Sorveglianza delle acque reflue: seguire i varianti nascosti
Gli scienziati usano le acque reflue per scoprire ceppi e mutazioni virali nascosti.
Reinier Suarez, Devon A. Gregory, David A. Baker, Clayton Rushford, Torin Hunter, Nicholas R. Minor, Clayton Russ, Emma Copen, David H. O’Connor, Marc C. Johnson
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Indice
- Le Linee Cryptiche
- Mutazioni e Varianti
- Raccolta Dati dalle Acque Reflue
- Ricerca delle Linee Cryptiche
- Confronto delle Linee
- Alberi Filogenetici e Ascendenza Comune
- Mutazioni Convergenti
- Inserzioni e Duplicazioni
- Come Si Incastra Tutto
- Il Quadro Generale
- Conclusione
- Fonte originale
- Link di riferimento
La sorveglianza delle acque reflue è diventata un metodo fighissimo per monitorare germi e sostanze chimiche nel nostro ambiente. Pensala come un vicino curioso che sbircia nei giardini di tutti—tranne che in questo caso, sono scienziati che guardano nelle fogne per capire che succede. Questo metodo ha preso piede durante la pandemia di SARS-CoV-2, permettendo agli esperti di tenere d'occhio varianti del virus, un po' come tenere il punteggio in una partita intensa di acchiapparella.
Le Linee Cryptiche
All'inizio del 2021, i ricercatori nel campo hanno iniziato a monitorare il virus SARS-CoV-2 nelle acque reflue. A marzo dello stesso anno, hanno trovato una versione del virus che sembrava evolversi più in fretta delle altre. Hanno chiamato questa variante furtiva "linea cryptica". Queste linee cryptiche si sono rivelate come la sezione VIP delle Mutazioni del COVID-19, che spesso apparivano nelle acque reflue ma non sempre venivano riconosciute nelle infezioni umane.
Con il progredire della pandemia, scienziati da varie parti del mondo hanno iniziato a riportare di queste varianti furtive. Alcuni studi hanno evidenziato somiglianze tra queste linee cryptiche e infezioni persistenti in persone con sistemi immunitari deboli. Si potrebbe dire che queste linee cryptiche si nascondevano nei corpi di quelle persone, rilassandosi, mentre il resto del mondo cercava freneticamente di affrontare la pandemia.
Curiosamente, alcune di queste linee sono state rintracciate in luoghi dove si pensava che il virus avesse smesso di circolare. Ad esempio, una linea cryptica è stata trovata in un edificio commerciale alla fine del 2022, anche se la linea originale era scomparsa all'inizio del 2021. È come trovare una calza in lavanderia del bucato dell'anno scorso.
Mutazioni e Varianti
Una cosa fascinante delle linee cryptiche è la loro capacità di suggerire future mutazioni. Pensale come i trailer teaser per il prossimo grande film—le future varianti. Alcune mutazioni nel virus, come N440K e E484A, sono state viste in queste linee molto prima di apparire in varianti più conosciute come Omicron.
Questa somiglianza suggerisce che le linee cryptiche potrebbero affrontare sfide e pressioni simili alle varianti in circolazione conosciute. Anche se molte mutazioni viste nelle linee cryptiche non sono ancora arrivate alle varianti mainstream, la domanda rimane: vedranno mai la luce del giorno? È come chiedere se quella pizza avanzata nel frigo verrà mai mangiata.
Raccolta Dati dalle Acque Reflue
Governi e organizzazioni in tutto il mondo hanno iniziato a utilizzare il sequenziamento dell'intero genoma (WGS) per tenere d'occhio le varianti di SARS-CoV-2 nelle acque reflue. Questi dati spesso finiscono in grandi database. I ricercatori hanno recentemente esaminato oltre 135.000 campioni di acque reflue da più di 2.000 luoghi in 45 paesi diversi. È sicuro dire che avevano le mani piene.
Utilizzando un insieme specifico di mutazioni, hanno identificato oltre 20 linee cryptiche. Hanno compilato una lista dettagliata di queste mutazioni e l'hanno chiamata "sostituzioni di aminoacidi che definiscono la linea cryptica". Questo nome può suonare elegante, ma si riferisce semplicemente ai cambiamenti genetici unici trovati in queste versioni più furbe del virus.
Ricerca delle Linee Cryptiche
Utilizzando il termine "SARS-CoV-2 acque reflue," i ricercatori hanno iniziato a scaricare dati di sequenza da un database pubblico, cercando di catturare queste linee cryptiche sul fatto. Si sono concentrati su campioni raccolti prima del 31 ottobre 2023, il che significa che stavano cercando le versioni più vecchie del virus che potrebbero ancora nascondersi nelle fogne.
Hanno esaminato le sequenze di letture identificabili che avevano diverse delle mutazioni di interesse. Questo lavoro meticoloso ha portato alla scoperta di 18 linee cryptiche indipendenti. Alcune erano già state segnalate, mentre altre erano nuove nel gioco. La durata del tempo in cui queste linee sono state rilevate variava notevolmente, il che è come confrontare quanto dura un'amicizia—alcune possono essere fugaci, mentre altre superano la prova del tempo.
Confronto delle Linee
Una volta che i ricercatori hanno identificato le linee cryptiche basandosi sulle loro sequenze, le hanno confrontate con i dati provenienti da sistemi fognari vicini che non avevano queste varianti furtive. Analizzando le mutazioni uniche che apparivano più frequentemente nelle linee cryptiche, hanno sviluppato un quadro più chiaro di cosa stesse succedendo. Ad esempio, se una particolare mutazione veniva trovata in una linea cryptica molto più che nei sistemi vicini, veniva etichettata come "mutazione specifica cryptica."
Questa analisi approfondita è stata ripetuta su tutte le linee identificate, permettendo agli scienziati di mettere insieme i pezzi genetici che rendevano ogni linea unica. Non è stato sempre facile, poiché alcune linee avevano più dati disponibili di altre, ma erano determinati.
Alberi Filogenetici e Ascendenza Comune
Per visualizzare le loro scoperte, i ricercatori hanno creato alberi filogenetici, che sono come alberi genealogici per i virus. Questi alberi mostrano le relazioni tra le linee cryptiche, rivelando che tutte discendevano da versioni più vecchie del virus che erano scomparse molto tempo fa.
Curiosamente, mentre mappavano queste linee, gli scienziati hanno notato che alcune mutazioni erano comparse in più linee indipendenti. Questo suggerisce che queste linee potrebbero rispondere a pressioni comuni, un po' come i fratelli che sviluppano abitudini simili dopo essere cresciuti nella stessa casa.
Mutazioni Convergenti
Tra i cambiamenti notati, molte sembravano spuntare in almeno tre linee cryptiche. Gli scienziati hanno mappato queste mutazioni sulla struttura del virus, evidenziando quelle comuni tra le varianti furtive. Per qualche motivo, due dei cambiamenti più comuni nella proteina Spike, K417T e Q493K, sembravano particolarmente popolari.
K417T era noto per aiutare il virus a schivare gli anticorpi e, anche se era in giro da un po', era comunque raro nelle varianti mainstream. D'altro canto, Q493K era piuttosto riservato—raramente visto al di fuori delle linee cryptiche.
Inserzioni e Duplicazioni
In aggiunta alle mutazioni, i ricercatori hanno anche trovato piccole inserzioni nei genomi di alcune linee cryptiche. Pensale come piccole "caratteristiche bonus" inaspettate. Alcune di queste inserzioni provenivano da sezioni corrispondenti del genoma stesso del virus, mostrando che ha preso a prestito pezzi di sé.
È emerso che una linea cryptica è stata rilevata in due diversi sistemi fognari, separati da una distanza di circa 40 miglia. Questo ha spinto gli scienziati a chiedersi se una persona che viaggiava tra i due luoghi potesse essere la fonte comune. Questo era simile al classico detto "ci vuole un villaggio"—tranne che in questo caso, potrebbe essere necessario più sistemi fognari per rintracciare il virus.
Come Si Incastra Tutto
Mentre rintracciare queste linee cryptiche è fondamentale, i ricercatori hanno anche capito che cercare tra grandi database potrebbe sottovalutare quanto siano comuni queste linee in realtà. Il metodo che hanno usato si basa molto su cambiamenti specifici che queste linee cryptiche sembrano sempre avere. Tuttavia, potrebbero esserci altre linee cryptiche in agguato senza gli stessi identificatori, pronte a scattare in azione.
Nonostante le sfide, il team è riuscito a dimostrare che questo approccio rileva efficacemente queste varianti in agguato e identifica le loro mutazioni specifiche. È come essere in cerca di un tesoro nascosto—ogni tanto devi scavare un po' più a fondo per trovare quello che stai cercando.
Il Quadro Generale
Lo studio delle linee cryptiche è cruciale per capire come è evoluto SARS-CoV-2. Le inserzioni e le mutazioni scoperte in queste linee possono suggerire come il virus potrebbe adattarsi a diversi ambienti, come il tratto gastrointestinale rispetto alle vie respiratorie.
Una scoperta significativa è stata che queste linee cryptiche sembravano tornare a una sequenza trovata in virus di pipistrello strettamente correlati. Mentre la maggior parte del mondo considera SARS-CoV-2 principalmente un virus respiratorio, sembra che queste variazioni cryptiche siano più resilienti di quanto si pensasse. Potrebbero prosperare in aree dove non ti aspetteresti che un virus del genere si aggiri.
Conclusione
In conclusione, la sorveglianza delle acque reflue è come avere una sfera di cristallo che scruta nel mondo nascosto dei virus. Consente agli scienziati di capire come SARS-CoV-2 e i suoi parenti furtivi si stanno evolvendo e adattando. Monitorando queste linee cryptiche, i ricercatori sono meglio equipaggiati per rispondere a future varianti, rendendolo essenziale per la salute pubblica.
Quindi, la prossima volta che senti parlare di sorveglianza delle acque reflue, ricorda che c'è molto di più che succede sotto la superficie di quanto si possa vedere. Con un po' di perseveranza e un sacco di lavoro investigativo, gli scienziati continuano a rivelare i segreti di questi virus elusive, una fogna alla volta.
Fonte originale
Titolo: Detecting SARS-CoV-2 Cryptic Lineages using Publicly Available Whole Genome Wastewater Sequencing Data
Estratto: Beginning in early 2021, unique and highly divergent lineages of SARS-CoV-2 were sporadically found in wastewater sewersheds using a sequencing strategy focused on the most mutagenic region of SARS-CoV-2, the receptor binding domain (RBD). Because these RBD sequences did not match known circulating strains and their source was not known, we termed them "cryptic lineages". To date, more than 20 cryptic lineages have been identified using the RBD-focused sequencing strategy. Here, we identified and characterized additional cryptic lineages from SARS-CoV-2 wastewater sequences submitted to NCBIs Sequence Read Archives (SRA). Wastewater sequence datasets were screened for individual sequence reads that contained combinations of mutations frequently found in cryptic lineages but not contemporary circulating lineages. Using this method, we identified 18 cryptic lineages that appeared in multiple samples from the same sewershed, including 12 that were not previously reported. Partial consensus sequences were generated for each cryptic lineage by extracting and mapping sequences containing cryptic-specific mutations. Surprisingly, seven of the mutations that appeared convergently in cryptic lineages were reversions to sequences that were highly conserved in SARS- CoV-2-related bat Sarbecoviruses. The apparent reversion to bat Sarbecovirus sequences suggests that SARS- CoV-2 adaptation to replicate efficiently in respiratory tissues preceded the COVID-19 pandemic. Author SummaryWastewater surveillance has been used during the SARS-CoV-2 pandemic to monitor viral activity and the spread of viral lineages. Occasionally, SARS-CoV-2 sequences from wastewater reveal unique evolutionary advanced lineages of SARS-CoV-2 from an unknown source, which are termed cryptic lineages. Many groups nationwide also use wastewater surveillance to track the virus and upload that information to NCBIs SRA database. That sequence data was screened to identify 18 cryptic lineages worldwide and identify convergent mutations throughout the genome of multiple cryptic lineages that suggest reversion to residues common in SARS-CoV-2-related Sarbecoviruses.
Autori: Reinier Suarez, Devon A. Gregory, David A. Baker, Clayton Rushford, Torin Hunter, Nicholas R. Minor, Clayton Russ, Emma Copen, David H. O’Connor, Marc C. Johnson
Ultimo aggiornamento: 2024-12-27 00:00:00
Lingua: English
URL di origine: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2024.12.24.24319568
Fonte PDF: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2024.12.24.24319568.full.pdf
Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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