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Le Rôle de la Forme dans le Tri de Particules Microfluidiques

Cette étude examine comment la forme des particules influence le tri dans les dispositifs microfluidiques.

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La microfluidique inertielle, c'est une méthode pour trier de toutes petites particules, comme des Cellules, sans avoir besoin d'étiquettes ou de marqueurs. C'est super efficace et ça permet de séparer rapidement différentes particules. La plupart des études se concentrent sur le tri des cellules selon leur forme et leur rigidité, mais la taille des particules est souvent le critère principal pour la séparation. Les chercheurs comparent souvent les cellules biologiques à de petites billes en plastique pour créer de meilleurs systèmes de tri. De plus, la capacité d'une particule à changer de forme sous pression influence son tri. Cette méthode a déjà été utilisée avec succès pour séparer des cellules cancéreuses du sang, diagnostiquer des maladies comme le paludisme, et nettoyer des globules rouges fabriqués. Cependant, le rôle de la forme des particules dans le tri n'a pas été autant étudié.

Comportement des Particules dans les Canaux Microfluidiques

Les études précédentes sur les particules sphériques dans des canaux microfluidiques droits ont révélé des comportements complexes, où les particules allongées et en forme de disque montrent différents types de rotations selon leur position dans le flux. Quand ces particules se concentrent dans le flux, elles tendent à afficher des motifs stables : les particules allongées peuvent faire des roulés tandis que celles en forme de disque roulent. À mesure que la vitesse du flux augmente, les particules peuvent s'aligner avec le flux ou arrêter de tourner complètement. La taille d'une particule est souvent comparée au diamètre d'une particule ronde, et il semble y avoir une forte corrélation entre les deux, peu importe la forme. Cependant, ça ne s'applique pas à toutes les Formes, surtout celles qui ne sont pas symétriques.

La plupart des recherches ont examiné comment la forme influence le tri dans des canaux droits, avec moins d'études sur les designs courbés. Le concept de diamètre équivalent a montré son intérêt dans les formes non sphériques en examinant les motifs d'écoulement. Cependant, les différences dans le comportement des différentes formes dans le fluide suggèrent que les interactions entre fluide et particules sont plus complexes qu'on ne le pensait. Certaines découvertes attribuent ces différences à la rotation des particules et à la création de motifs en tourbillon secondaires dans le flux qui peuvent déplacer des éléments non sphériques de leurs positions attendues.

Importance de la Forme dans les Cellules Biologiques

Dans les systèmes biologiques, la forme des cellules peut varier énormément. Au fur et à mesure que les cellules se divisent, leur taille et leur forme changent tout au long de leur cycle. Donc, représenter avec précision comment la forme influence le tri dans les dispositifs microfluidiques peut être compliqué. Cette étude se concentre sur la manière dont la forme d'un parasite spécifique, Leishmania mexicana, impacte les motifs de Concentration dans des dispositifs microfluidiques courbés. Les chercheurs ont utilisé des techniques d'imagerie avancées pour étudier les différentes populations de ce parasite, qui peuvent varier en taille, en forme et en présence d'une structure en forme de queue appelée flagelle.

Préparation des Cellules

Les cellules de Leishmania mexicana ont été cultivées dans une solution riche en nutriments. Une fois atteintes un certain nombre, les cellules ont été traitées pour enlever les flagelles en utilisant une méthode qui consistait à les pousser à travers un tube fin plusieurs fois. Ensuite, les chercheurs ont isolé le corps des cellules de celles avec flagelles et d'autres débris. Pour étudier les cellules à différents stades de leur cycle de vie, différents traitements ont été appliqués pour les empêcher de croître pendant des périodes spécifiques.

Analyse des Cellules avec des Techniques d'Imagerie

Pour analyser la forme des cellules, les chercheurs ont utilisé une machine qui prend des milliers de photos de chaque cellule. Ils se sont concentrés sur la mesure de la taille, de la forme et d'autres caractéristiques des cellules. Ces données ont été nettoyées pour s'assurer que seules des images claires et uniques des cellules étaient analysées.

Test de Différentes Formes de Particules

La recherche a également inclus des tests sur différents types de billes en plastique, qui variaient en forme et en taille. Ces billes ont été comparées aux cellules pour voir comment elles se concentraient dans les dispositifs microfluidiques. Des dispositifs spécifiques ont été conçus pour guider le flux des particules à travers différentes tailles de canaux. Les chercheurs ont injecté à la fois des billes et des cellules dans ces dispositifs à différents débits pour observer leur comportement.

Comportement des Cellules dans les Canaux Microfluidiques

Alors que les cellules et les billes se déplaçaient à travers les dispositifs microfluidiques, les chercheurs ont enregistré comment elles se concentraient à différentes positions le long du canal. Pour les particules de forme ronde, elles se concentraient généralement près de la paroi interne. En revanche, les particules allongées, comme les parasites testés, avaient tendance à se diriger vers la paroi externe à des débits plus élevés. Les résultats ont indiqué que la forme joue un rôle important dans la concentration des cellules au sein du dispositif.

Fait intéressant, la présence d'un flagelle semblait avoir peu d'effet sur le comportement de concentration des cellules dans les conditions testées. Cela suggère que la forme de la cellule est plus influente sur son mouvement à travers le dispositif que le flagelle lui-même.

Investigation du Rôle des Flagelles

Les chercheurs ont cherché à comprendre si la présence d'un flagelle influençait la manière dont les cellules de Leishmania mexicana se concentraient dans les dispositifs microfluidiques. Ils ont comparé trois groupes de cellules : celles avec des flagelles, celles sans, et un troisième groupe qui avait un flagelle mineur formé naturellement. L'analyse a montré des variations de forme significatives entre les groupes, les cellules avec flagelles étant plus longues et plus étroites que leurs homologues sans flagelle.

Comportement de Concentration des Différents Types de Cellules

En utilisant l'imagerie haute vitesse, les chercheurs ont surveillé le comportement de concentration des trois groupes de cellules. Les résultats ont montré que, bien que les cellules avec flagelles se concentraient davantage vers la paroi externe à des débits plus élevés, les cellules sans flagelle avaient tendance à se regrouper loin de la paroi interne. Les solutions mettent en lumière l'influence de la forme et d'autres propriétés sur l'endroit où les cellules se posent dans le canal.

Compréhension du Comportement de Concentration

L'étude a mis en évidence que la forme spécifique d'une cellule influençait sa position dans les canaux microfluidiques. Par exemple, les cellules amastigotes plus courtes et plus rondes se concentraient près de la paroi interne tandis que les cellules allongées se concentraient plus près de la paroi externe à des débits plus élevés. Les résultats ont montré qu'en considérant la même population de cellules, différentes formes influençaient leur capacité à être triées efficacement.

Rôle de la Staging du Cycle Cellulaire

Les chercheurs ont également manipulé les formes des cellules en les traitant avec différents produits chimiques pour arrêter leur croissance à des stades spécifiques. Cela a conduit à des changements dans la largeur et la longueur des cellules, ce qui a affecté leur comportement de concentration dans les canaux. Les cellules plus longues montraient une tendance à se déplacer vers la paroi externe, tandis que les cellules plus rondes restaient près du centre.

Comparaison avec des Particules Rigides

L'étude a également comparé le comportement des cellules de Leishmania avec des billes en plastique rigides de formes et tailles variées. Cet examen visait à déterminer à quel point les billes pouvaient imiter le comportement des cellules biologiques. Les chercheurs ont trouvé que, contrairement aux cellules, ces billes se concentraient systématiquement près de la paroi interne, suggérant que le comportement complexe des cellules dans l'environnement microfluidique n'était pas reproduit par les particules rigides.

Résumé des Résultats

Cette recherche visait à mettre en évidence à quel point la forme des cellules est importante dans le contexte du tri dans les dispositifs microfluidiques. La taille et la forme peuvent être des facteurs influents ; cependant, les variations biologiques dans la forme peuvent compliquer les interprétations. Les chercheurs ont trouvé que les cellules de Leishmania allongées démontraient une position de concentration vers la paroi externe, ce qui est cohérent avec les observations d'autres cellules déformables.

Malgré l'influence de la forme, la présence d'un flagelle avait un effet minimal sur l'endroit où les cellules se concentraient. Il est devenu évident que la forme des cellules elles-mêmes jouait un rôle plus critique dans le déterminement de leur comportement dans le flux. L'étude a souligné la nécessité d'une caractérisation approfondie de la forme et de la taille des cellules lors de l'investigation du tri dans les expériences microfluidiques.

Les chercheurs ont conclu que collecter des données précises sur les morphologies des cellules peut significativement affecter l'interprétation de leur comportement dans les canaux microfluidiques. Les résultats mettent en lumière les interactions complexes entre forme, conditions de flux et comportement cellulaire, suggérant que d'autres études sont nécessaires pour une compréhension plus approfondie de ces processus.

Directions Futures

Pour aller de l'avant, les chercheurs visent à continuer d'explorer comment la forme influence le comportement dans les dispositifs microfluidiques. Comprendre les comportements de rotation des différents types de cellules et comment elles interagissent avec le fluide aidera à améliorer les méthodes de tri. Les informations recueillies pourraient conduire à de meilleures conceptions pour les dispositifs microfluidiques utilisés dans diverses applications, y compris les diagnostics médicaux et l'analyse des cellules.

Les améliorations dans la technologie d'imagerie et les méthodes d'analyse contribueront à une image plus claire de comment les cellules se comportent dans les environnements microfluidiques. En fin de compte, cela pourrait ouvrir la voie à des avancées significatives dans l'utilisation de la microfluidique dans la recherche et les milieux cliniques.

Source originale

Titre: Impact of flagellated and elongated morphological phenotypes on the focusing behaviours of biological cells in inertial microfluidic devices

Résumé: Inertial microfluidics has demonstrated tremendous potential to impact biological - and notably medical - fields, by offering a highly versatile, portable and cost-effective approach to cell focusing and sorting. While the range of applications of inertial devices spans medical diagnostics, bioprocessing or water engineering to mention a few, translation is still impeded by the lack of clear understanding of cell interactions in such devices. This often leads to bespoke designs that take years of development and characterisation for one targeted application, and limited tools for informed optimisation. A more fundamental knowledge of inertial behaviours is key to future translational works and impact, by enabling a deeper understanding of inertial forces in biological systems. Towards this goal, this paper focuses on high-throughput morphological phenotyping of the single-celled, flagellated parasite Leishmania mexicana to better understand how variations in cell body length, width and flagellated status impact the focusing patterns of highly non-spherical cells in curved inertial devices. Some of the key findings in this study include i) not all organelles, such as flagella, will alter focusing if the body shape is conserved, ii) the impact of cell shape is specific to a channel design and slight changes in e.g., cell confinement can completely change focusing patterns, iii) elongated prolate-like cells align in different orientations depending on their lateral position with a curved channel and iv) despite variabilities observed in focusing patterns for elongated versus rounder cell phenotypes, large morphological variations can be completely overcome at high Reynolds numbers so that all phenotypes tightly focus at a single position (here towards the channel outer wall). This last finding, in particular, may open new avenues for highly efficient cell enrichment processes, such as for the detection of pathogens in water.

Auteurs: Jessie Howell, N. Hall, S. Omwenga, T. Hammarton, M. Jimenez

Dernière mise à jour: 2024-05-19 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.16.594321

Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.16.594321.full.pdf

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

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