血球形成に関する新しい知見
研究が、人工的に作られた血液形成細胞を改善する方法を明らかにした。
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目次
血液細胞が体内で形成されるプロセスは、妊娠初期から始まることが知られてるよ。これはいくつかのステージを経て、特定の細胞が体のいろんな部分に現れて、血液形成細胞が作られるんだ。胚の中でこれらの細胞がどのように発展するかを理解するのは大事で、科学者たちが他のタイプの細胞からそれを実験室で作ろうとする手助けになるからね。でも、血液形成細胞を作るための正確なシグナルやステップはまだはっきりしてないから、体の外でこのプロセスを再現するのは難しいんだ。
血液形成細胞の発展
発展の初期段階では、内皮細胞と呼ばれる特定の細胞が血液形成細胞の生成に重要な役割を果たすんだ。この内皮細胞は、内皮から造血細胞への移行(EHT)というプロセスを通じて血液形成細胞に変わることができるよ。この移行中に、内皮細胞は内部のプログラミングを変えていって、内皮細胞特有の遺伝子の発現が徐々に減少し、血液細胞を形成するために必要な遺伝子が活性化されるんだ。最終的には、これらの修正された細胞が元のグループから離れて、血流に入っていくんだ。
インビトロとインビボの細胞の比較
これらの血液形成細胞の発展についてもっと知るために、科学者たちは実験を行って、実験室で作られた細胞(インビトロ)と妊娠中に自然に発生する細胞(インビボ)を比較したんだ。彼らはシングルセルRNAシーケンシングという技術を使って、これらの異なる細胞タイプの行動を分析・比較したよ。この分析を通じて、実験室で作られた細胞では、人間の体からの細胞に比べてあまり活性でないいくつかの重要な遺伝子が特定されたんだ。これらの遺伝子が血液形成細胞の発展にどのように影響するかを理解するために、研究者たちは実験室で育てた細胞の特定の遺伝子をオンにできる新しいシステムを開発したよ。
遺伝子活性化システム
この革新的なシステムは、特定の化学物質であるドキシサイクリン(DOX)が追加されたときに活性化されるように設計されたんだ。このシステムを使うことで、科学者たちは実験室で育てた細胞では低いレベルで発現している遺伝子を活性化できるんだ。これにより、細胞の成長や機能にこれらの変化がどう影響するかを観察できるようになるよ。例えば、IGFBP2という名前の遺伝子が、実験室での血液形成細胞の発展を促進する重要な役割を果たすことがわかったんだ。
転写因子の分析
研究者たちは、実験室で育てた細胞と人間の体からの細胞の間で、特定の転写因子(遺伝子の活動を制御する蛋白質)の発現レベルを比較したよ。彼らは、二つのグループ間で異なる発現レベルを持つ9つの転写因子を特定したんだ。これには、血液形成を助けることが知られている因子や、これまでこのプロセスに関連付けられていなかった因子も含まれていたよ。これらの因子の違いを理解することで、血液細胞がどのように形成されるかについて新しい洞察が得られるかもしれないんだ。
IGFBP2の役割
IGFBP2は、この研究で重要な発見として取り上げられたよ。IGFBP2を実験室で育てた細胞に加えると、血液形成細胞の数が増えたことが観察されたんだ。IGFBP2は体内の他の蛋白質と相互作用することが知られていて、細胞同士のコミュニケーションに影響を与えるかもしれない。このことは、IGFBP2が血液形成細胞の成長や機能をサポートするシグナル分子として働く可能性があることを示唆しているよ。
IGFBP2が細胞の挙動に与える影響
研究者たちがラボでIGFBP2が細胞の挙動に与える影響を調べたところ、IGFBP2を加えることで血液形成コロニーの成長を促進することができることがわかったんだ。ただし、動脈細胞の存在に大きな変化をもたらさなかったことから、IGFBP2は主に血液形成細胞の生産に影響を与えるのかもしれないね。
IGFBP2による代謝の変化
さらに、IGFBP2は実験室で育てた幹細胞由来の内皮細胞の代謝に影響を与えることが示されたよ。IGFBP2を加えた後、研究者たちは細胞がエネルギー生産プロセスに変化の兆候を示すことに気づいたんだ。酸素の使用が増加し、糖分解によるエネルギー生産が減少したんだ。これは、IGFBP2がこれらの細胞がエネルギーを生成する方法を変えていることを示唆していて、糖の分解から酸素を利用したエネルギー生産に移行しているんだ。
発見の重要性
この発見は、体内で自然に発展する血液形成細胞と、実験室で作られた細胞との間に重要な違いがあることを示してるよ。この研究は、特定の遺伝子をオンにしてこれらの細胞の挙動を変える方法を示しているんだ。特定の遺伝子や経路を特定して活性化することで、科学者たちはインビトロでの血液形成細胞の生産を強化できるかもしれない。
将来への影響
この研究は、他の種類の細胞から実験室で血液形成細胞を効果的に作る方法を理解するための道筋を提供しているんだ。これは、血液疾患の治療や輸血の準備といった医療用途のために、より良い戦略を開発する可能性を開くよ。
結論
要するに、この研究は血液細胞の発展の複雑なメカニズムと、それを実験室で操作する可能性を示しているんだ。IGFBP2のような重要なシグナル分子や血液形成に関与する転写因子の役割をさらに探求することで、研究者たちは血液形成細胞を生成するアプローチを磨いていけるかもしれない。この進展は、将来的に再生医療や移植療法において大きな進歩につながるかもしれないよ。
タイトル: A novel human pluripotent stem cell-based gene activation system identifies IGFBP2 as a mediator in the production of hematopoietic progenitors in vitro
概要: A major challenge in the stem cell biology field is the ability to produce fully functional cells from induced pluripotent stem cells (iPSCs) that are a valuable resource for cell therapy, drug screening and disease modelling. Here we developed a novel inducible CRISPR-mediated activation strategy (iCRISPRa) to drive the expression of multiple endogenous transcription factors important for in vitro cell fate and differentiation of iPSCs to haematopoietic progenitor cells. This work has identified a key role for IGFBP2 in the development of hematopoietic progenitors. We first identified nine candidate transcription factors that we predicted to be involved in blood cell emergence during development, then generated tagged gRNAs directed to the transcriptional start site of these transcription factors that could also be detected during scRNAseq. iCRISPRa activation of these endogenous transcription factors resulted in a significant expansion of arterial-fated endothelial cells expressing high levels of IGFBP2 and our analysis indicated that IGFBP2 is involved in the remodeling of metabolic activity during in vitro endothelial to hematopoietic transition. As well as providing fundamental new insights into the mechanisms of haematopoietic cell fate and differentiation, the broader applicability of iCRISPRa provides a valuable tool for studying dynamic processes controlling developmental events and for recapitulating abnormal phenotypes characterised by ectopic activation of specific endogenous gene expression in a wide range of systems.
著者: Antonella Fidanza, P. Petazzi, T. Ventura, F. P. Luongo, H. McClafferty, A. May, H. A. Taylor, M. Shipston, N. Romano, L. Forrester, P. Menendez
最終更新: 2024-10-10 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.14.575573
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.14.575573.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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