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# 生物学# 薬理学と毒性学

アスペルギルス・フラバスにおけるSntBの役割を探る

この研究は、SntBがアスペルギルス・フラヴスの成長と毒素生成にどう影響するかを調べてるよ。

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目次

アスペルギルス・フラバスは、土壌、空気、水、植物、作物などいろんな場所に見られる一般的な菌なんだ。健康に問題を引き起こす可能性があって、アフラトキシンという非常に毒性のある物質を生成するからね。これらの毒素の中でも、AFB1が最も危険で深刻な病気を引き起こす可能性があるんだ。研究によると、世界中の食料作物の約25%がこれらの毒素に汚染されていて、特に穀物、ナッツ、スパイスが多いんだ。だから、A.フラバスとその毒素を制御することがすごく大事なんだよ。

アフラトキシンの生成

研究者たちは何年もかけて、A.フラバスがアフラトキシンをどうやって作るかを調べてきたんだ。このプロセスは、特定の酵素によって駆動される一連の化学反応が関与しているんだよ。これらの酵素は、その機能を調整する遺伝子によって制御されているんだ。一つの重要な段階は、ポリケチドシンターゼという特別な酵素から始まるんだ。酸性度、光、栄養素などのさまざまな環境要因もアフラトキシンの生成に影響を与えるんだ。

化学プロセスや遺伝子調節に加えて、もう一つ重要な側面は、タンパク質が作られた後にどう修飾されるかってことなんだ。これはアフラトキシンの生成量に大きく影響する可能性があるんだよ。その中の一つのタンパク質、Snt2は、この調節において重要な役割を果たしているんだ。研究は進んでいるけれど、A.フラバスでアフラトキシンがどうやって生成されるかの理解はまだ不完全なんだ。

SntBの役割

SntBタンパク質は、他の菌種の別の毒素であるステリグマトシスチンに関連する遺伝子を制御するのに役立つことがわかっているんだ。A.フラバスでは、SntBを作る遺伝子を削除するとアフラトキシンの生成が止まり、他の成長プロセスにも影響を与えるんだ。同様に、SntBは他の菌でも重要で、ストレスに反応したり成長を調整したりするのを助けているんだ。

でも、A.フラバスにおけるSntBの具体的な役割はまだあまりはっきりしていないんだ。この研究では、遺伝子活性とタンパク質結合の両方を調べる進んだ技術を使って、SntBがこの菌の生物学にどう影響を与えるかを探ることにしたんだ。

材料と方法

実験を行うために、遺伝学的研究のための特定のA.フラバス系統を使用したんだ。これらの系統をさまざまな食物培地で育てて、その成長や毒素生成を調べたよ。SntB遺伝子の変化が菌にどう影響するかを見るために、いろんな変異体系統を作ったんだ。これらの系統は、適切に構築されたことを確認するために慎重にテストされたんだ。

また、この菌が作物や動物に感染する方法を調べるために、特にピーナッツやトウモロコシの種子、そして蚕を見たよ。さまざまな菌株を蚕に注入して、生存率や菌が生成する毒素の量を測定できたんだ。さらに、先進的なシーケンシング技術を使って、これらの系統での遺伝子活性を分析したよ。

成長と毒素生成

異なる菌株を分析したところ、SntB遺伝子を削除すると、成長速度、胞子の生成、アフラトキシンのレベルが大幅に減少したんだ。でも、この削除を補完して(SntB遺伝子を再導入すると)、系統はこれらの分野で改善が見られたんだ。私たちの発見は特に、SntBが成長と毒素生成に責任がある重要な遺伝子を調整していることを強調しているんだ。

菌のコロナイゼーション

菌が植物にどれだけうまく感染できるかを調べるために、ピーナッツやトウモロコシの種子を使用したんだ。SntBがない系統は、これらの種子での胞子生成が大幅に低下して、アフラトキシンを全く生成できなかったんだ。一方、SntBがある系統は、種子に感染して毒素を効果的に生成することができたんだ。

SntBが動物に感染する能力にどう影響するかもテストしたよ。SntBがない菌株を注入した蚕は、野生型の菌株を注入された蚕よりも生存率が高かったんだ。これは、SntBがこの菌の病気を引き起こす能力に重要な役割を果たしていることを示しているんだ。

遺伝子発現分析

SntBの役割をより深く理解するために、SntBのある系統とない系統の遺伝子発現パターンを見たよ。SntBが不在のときにオンまたはオフになる遺伝子を何千も特定したんだ。これらの遺伝子の中には、酸化ストレスや毒素生成に直接関係しているものがあって、SntBが正常な細胞機能を維持するのに重要だってことがわかったんだ。

クロマチン結合研究

SntBがA.フラバスのDNAにどこに結合するかを見るために、結合研究も行ったよ。これらの結合部位を調べたところ、SntBは主に成長と毒素生成に関連する遺伝子の近くの領域に結合していることがわかったんだ。この結合は、これらの遺伝子の活性を調整して、適切な菌の成長を確保するのに不可欠なんだ。

酸化ストレス応答

SntBは、A.フラバスが酸化ストレスにどう反応するかにも役割を果たすことがわかったんだ。SntB遺伝子を削除すると、菌はストレスに対して敏感になり、反応性酸素種(ROS)がより高いレベルで蓄積されたんだ。この蓄積は菌の成長と毒素生成に悪影響を与えたんだ。

メカニズムを調べる中で、有害な過酸化水素を分解するのを助けるカタラーゼ遺伝子(CatC)にも注目したよ。SntBがないと、CatCの発現が変わって、菌が酸化ストレスに対処する能力に影響を与えたんだ。これらの発見は、SntBが酸化ストレス応答を調整するのを助けていることを示唆していて、これがA.フラバスが厳しい環境で生き残るために重要なんだ。

結論

この研究は、アスペルギルス・フラバスにおけるSntBタンパク質の多面的な役割を強調しているんだ。成長と毒素生成を調整するだけでなく、酸化ストレスに対処するのを助けているんだ。SntBの機能を明らかにすることで、この病原菌の生物学への洞察が得られて、毒素生成の制御におけるその重要性が強調されているんだ。これらのメカニズムを理解することで、A.フラバスを管理して、食の安全や健康への影響を減らすためのより効果的な戦略につながるかもしれないね。

オリジナルソース

タイトル: SntB triggers the antioxidant pathways to regulate development and aflatoxin biosynthesis in Aspergillus flavus

概要: The epigenetic reader SntB was identified as an important transcriptional regulator of growth, development, and secondary metabolite synthesis in Aspergillus flavus. However, the underlying molecular mechanism is still unclear. In this study, sntB gene deletion ({Delta}sntB), complementary (Com-sntB), and HA tag fused to sntB (sntB-HA) strains were constructed by using the homologous recombination method, respectively. Our results revealed that deletion of sntB inhibited the processes of mycelia growth, conidial production, sclerotia formation, aflatoxin synthesis, and ability to colonize host, and the defective phenotype of knockout strain {Delta}sntB could be restored in its complementary strain Com-sntB. Chromatin immunoprecipitation sequencing (ChIP-seq) of sntB-HA and WT, and RNA sequencing (RNA-seq) of {Delta}sntB and WT strains revealed that SntB played key roles in oxidative stress response of A. flavus. The function of catC gene (encode a catalase) was further analyzed based on the integration results of ChIP-seq and RNA-seq. In {Delta}sntB strain, the relative expression level of catC was significantly higher than in WT strain, while a secretory lipase encoding gene (G4B84_008359) was down-regulated. Under the stress of oxidant menadione sodium bisulfite (MSB), the deletion of sntB obvious down-regulated the expression level of catC. After deletion of catC gene, the mycelia growth, conidial production, and sclerotia formation were inhibited, while ROS level and aflatoxin production were increased compared to the WT strain. Results also showed that the inhibition rate of MSB to {Delta}catC strain was significantly lower than that of WT group and AFB1 yield of the {Delta}catC strain was significantly decreased than that of WT strain under the stress of MSB. Our study revealed the potential machinery that SntB regulated fungal morphogenesis, mycotoxin anabolism, and fungal virulence through the axle of from SntB to fungal virulence and mycotoxin bio-synthesis, i.e. H3K36me3 modification-SntB-Peroxisomes-Lipid hydrolysis-fungal virulence and mycotoxin bio-synthesis. The results of this study shed light into the SntB mediated transcript regulation pathways of fungal mycotoxin anabolism and virulence, which provided potential strategy for control the contamination of A. flavus and its aflatoxins.

著者: Zhenhong Zhuang, D. Wu, C. Yang, Y. Yao, D. Ma, H. Lin, L. Hao, W. Xin, K. Ye, M. Sun, Y. Hu, Y. Yang

最終更新: 2024-07-02 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.12.19.572357

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.12.19.572357.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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