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Comprendere la resistenza del pomodoro ai patogeni fungini

Esplorando come i pomodori si difendono contro il Cladosporium fulvum attraverso geni di resistenza.

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I patogeni fungini possono causare gravi malattie nelle piante, portando a perdite di raccolti e danni economici. Uno di questi patogeni è il Cladosporium fulvum, che provoca la malattia della muffa fogliare nei pomodori. Per proteggersi, le piante hanno sviluppato geni di resistenza. Questi geni sono come sistemi di difesa che aiutano le piante a riconoscere e rispondere ai patogeni.

Tipi di Geni di Resistenza

La maggior parte dei geni di resistenza nelle piante appartiene a una classe chiamata recettori simili a oligomerizzazione leganti nucleotide (NLRs). Tuttavia, nei pomodori, tutti i geni di resistenza conosciuti contro il Cladosporium fulvum codificano per proteine di superficie cellulare conosciute come proteine simili ai recettori (RLPs). Queste proteine hanno strutture speciali chiamate ripetizioni ricche di leucina che le aiutano a rilevare i patogeni.

Un gene R importante si chiama Cf-2. Questo gene è stato trasferito da una specie di pomodoro selvatico nota come pomodoro ribes nei pomodori coltivati. Quando Cf-2 è presente, i pomodori possono riconoscere una parte specifica del patogeno Cladosporium fulvum chiamata Avr2. Questo riconoscimento innesca una risposta in cui le cellule vegetali colpite subiscono morte cellulare programmata per fermare la diffusione del patogeno.

Il Ruolo di Rcr3 nella Resistenza dei Pomodori

Affinché il gene Cf-2 funzioni correttamente, ha bisogno di un'altra proteina chiamata Rcr3. Questa proteina agisce come un tipo di aiuto, conosciuto come proteasi cisteinica simile alla papaina. Queste proteasi scompongono le proteine in un modo specifico, aiutando la risposta immunitaria della pianta.

Rcr3 è prodotto in una forma inattiva e richiede un segnale per diventare attivo. Una volta attivato, aiuta a innescare la Risposta ipersensibile (HR) quando interagisce con Avr2 e Cf-2.

Come Avr2 Influenza Rcr3

Avr2 si attacca direttamente a Rcr3 e ne impedisce l'attivazione. Fa questo inibendo Rcr3 maturo ma non lo scompone. È interessante notare che i pomodori con Cf-2 ma privi di Rcr3 non mostrano segni anomali, suggerendo che il ruolo principale di Rcr3 non sia quello di essere un bersaglio ma piuttosto un diversivo che aiuta a riconoscere il patogeno.

Studi ulteriori hanno dimostrato che quando Avr2 inibisce Rcr3, aumenta la probabilità di innescare la risposta ipersensibile, che è cruciale per l'immunità delle piante.

L'Ipotesi della Guardia

Questo concetto si allinea con l'ipotesi della guardia nell'immunità delle piante, che suggerisce che le proteine di resistenza "guardano" le proteine che i patogeni tentano di manipolare, piuttosto che i patogeni stessi. In questo caso, Cf-2 protegge Rcr3 dall'essere influenzato da Avr2. Inoltre, Rcr3 è correlato a un'altra proteina chiamata Pip1, che condivide uno sfondo genetico simile ma ha funzioni distinte.

Evoluzione di Rcr3 e Pip1

La ricerca indica che Rcr3 e Pip1 si sono sviluppati più di 50 milioni di anni fa, mentre il gene Cf-2 è apparso solo circa 8 milioni di anni fa. Questa linea temporale evolutiva suggerisce che Cf-2 si è evoluto per utilizzare proteine esistenti come Rcr3 per la rilevazione dei patogeni.

Esistono vari omologhi di Rcr3 in specie vegetali correlate, ma solo quelli nel genere Solanum possono attivare la via Cf-2. Questo indica un adattamento specifico nelle piante da frutto come i pomodori per migliorare la loro difesa contro il Cladosporium fulvum.

Indagare Rcr3 e Pseudomonas syringae

Per comprendere meglio i dettagli su come Rcr3 inneschi la risposta immunitaria, i ricercatori hanno iniziato a testare diverse versioni di Rcr3 provenienti da varie piante. Modificando alcuni amminoacidi, che sono i mattoni delle proteine, sono riusciti a determinare quali parti specifiche di Rcr3 sono necessarie per attivare la risposta di difesa.

Una scoperta significativa è stata che un singolo cambiamento in Rcr3 di melanzana, scambiando un amminoacido con un altro, poteva permettere a questa versione di attivare la stessa risposta nei pomodori come il Rcr3 nativo. Questa forma più semplice di Rcr3 ha comunque mantenuto la sua capacità di interagire sia con Avr2 che con Cf-2, dimostrando come una singola mutazione possa avere un impatto sostanziale.

Parentela Distanziata: Nicotiana Rcr3

Esperimenti simili sono stati condotti con omologhi di Rcr3 trovati in specie di Nicotiana, come il tabacco. I ricercatori hanno scoperto che queste versioni non erano in grado di innescare la risposta immunitaria a causa delle differenze nella loro struttura. Tuttavia, modificando amminoacidi chiave, gli scienziati potevano far interagire meglio queste proteasi di Nicotiana con Avr2 e Cf-2, innescando così la risposta immunitaria in modo efficace.

Il Ruolo di Pip1 nell'Immunità dei Pomodori

Pip1 è un'altra proteasi importante che è abbondante e cruciale per l'immunità dei pomodori. È stato dimostrato che è influenzato da Avr2, ma non attiva la stessa risposta immunitaria di Rcr3. Progettando Pip1 per includere parti di Rcr3, gli scienziati potrebbero creare ibridi che non solo interagissero con Avr2 ma che innescassero anche la risposta ipersensibile.

In una serie di esperimenti, sono state testate varie combinazioni di Rcr3 e Pip1. Remarkably, alcuni ibridi potevano indurre la risposta di difesa, sottolineando la fascinazione di come le proteine possano adattarsi ed essere progettate per migliori meccanismi di difesa.

Progressi nella Bioingegneria per la Protezione delle Piante

Questi risultati sono entusiasmanti perché pongono le basi per la bioingegneria delle piante per migliorare le loro risposte immunitarie innate. Utilizzando la conoscenza di Rcr3 e Pip1, gli scienziati possono potenzialmente creare varietà di pomodoro che siano meglio attrezzate per difendersi da patogeni come il Cladosporium fulvum e altre minacce.

Un'idea particolarmente innovativa è quella di ingegnerizzare nuove versioni di Rcr3 o Pip1 in grado di riconoscere diversi patogeni. Dati i loro ruoli nell'immunità vegetale, queste proteine ingegnerizzate potrebbero fungere da difese potenti contro vari parassiti e malattie, riducendo al minimo la necessità di pesticidi chimici.

Importanza di Studiare i Meccanismi di Resistenza

Capire come i pomodori e altre piante rilevano e rispondono ai patogeni fungini è essenziale per le pratiche agricole. Può portare a raccolti migliorati e metodi di agricoltura più sostenibili. Con il cambiamento climatico e il commercio globale che continuano a esporre le colture a nuove malattie, migliorare l'immunità delle piante attraverso la bioingegneria diventerà probabilmente sempre più importante.

Direzioni Future

Il futuro della protezione delle piante risiede nell'utilizzo della genetica insieme a tecniche di allevamento. I ricercatori non solo cercano di migliorare le caratteristiche di resistenza esistenti, ma esplorano anche come le piante evolvano naturalmente le loro difese. Le lezioni apprese da Rcr3 e Pip1 offrono una mappa per lo sviluppo di geni di resistenza sintetici.

Conclusione

L'immunità delle piante, specialmente in colture come i pomodori, è un'interazione complessa tra genetica ed evoluzione. Studiando proteine come Rcr3 e Pip1, i ricercatori possono sviluppare modi innovativi per proteggere le colture dai patogeni fungini. Questo potrebbe portare a piante più sane e fattorie più produttive, garantendo la sicurezza alimentare mentre affrontiamo sfide agricole in corso.

Fonte originale

Titolo: Bioengineering secreted proteases converts divergent Rcr3 orthologs and paralogs into extracellular immune co-receptors

Estratto: Secreted immune proteases Rcr3 and Pip1 of tomato are both inhibited by Avr2 from the fungal plant pathogen Cladosporium fulvum but only Rcr3 act as a decoy co-receptor that detects Avr2 in the presence of the Cf-2 immune receptor. Here, we identified crucial residues from tomato Rcr3 required for Cf-2-mediated signalling and bioengineered various proteases to trigger Avr2/Cf-2 dependent immunity. Despite substantial divergences in Rcr3 orthologs from eggplant and tobacco, only minimal alterations were sufficient to trigger Avr2/Cf-2-triggered immune signalling. Tomato Pip1, by contrast, was bioengineered with 16 Rcr3-specific residues to initiate Avr2/Cf-2-triggered immune signalling. These residues cluster on one side next to the substrate binding groove, indicating a potential Cf-2 interaction site. Our findings also revealed that Rcr3 and Pip1 have distinct substrate preferences determined by two variant residues and that both are suboptimal for binding Avr2. This study advances our understanding of Avr2 perception and opens avenues to bioengineer proteases to broaden pathogen recognition in other crops.

Autori: Renier A. L. van der Hoorn, J. Kourelis, M. Schuster, F. Demir, O. Mattinson, S. Krauter, P. S. Kahlon, R. O'Grady, S. Royston, A. L. Bravo-Cazar, B. C. Mooney, P. F. Huesgen, S. Kamoun

Ultimo aggiornamento: 2024-05-23 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.14.580413

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.14.580413.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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