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Nouvelles Perspectives sur la Fixation de l'Azote dans les Océans

Des recherches montrent qu'il existe plein d'organismes fixateurs d'azote et qu'ils sont super importants pour l'écosystème marin.

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L'azote est un élément vital pour la vie. Dans les océans, environ 70 % du nouvel azote provient d'un processus appelé Fixation de l'azote. C'est quand le gaz azoté (N2) dans l'atmosphère est transformé en ammoniac (NH3), qui est utile pour les organismes vivants. Ce processus est crucial dans les zones de l'océan où l'azote est limité. Pendant des milliers d'années, la fixation de l'azote aide à remplacer l'azote perdu par d'autres processus, garantissant un équilibre dans l'écosystème marin.

Qui effectue la fixation de l'azote ?

Jusqu'à récemment, on pensait que seuls certains types de micro-organismes appelés procaryotes pouvaient fixer l'azote. Cependant, de nouvelles découvertes montrent qu'une algue marine spécifique, connue sous le nom de Braarudosphaera bigelowii, a également la capacité de fixer l'azote grâce à un organite spécial qu'elle contient. Cette découverte suggère que la fixation de l'azote pourrait être plus diversifiée que ce que l'on pensait auparavant.

Les micro-organismes capables de fixer l'azote sont appelés Diazotrophes. Ils peuvent être divisés en deux grandes catégories : les diazotrophes cyanobactériens, qui sont liés aux cyanobactéries, et les diazotrophes non cyanobactériens (NCD). Les diazotrophes cyanobactériens ont traditionnellement été considérés comme les principaux acteurs de la fixation de l'azote dans les océans. Cependant, les NCD ont été largement découverts dans les eaux marines et sont considérés comme diversifiés, montrant des connexions avec divers micro-organismes, y compris des groupes comme les Protéobactéries et les Firmicutes. Bien qu'ils soient connus pour exister, on sait moins de choses sur leur rôle dans l'océan mondial et combien d'azote ils fixent.

Défis dans l'étude des diazotrophes

Les diazotrophes représentent souvent une petite partie de la communauté microbienne océanique globale, ce qui les rend difficiles à étudier. Beaucoup de ces micro-organismes n'ont pas de caractéristiques distinctives qui peuvent être facilement observées au microscope. De plus, de nombreux diazotrophes marins ne peuvent pas être cultivés en laboratoire, donc les scientifiques utilisent des techniques avancées, comme la PCR, pour analyser leur ADN sans avoir besoin de les cultiver.

Un gène qui est souvent étudié est le gène nifH. Ce gène est important car il est impliqué dans le processus de fixation de l'azote. Il permet aux scientifiques d'apprendre sur la présence de micro-organismes fixateurs d'azote dans les écosystèmes marins à travers diverses méthodologies.

Lacunes de connaissances actuelles

Bien qu'il soit clair que la fixation de l'azote dans l'océan est importante, il reste encore de nombreux inconnues. La recherche montre que le Séquençage à haut débit (HTS) des gènes nifH améliore notre compréhension de la diversité et de l'activité des micro-organismes fixateurs d'azote. Malheureusement, les logiciels et méthodes utilisés dans différentes études diffèrent souvent, ce qui rend difficile la comparaison des résultats. De nombreuses études se concentrent également principalement sur les diazotrophes cyanobactériens, accordant moins d'attention aux NCD, ce qui se traduit par une connaissance limitée de leur distribution et de leur écologie.

Pour aborder ces problèmes, les chercheurs ont rassemblé des ensembles de données HTS publiées et appliqué un nouveau flux de travail d'analyse conçu pour intégrer de nombreux grands ensembles de données. Ce flux de travail aide à aligner et à standardiser les données entre plusieurs études, rendant plus facile l'analyse complète des micro-organismes fixateurs d'azote.

Aperçu du nouveau flux de travail

Le flux de travail développé comprend deux parties principales : le pipeline DADA2 nifH et des étapes supplémentaires pour traiter les données. La première étape implique le pipeline DADA2, qui traite les données de séquençage brutes. Après cela, plusieurs étapes garantissent des données de haute qualité et bien annotées. Le flux de travail aide non seulement à identifier les micro-organismes fixateurs d'azote, mais compile également des données environnementales précieuses qui aident les chercheurs à comprendre la situation globale.

Le logiciel DADA2 est couramment utilisé pour analyser les données de séquençage ADN car il excelle dans l'élimination des erreurs des séquences. Ce flux de travail spécifique a été adapté pour améliorer la qualité des données et s'assurer que seules les séquences fixatrices d'azote les plus pertinentes sont incluses.

En plus du flux de travail, une base de données complète de micro-organismes fixateurs d'azote a été créée. Cette base de données servira de ressource pour les chercheurs étudiant les diazotrophes, facilitant les comparaisons entre différentes études.

Aperçu des données et méthodes

La structure du flux de travail

Le flux de travail consiste en un pipeline DADA2 nifH, suivi d'étapes de traitement supplémentaires. Les chercheurs commencent par rassembler les lectures de séquençage brutes et les métadonnées sur chaque échantillon, y compris l'emplacement et la date de collecte. La structure du flux de travail permet d'intégrer les résultats de diverses études et garantit que les chercheurs peuvent analyser les données de manière standardisée.

Rassembler et traiter les données

Les données des études qui répondaient à certains critères ont été téléchargées à partir de bases de données publiques. Chaque ensemble de données a été traité séparément via le pipeline DADA2, qui a aidé à affiner les séquences et à retirer toute erreur ou contamination. Une fois les données traitées, les résultats de chaque étude peuvent être combinés en un ensemble de données plus large et plus complet.

Le rôle de la bioinformatique dans l'analyse des données

La bioinformatique joue un rôle crucial dans l'analyse des données complexes générées par le séquençage à haut débit. Dans ce cas, le pipeline DADA2 est essentiel pour identifier et corriger les erreurs de séquençage, ce qui est vital pour déterminer avec précision la présence et l'abondance des micro-organismes fixateurs d'azote.

Après être passé par le pipeline DADA2, des étapes supplémentaires filtrent et affinent encore plus les données. Divers contrôles de qualité sont mis en place pour garantir que l'ensemble de données final est fiable et complet. Ce processus inclut également le croisement des séquences identifiées avec diverses bases de données pour classer et comprendre les différents micro-organismes fixateurs d'azote.

Compilation des études et des données

Études publiées

Les chercheurs ont compilé des données disponibles publiquement à partir d'études de fixation de l'azote qui utilisaient des amorces spécifiques pour analyser des échantillons des océans. En se concentrant sur des études partageant des méthodologies similaires, la comparaison des résultats entre différents groupes de recherche devient plus gérable. Les ensembles de données rassemblés consistaient en des séquences qui fournissent un aperçu des communautés microbiennes à travers divers régions océaniques.

Ensembles de données non publiés

En plus des études publiées, des données supplémentaires provenant de croisieres de recherche dans le Pacifique Nord ont été incluses dans l'analyse. Cela a permis d'obtenir un ensemble de données plus vaste, fournissant de nouvelles perspectives sur les organismes fixateurs d'azote présents dans cette partie de l'océan.

Les méthodes utilisées pour collecter et traiter ces échantillons étaient bien définies. L'objectif était de s'assurer que les données soient à la fois fiables et représentatives des communautés fixatrices d'azote dans l'océan.

Contexte environnemental et métadonnées

Pour comprendre les micro-organismes fixateurs d'azote dans leur contexte, il était essentiel de rassembler des données environnementales correspondant à chaque échantillon. Cela comprenait des paramètres tels que les coordonnées géographiques, la profondeur et la date de collecte. Les chercheurs ont également accédé à des données provenant du Simons Collaborative Marine Atlas Project, qui fournissait une richesse de données environnementales pour une analyse efficace.

En reliant la composition des communautés fixatrices d'azote aux facteurs environnementaux, les chercheurs peuvent mieux comprendre ce qui influence leur distribution et leur activité.

Le flux de travail post-pipeline

Les étapes post-pipeline du flux de travail sont conçues pour affiner et analyser davantage les données obtenues à partir du traitement initial DADA2. Ces étapes se concentrent sur le filtrage, l'annotation et l'intégration des résultats pour générer une base de données complète de micro-organismes fixateurs d'azote.

Contrôle de qualité et filtrage

Après le traitement des données de séquençage, le flux de travail applique des mesures de contrôle de qualité supplémentaires pour assurer l'exactitude des résultats. Cette étape inclut l'élimination des séquences qui sont peu susceptibles d'appartenir à des micro-organismes fixateurs d'azote et l'identification des contaminants potentiels. En filtrant rigoureusement les données, les scientifiques peuvent créer un ensemble fiable de séquences à analyser.

Annotations et intégration des données

L'étape suivante dans le flux de travail consiste à annoter chaque séquence identifiée à l'aide de bases de données de référence. Cela permet aux chercheurs de classer les micro-organismes fixateurs d'azote et de comprendre leurs relations au sein de la communauté microbienne plus large. La base de données résultante fournit des informations précieuses sur la diversité et l'abondance des diazotrophes à travers différentes régions.

L'intégration des données environnementales fournit également un contexte à ces résultats, permettant aux chercheurs d'explorer comment divers facteurs influencent la distribution des micro-organismes fixateurs d'azote.

Résultats et tendances dans les communautés de diazotrophes

La création d'une base de données complète

Toutes les données rassemblées et traitées ont abouti à une base de données complète d'organismes fixateurs d'azote, qui comprend un total de 21 études et une richesse d'échantillons provenant de l'océan. Cette base de données sert de ressource vitale pour les chercheurs, leur permettant d'accéder à des données standardisées et bien annotées qui reflètent la diversité des diazotrophes dans l'océan.

Distribution globale des échantillons

La base de données compilée révèle diverses tendances concernant les micro-organismes fixateurs d'azote dans différentes régions océaniques. Notamment, les données montrent une concentration d'échantillons dans l'Hémisphère Nord, en particulier dans l'océan Pacifique. Cette distribution met en lumière d'éventuels biais dans l'échantillonnage, certaines régions restant sous-représentées.

Les motifs géographiques et saisonniers dans la base de données reflètent également des tendances plus larges dans la recherche marine, soulignant la nécessité d'un échantillonnage plus étendu dans les zones et saisons moins étudiées.

Comprendre la biogéographie globale des diazotrophes

La base de données permet aux chercheurs d'examiner la biogéographie mondiale des diazotrophes et d'identifier des tendances significatives dans différentes régions océaniques. En analysant les motifs de diversité et d'abondance des micro-organismes fixateurs d'azote, les scientifiques peuvent établir des connexions entre les facteurs environnementaux et les communautés microbiennes.

Principales découvertes et tendances

L'analyse révèle que les cyanobactéries sont les organismes fixateurs d'azote dominants dans de nombreuses régions. Cependant, les diazotrophes non cyanobactériens jouent également un rôle significatif, représentant une part considérable des données totales. Différents groupes de micro-organismes fixateurs d'azote montrent des motifs distincts en réponse aux facteurs environnementaux, comme la température et la disponibilité des nutriments.

Implications pour la recherche future

Ces découvertes soulignent l'importance de comprendre les micro-organismes fixateurs d'azote dans le contexte de processus écologiques plus larges. Les données peuvent informer les efforts de recherche futurs visant à explorer ces communautés plus en profondeur et à examiner comment elles réagissent aux changements environnementaux.

Conclusion

L'intégration de divers ensembles de données et le développement d'un flux de travail complet pour analyser les micro-organismes fixateurs d'azote marquent une avancée significative dans la recherche marine. En fournissant des perspectives sur la diversité et la distribution des diazotrophes, ce cadre guidera les enquêtes futures sur les motifs écologiques et améliorera notre compréhension de la fixation de l'azote dans les océans.

Les tendances mises en avant dans la base de données soulignent également les domaines nécessitant davantage d'études et mettent en évidence la nécessité de combler les lacunes de connaissances dans les régions et saisons moins étudiées. Grâce à des efforts collaboratifs et à des recherches continues, les scientifiques peuvent travailler vers une compréhension plus approfondie des écosystèmes marins et du rôle vital que les organismes fixateurs d'azote jouent au sein de ceux-ci.

Source originale

Titre: Global biogeography of N2-fixing microbes: nifH amplicon database and analytics workflow

Résumé: Marine nitrogen (N) fixation is a globally significant biogeochemical process carried out by a specialized group of prokaryotes (diazotrophs), yet our understanding of their ecology is constantly evolving. Although marine dinitrogen (N2)-fixation is often ascribed to cyanobacterial diazotrophs, indirect evidence suggests that non-cyanobacterial diazotrophs (NCDs) might also be important. One widely used approach for understanding diazotroph diversity and biogeography is polymerase chain reaction (PCR)-amplification of a portion of the nifH gene, which encodes a structural component of the N2-fixing enzyme complex, nitrogenase. An array of bioinformatic tools exists to process nifH amplicon data, however, the lack of standardized practices has hindered cross-study comparisons. This has led to a missed opportunity to more thoroughly assess diazotroph biogeography, diversity, and their potential contributions to the marine N cycle. To address these knowledge gaps a bioinformatic workflow was designed that standardizes the processing of nifH amplicon datasets originating from high-throughput sequencing (HTS). Multiple datasets are efficiently and consistently processed with a specialized DADA2 pipeline to identify amplicon sequence variants (ASVs). A series of customizable post-pipeline stages then detect and discard spurious nifH sequences and annotate the subsequent quality-filtered nifH ASVs using multiple reference databases and classification approaches. This newly developed workflow was used to reprocess nearly all publicly available nifH amplicon HTS datasets from marine studies, and to generate a comprehensive nifH ASV database containing 7909 ASVs aggregated from 21 studies that represent the diazotrophic populations in the global ocean. For each sample, the database includes physical and chemical metadata obtained from the Simons Collaborative Marine Atlas Project (CMAP). Here we demonstrate the utility of this database for revealing global biogeographical patterns of prominent diazotroph groups and highlight the influence of sea surface temperature. The workflow and nifH ASV database provide a robust framework for studying marine N2 fixation and diazotrophic diversity captured by nifH amplicon HTS. Future datasets that target understudied ocean regions can be added easily, and users can tune parameters and studies included for their specific focus. The workflow and database are available, respectively, in GitHub (https://github.com/jdmagasin/nifH-ASV-workflow) and Figshare (https://doi.org/10.6084/m9.figshare.23795943.v1).

Auteurs: Kendra A. Turk-Kubo, M. Morando, J. Magasin, S. Cheung, M. M. Mills, J. P. Zehr

Dernière mise à jour: 2024-05-06 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.04.592440

Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.04.592440.full.pdf

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

Merci à biorxiv pour l'utilisation de son interopérabilité en libre accès.

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