制御された環境でどのように適応して進化するかを研究する実験を行っている。目的は、自然選択を受けるシステムを作り出して、自己複製能力や全体的な機能の向上を目指すことなんだ。
これらの実験では、科学者たちはRNAの転写と翻訳のサイクルを使って、リポソームの中でDNAを生成している。DNAに小さな変化を加えて、それらの変化が時間とともに選ばれることを許可することで、合成の文脈で自然の進化の代表を見ることを目指しているよ。
インターミッテント進化法
研究者たちが使っている方法の一つにインターミッテント進化というのがある。このプロセスでは、DNAをリポソームに封入して、複製を許可し、その後DNAを抽出してさらなる進化を行う。システムの大きな利点は、各ラウンドでDNAのサイズと濃度をコントロールでき、望ましくない変異が支配する確率を減らすことができる点だよ。
インターミッテント進化実験の結果
インターミッテント進化を用いた実験では、研究者たちはDNAの自己複製が何ラウンドかの進化を経て改善されたことを発見した。これは、機能的な自己複製システムが維持され、さらには強化されることを示している。研究者たちは、特定の配列が集団を支配することが多いのを観察していて、それが何らかの進化的優位性を提供していることを示唆しているんだ。
プロトセルでの連続進化の試み
インターミッテント進化は前途が有望だけど、研究者たちは人間の介入なしで遺伝情報を渡すことができる連続進化のセットアップを作ることにも興味を持っている。このアプローチは、自然の進化プロセスを模倣することに近づけるかもしれない。
フィーディングベシクルを使って、凍結と解凍のサイクルを通じて混ぜることを許可することで、研究者たちはDNAが継続的に複製されて適応できるセットアップを作り出そうとしているんだ。
変異体とその進化的ダイナミクスの検証
研究者たちは、これらの進化ラウンドで現れる変異にも注意を払っている。彼らはDNAの配列を分析して、どの変異が自己複製プロセスでの優位性を提供するかを理解しようとしている。
深層配列解析の方法を使えば、進化の異なる段階における変異の頻度を特定できる。この研究からのデータは、遺伝的変異が合成細胞の全体的なパフォーマンスにどのように寄与するかを明らかにするんだ。
変異の蓄積と進化的ダイナミクスの理解
進化が進むにつれて、研究者たちはDNA内の変異数が増加することを観察する。特定の変異がより一般的になり、それがしばしば複製効率を向上させる洞察を提供することが多いんだ。
実験は、進化への異なる道筋が存在することを示唆していて、ある変異は即座に利益を提供する一方、他の変異はその利点が現れるのに時間がかかることがあるよ。これらの異なる変異のバランスは、研究者たちが自己複製を改善するための重要な配列を特定するのに役立つんだ。
重要な変異と機能への影響の特定
逆エンジニアリングを通じて、研究者たちは特定の変異が自己複製能力にどのように影響するかも検討している。ターゲット変異を持つ合成DNAの変異体を作成することで、制御された環境でどの変更がより良い複製率につながるかを評価できるんだ。
特に、一部の変異は自己複製とDNAがコピーを生成する速度において大幅な改善を示している。この特定の遺伝的変化がパフォーマンスを向上させることを理解することで、将来の合成生物システムの設計に役立つんだ。
結論と今後の方向性
合成生物学の努力は、生命の基本的なプロセスと生物が進化するメカニズムについての理解を深めることを目指している。自己複製する合成細胞を開発することで、医学、農業、環境科学など、さまざまな分野で画期的な進展が期待できるんだ。
これらのプロセスを洗練し続けることで、研究者たちは生き物特有のより複雑な行動を解き明かそうとしている。究極の目標は、細菌やウイルスシステムのようにリアルタイムで進化し適応できる合成生命体を作ることなんだ。
これらの研究は、先進的な遺伝子治療の開発やウイルスの行動をモデル化するような治療的応用を探求する道を切り開いている。研究者たちが合成生物学が達成できることの限界を押し広げるにつれて、社会や科学への潜在的な利益はますます有望になっているよ。
タイトル: Darwinian Evolution of Self-Replicating DNA in a Synthetic Protocell
概要: Replication, heredity, and evolution are characteristic of Life. We and others have postulated that the reconstruction of a synthetic living system in the laboratory will be contingent on the development of a genetic self-replicator capable of undergoing Darwinian evolution. Although DNA-based life dominates, the in vitro reconstitution of an evolving DNA self-replicator has remained challenging. We hereby emulate in liposome compartments the principles according to which life propagates information and evolves. Using two different experimental configurations supporting intermittent or semi-continuous evolution (i.e., with or without DNA extraction, PCR, and re-encapsulation), we demonstrate sustainable replication of a linear DNA template - encoding the DNA polymerase and terminal protein from the Phi29 bacteriophage - expressed in the protein synthesis using recombinant elements (PURE) system. The self-replicator can survive across multiple rounds of replication-coupled transcription-translation reactions in liposomes and, within only ten evolution rounds, accumulates mutations conferring a selection advantage. Combined data from next-generation sequencing with reverse engineering of some of the enriched mutations reveal nontrivial and context-dependent effects of the introduced mutations. The present results are foundational to build up genetic complexity in an evolving synthetic cell, as well as to study evolutionary processes in a minimal cell-free system.
著者: Christophe Danelon, Z. Abil, A. M. Restrepo Sierra, A. R. Stan, A. Chane, A. del Prado, M. de Vega, Y. Rondelez
最終更新: 2024-04-30 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.30.591827
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.30.591827.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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