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# 生物学# 細胞生物学

ダフニアの細胞タイプのマッピング

ダフニアの新しい細胞アトラスが遺伝子発現や細胞タイプについての洞察を明らかにした。

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目次

単細胞トランスクリプトミクスは、細胞が発展、病気、生物システムなどの異なる条件下でどう振る舞うかを研究する新しい方法なんだ。この技術は、科学者が個々の細胞で遺伝子がどう表現されるかを特定するのを助けていて、これは組織の種類や発展段階によって異なることがあるんだ。研究者たちは、人間やマウス、カエル、魚、ショウジョウバエ、ミミズなど、さまざまな生物にこの技術を使ってきた。それぞれの研究で、これらの生物の細胞の種類の詳細なマップが作られたんだ。

今、単細胞トランスクリプトミクスを他の生物に適用することに強い関心が集まっていて、特に生態学的研究、薬物テスト、老化研究に役立つ生物に対してなんだ。もっと多くの生物を研究することで、研究者たちは遺伝子の機能や細胞の種類をより良く理解できるようになるんだ。異なる生物を比較することで、一つの種だけを見ていると見逃してしまうユニークな特徴がわかるかもしれない。

この研究にとっての有用なモデル生物はダフニア、小さな淡水の甲殻類だ。ダフニアは、100年以上にわたり生物学において重要な存在なんだ。生殖細胞と体細胞の分離や食事が寿命に与える影響などの重要な生物学的概念は、この生物を使って初めて研究されたんだ。最近の研究でも、ダフニアは毒性学やさまざまな遺伝学の研究における役割が強調されていて、生態系を理解するための貴重なツールとなっているんだ。

ダフニアのための細胞アトラスの必要性

科学者たちが、遺伝子発現の細胞レベルの変化が環境要因に応じて反応する証拠を集める中で、ダフニアには詳細な細胞タイプのアトラスが大いに役立つことが明らかになってきた。このアトラスがあれば、研究者は単細胞トランスクリプトミクスを効果的に活用できるようになるんだ。ダフニアにはこのリソースが現在欠けているからね。

この研究は、いくつかの単細胞RNAシーケンシング実験を行ってダフニアの細胞アトラスを作成することを目指しているんだ。データを分析することで、筋肉細胞、皮膚細胞、神経細胞、腸細胞など、さまざまな細胞タイプを特定できることを期待しているんだ。ダフニアの細胞タイプを、よく研究されているショウジョウバエの細胞タイプと結びつけて、種間の類似点や違いを見つけるのが目標なんだ。

細胞分析の方法

ダフニアを分析するために、研究者たちはエルサレムの池から得た特定のクローンのダフニアマグナを使ったんだ。ダフニアは管理された環境に置かれ、毎日藻類を与えられた。実験の前に、健康な細胞を確保するために、成人ダフニアに3日間抗生物質が与えられたんだ。

単細胞シーケンシングでは、組織を個々の細胞に分ける必要があるんだ。ダフニアを特殊な緩衝液に入れて、組織を分解するのを手助けしたんだ。健康な細胞の数を最大化するために、研究者たちは酵素の混合物を使って組織を解離させた。細胞懸濁液は、大きなゴミを取り除くためにろ過されたんだ。シーケンシングプロセスが始まる前に、細胞の生存率をテストして、大半の細胞が生きていることを確認したんだ。

シーケンシングデータは、個々の細胞の遺伝子発現パターンを分析するために特別なソフトウェアを使って処理されたんだ。研究者たちは、細胞タイプやその機能を特定するのに役立つパターンをデータの中から探したんだ。

細胞タイプ分析の結果

行った2つの実験から、研究者たちはダフニアの異なる細胞タイプを示す多数の細胞クラスターを特定したんだ。30以上の異なる転写プロファイルが観察された。それぞれのクラスターは、ショウジョウバエの既知の細胞タイプと遺伝子発現を比較することで、一時的に特定された特定の細胞タイプに対応しているんだ。

神経細胞と筋肉細胞

ダフニアには、体全体に分布する神経系があって、頭部には明確な構造があるんだ。いくつかの特定された細胞クラスターは、ショウジョウバエの神経細胞に大きな類似点を示したんだ。一つのクラスターは特に光に反応する光受容細胞に関連付けられたんだ。他のクラスターは、限られた明確なマーカーのために特定の機能を指摘するのが難しいが、さまざまな神経細胞を表している可能性がある。

ダフニアでも筋肉細胞、つまりミオサイトが特定されたんだ。ユニークな遺伝子発現パターンを持つ筋肉細胞の主要な2つのタイプが見つかったんだ。これらの筋肉細胞は移動に必要で、ショウジョウバエのさまざまな筋肉細胞タイプに似ているけど、特定の同定は難しかったんだ。

生殖細胞

ダフニアには体の中ほどに生殖器があるんだ。この研究では、雌の生殖組織に豊富に存在する細胞タイプを特定することができたんだ。このクラスターは、雄特有の細胞とは大きな違いを示し、卵巣や精巣の機能に一致する特有の遺伝子発現パターンを示しているんだ。既知のショウジョウバエの生殖マーカーとの重複もあったけど、神経細胞や筋肉細胞のような他の細胞タイプに比べてつながりはそれほど強くなかったんだ。

消化器系の細胞

ダフニアの消化器系は、異なる胚葉から派生したいくつかの部分を含んでいるんだ。中腸細胞を表す一つの細胞タイプは、既知のショウジョウバエの中腸細胞との中程度の重複が見られたんだ。さらに二つのクラスターは前腸と後腸の組織に関連付けられているけど、さまざまな他の細胞タイプとの類似性のために結果はあまり明確ではなかったんだ。

脂肪体と免疫細胞

ダフニアには、代謝やエネルギー貯蔵に重要な役割を果たす脂肪体があるんだ。一部の細胞タイプは脂肪体細胞と免疫細胞(ヘモサイト)の両方に類似していることが示されたんだ。これらの細胞の特定は、ショウジョウバエのヘモサイトの遺伝子発現プロファイルと重なっているため、難しかったんだ。研究者たちは、これらの細胞間の関係がダフニア特有の進化的適応を反映している可能性があると考えているんだ。

種間の細胞マッチングにおける課題

種間の細胞タイプをマッチさせるのはしばしば難しいんだ、特にダフニアとショウジョウバエのように進化的な違いが大きい生物間ではね。神経細胞や筋肉細胞のような保存された細胞タイプがある一方で、多くの特定の細胞タイプは、時間とともに失われたり変化したりすることがあるんだ。研究では、呼吸器のような特定の組織が二つの種間でうまくマッチしないことが観察されており、系統特異的な適応の可能性を示唆しているんだ。

これらの違いは、遺伝子の獲得や喪失、細胞タイプの変化、異なる環境条件に応じた遺伝子の表現の変化など、いくつかの要因から生じることがあるんだ。共有される細胞タイプがあっても、特定の機能や特徴が時間とともに分岐しているかもしれないから、直接比較するのは難しいんだ。

今後の研究への潜在的な影響

この研究はダフニアや他の生物に対するさらなる研究の可能性を広げるものなんだ。今回の研究で構築された細胞アトラスは、今後の研究で基盤となるリソースを提供するんだ。これによって科学者は、ダフニアが環境の変化にどのように細胞レベルで反応するかを調べることができるようになり、生態学的ゲノミクスや薬物テスト、老化研究への洞察を提供するんだ。

アトラスを使って、研究者たちはダフニアがさまざまな汚染物質や環境ストレッサーにさらされたときに遺伝子発現がどう変化するかを調査できるんだ。細胞の反応を理解することで、淡水生態系のためのより効果的な保全戦略につながるかもしれない。

さらに、ダフニアの遺伝的構成について得られた知識は、科学者が細胞レベルで薬物が生物に与える影響をテストする薬物毒性学の研究を強化することにもつながるんだ。また、遺伝子発現が時間とともにどのように調整されるかを明らかにすることで、老化研究への貢献も考えられるんだ。これによって、代謝の健康や長寿に対する洞察が得られるかもしれない。

結論

結局、ダフニアにおける単細胞トランスクリプトミクスの研究は、この重要なモデル生物の細胞構成について貴重な洞察を提供しているんだ。さまざまな細胞タイプを特定し、それをショウジョウバエの既知の細胞タイプと結びつけることで、研究者たちは環境の変化や薬物の影響、老化が細胞の振る舞いに与える影響を探るための基盤を築いたんだ。ダフニアのユニークな特性と適応力は、より広い生態学的および生物学的な質問を理解するために必要な種となっていて、この分野でのさらなる研究の重要性を強調しているんだ。

オリジナルソース

タイトル: Single Cell Transcriptome Defines Cell Type Repertoire of Adult Daphnia magna.

概要: Detailed knowledge of transcriptional responses to environmental and developmental cues is impossible without single cell (SC) resolution data. We performed two SC RNAseq experiments surveying transcriptional profiles of females and males of D. magna, a freshwater plankton crustacean which is both a classic and emerging new model for eco-physiology, toxicology, and evolutionary genomics. We were able to identify over 30 distinct cell types about half of which could be functionally annotated. First, we identified ovaries- and testis-related cell types by focusing on female- and male-specific clusters. Second, we compared markers between SC clusters and bulk RNAseq data on transcriptional profiles of early embryos, circulating hemocytes, midgut, heads (containing brain, eyes, muscles and hepatic caeca), antennae II, and carapace. Finally, we compared transcriptional profiles of Daphnia cell clusters with orthologous markers of 250+ cell types annotated in Drosophila cell atlas. This allowed us to recognize striated muscle cells, gut enterocytes, cuticular cells, as well as 5 different neuron types, including photoreceptors and 3 ovaries-related clusters, one of which tentatively identified as the germ line cells. One well-defined cluster showed a significant enrichment in markers of both hemocytes and fat body of Drosophila, but not with bulk RNAseq data from circulating hemocytes, allowing us to hypothesize the existence of non-circulating, fat body-associated population of hemocytes in Daphnia. On the other hand, the circulating hemocytes express numerous cuticular proteins suggesting their role, in addition to macrophagy, in wound repair. At the same time numerous cell types remain unidentified, including those that map to FCA groups ambiguously or are characterized by Daphnia-specific markers with no clear orthology in the fruitfly. Likewise, many known or presumed cell types or tissues in Daphnia have not been identified to SC clusters. A detailed in-situ hybridization study would be necessary to match not yet annotated SC clusters to functional cell groups. HighlightsO_LIFirst single-cell transcriptomic atlas for Daphnia magna, identifies > 30 distinct cell types. C_LIO_LINovel cell type representing circulating hemocytes may play a role in cuticle regeneration. C_LIO_LIEvidence for non-circulating hemocyte-like cells associated with the fat body in Daphnia. C_LIO_LICuticle/epithelial cells expressing photoreceptors, suggesting light-sensing capabilities. C_LIO_LISubfunctionalization of divergent paralogs across cell types for ecological versatility. C_LI

著者: Leonid Peshkin, I. Krishnan, L. Y. Yampolsky, K. Petrova

最終更新: 2024-05-30 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.29.596540

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.29.596540.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

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