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Faire avancer la détection de la lèpre avec des nouvelles technologies

De nouvelles méthodes de test visent à améliorer le diagnostic et le traitement précoce de la lèpre.

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La lèpre est une maladie de longue durée et contagieuse causée par des bactéries spécifiques. On la trouve partout dans le monde et elle touche surtout la peau et les nerfs, même si d'autres parties du corps peuvent être affectées aussi. Si elle n'est pas traitée, la lèpre peut entraîner des déformations visibles et diverses handicaps physiques. Elle peut se manifester de plein de façons différentes, ce qui peut parfois rendre difficile l'identification pour les médecins, car ses symptômes ressemblent à ceux d'autres maladies de la peau ou des nerfs.

Importance du Diagnostic précoce

Détecter la lèpre tôt est super important pour un traitement efficace et pour éviter sa propagation dans la communauté. Comme les bactéries responsables de la lèpre ne peuvent pas se développer en dehors du corps humain dans un laboratoire, les médecins s’appuient souvent sur les antécédents médicaux du patient et un examen physique pour poser un diagnostic. Malheureusement, ça peut entraîner des retards dans le diagnostic, voire pas de diagnostic du tout, ce qui met en évidence le besoin de professionnels de santé qualifiés.

Faute d’un test parfait pour la lèpre, les médecins peuvent utiliser des tests supplémentaires comme des biopsies cutanées ou des frottis cutanés pour chercher les bactéries. Pourtant, la précision de ces tests peut varier selon le type de lèpre et l'expérience du médecin.

Avancées dans les Tests Moléculaires

Récemment, des scientifiques ont développé des tests moléculaires, comme une méthode appelée PCR en temps réel (qPCR), qui peut détecter la présence de bactéries responsables de la lèpre. Ces tests sont sensibles et spécifiques, donc ils peuvent aider à détecter la maladie plus tôt. Cependant, même avec cette nouvelle technologie, les médecins utilisent principalement des examens cliniques pour le diagnostic en raison des différences de manifestation de la maladie chez les patients.

Les autorités sanitaires au Brésil ont approuvé un nouveau kit de test moléculaire spécifiquement pour la détection de la lèpre. Ce kit cible des marqueurs génétiques spécifiques des bactéries et montre une grande précision. En intégrant ce nouveau test dans la routine de travail des professionnels de santé, ça peut aider à augmenter le nombre de cas détectés, surtout chez ceux qui ont moins de bactéries dans leur corps.

Le Rôle des Tests de dépistage

Les tests de dépistage sont vraiment utiles pour trouver les cas de lèpre tôt. Ces tests sont conçus pour identifier rapidement les personnes qui pourraient avoir la maladie et les orienter vers des tests et diagnostics supplémentaires. Cependant, utiliser des tests moléculaires dans des zones reculées peut être compliqué. Le besoin d'équipement et de matériel spécialisés rend plus difficile l'accès à des tests précis dans des endroits sans bonne infrastructure médicale.

Le processus de collecte d'échantillons et d'extraction de matériel génétique demande beaucoup de soin et peut coûter cher. Utiliser des instruments sensibles et assurer l'élimination sécurisée des déchets peut aussi poser problème dans certains établissements de santé.

Objectifs de la Recherche

Le but de la recherche récente était d'améliorer le processus de test pour la lèpre à l'aide de nouvelles méthodes, en se concentrant sur un kit spécifique qui a été approuvé pour utilisation. Les scientifiques cherchaient à simplifier l'extraction de l'ADN à partir d'échantillons de peau et à voir si le nouveau matériel de test pouvait bien fonctionner dans des zones éloignées. Le prototype créé peut aider les responsables de la santé à repérer les cas de lèpre plus facilement et à suivre ceux qui ont besoin de soins.

Éthique de l'Étude

Cette étude a été approuvée par un comité d'éthique local. Les personnes soupçonnées d'avoir la lèpre dans une clinique spécialisée ont accepté de participer, et si elles étaient mineures, leurs tuteurs ont donné leur consentement pour faire partie du projet.

Matériaux Utilisés

Pour la recherche, les scientifiques ont utilisé de l'ADN synthétique avec des marqueurs génétiques pour la lèpre, ainsi que des cellules d'animaux infectés. L'objectif était d'optimiser les réactions de test avec différents types de matériel.

Optimisation du Matériel de Test

Pour obtenir les meilleurs résultats avec le matériel de test, les chercheurs ont testé différents réglages, comme le temps d'exposition et l'intensité de la lumière. Ces changements visaient à améliorer la capacité des réactions à détecter efficacement les bactéries. Les scientifiques ont aussi cherché les meilleures façons d'analyser les résultats, en établissant des seuils spécifiques pour déterminer si un test était positif.

Analyse des Échantillons

Des échantillons ont été prélevés chez des patients à une clinique spécialisée pour la lèpre. Des échantillons de biopsie ont été recueillis et conservés jusqu'au test. Les chercheurs ont classé les échantillons selon des directives établies pour comprendre combien de cas étaient de la lèpre et combien étaient des conditions cutanées non liées à la lèpre.

L'étude a inclus un total de 115 échantillons de biopsie cutanée, qui ont ensuite été analysés avec du matériel de test standard et portable.

Procédures de Test

Dans le laboratoire, l'ADN a été extrait des échantillons de peau. Certains échantillons ont été testés avec des kits commerciaux, tandis que d'autres ont été testés avec une méthode récemment simplifiée. Les chercheurs voulaient voir comment les deux méthodes fonctionnaient.

Pendant le processus d'extraction de l'ADN, les chercheurs ont aussi utilisé un modèle de peau de porc pour évaluer différentes solutions utilisées pour décomposer les échantillons de peau. Ces tests les ont aidés à trouver la meilleure solution pour l'extraction de l'ADN.

Développement d'un Protocole d'Extraction Simplifié

Après avoir établi une méthode efficace pour extraire l'ADN, les chercheurs l'ont appliquée à des échantillons cliniques. L'objectif était de s'assurer que le processus était simple et suffisamment efficace pour être utilisé dans des environnements plus difficiles.

Protocoles d'Élution

Pour extraire l'ADN plus efficacement, les chercheurs ont testé divers protocoles d'élution qui incluaient des étapes de lavage avant d'extraire l'ADN des échantillons de peau. Cette étape est importante pour garantir que l'ADN extrait est pur et utilisable pour les tests.

Utilisation d'Équipements Portables pour le Test

Des tests utilisant le nouvel équipement portable ont été réalisés pour vérifier la présence de bactéries responsables de la lèpre dans les échantillons collectés. Les chercheurs ont comparé ces résultats à ceux obtenus avec du matériel de test standard pour évaluer la précision.

Résultats de l'Étude

Les résultats ont montré que, même si l'équipement portable fonctionnait bien, il y avait des variations dans les résultats par rapport à l'équipement standard. Par exemple, le seuil moyen pour détecter l'ADN de la lèpre était légèrement plus élevé dans les échantillons testés avec l'équipement portable, ce qui pourrait indiquer l'efficacité de l'équipement selon les échantillons disponibles.

Parmi les échantillons analysés, un certain pourcentage s'est avéré positif pour la lèpre avec les deux méthodes de test. La recherche a mis en évidence comment le nouveau test portable peut être utilisé dans différents contextes.

Limites et Directions Futures

Bien que la recherche ait montré des promesses pour les tests portables de la lèpre, certaines limitations ont été identifiées. Par exemple, certains échantillons ont été classés comme indéterminés, indiquant que d'autres tests pourraient être nécessaires pour confirmer les résultats.

L'étude a souligné la nécessité d'un ajustement et d'une amélioration continus des protocoles de test pour mieux détecter les cas, notamment ceux avec moins de bactéries.

Conclusion

La recherche a montré que la technologie de test portable pour la lèpre offre des avantages potentiels, surtout dans des zones reculées. En améliorant les méthodes d'extraction de l'ADN et de test, les professionnels de santé peuvent améliorer leur capacité à identifier et à surveiller la lèpre dans des populations qui ont un accès limité aux ressources médicales. À mesure que le travail continue d'affiner ces processus, l'objectif reste d'éliminer la lèpre en tant que problème de santé publique. Les résultats de cette étude pourraient représenter des étapes significatives vers l'atteinte de cet objectif.

Source originale

Titre: Validation of the performance of a point of care molecular test for leprosy: from a simplified DNA extraction protocol to a portable qPCR

Résumé: The study aimed to optimize qPCR reactions using oligonucleotides from the first Brazilian molecular diagnostic kit for leprosy on a portable platform (Q3-Plus). In addition, we sought to develop a simplified protocol for DNA extraction that met point-of-care criteria. During optimization on the Q3-Plus, optical parameters, thresholds, and cutoffs for the 16S rRNA and RLEP targets of M. leprae were established using synthetic DNA, purified DNA from M. leprae, and pre-characterized clinical samples. In the simplified extraction step, different lysis solutions were evaluated using chaotropic agents, and purification was carried out by depositing the lysed material on FTA cards. The complete protocol (simplified extraction + qPCR on the portable platform) was evaluated with pre-characterized clinical skin biopsy samples and compared with standard equipment (QuantStudio-5). LOD95% for the optimized reactions was 113.31 genome-equivalents/L for 16S rRNA and 17.70 genome-equivalents/L for RLEP. Among the lysis solutions, the best-performing was composed of urea (2 M), which provided good dissolution of the skin fragment and a lower Ct value, indicating higher concentrations of DNA. The complete technological solution showed a sensitivity of 52% in reactions. Our results highlight the need for additional optimization to deal with paucibacillary samples, but also demonstrate the applicability of the portable platform in the detection of M. leprae in low infrastructure settings.

Auteurs: Alexandre Dias Tavares Costa, A. Bertao-Santos, L. d. S. Dias, M. Ribeiro-Alves, R. O. Pinheiro, M. O. Moraes, F. S. d. N. Manta

Dernière mise à jour: 2024-02-29 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2024.02.29.24303527

Source PDF: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2024.02.29.24303527.full.pdf

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

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