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# Biología # Biología celular

Una Nueva Forma de Estudiar Estructuras Celulares

Explorando los beneficios de la microscopía ExAPC para la observación de células.

Takafumi Miyamoto, L. N. Sari, T. Nishimura, K. Kainoh, N. Onodera, M. Kano, M. Masuda, Y. Tamura, Y. Hayashi, Y. Yamamoto, S.-I. Takahashi, Y. Mishima, Y. Yoneyama, Y. Takeuchi, H. Ohno, Y. Ohashi, M. Sekiya, T. Matsuzaka, H. Shimano

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Las células son los bloques básicos de la vida. Dentro de estas células, hay compartimentos especiales llamados orgánulos. Cada orgánulo tiene su propio trabajo y juntos ayudan a que la célula funcione correctamente. La forma, la disposición y la cantidad de estos orgánulos en una célula ayudan a definir cómo se ve la célula y cómo se comporta.

La importancia de ver la organización celular

Para entender cómo funcionan las células, es crucial ver cómo están organizados esos orgánulos. Una forma en que los científicos visualizan esta organización es a través de un método llamado imagen de fluorescencia. Esta técnica usa luz que puede hacer que ciertas partes de la célula brillen, permitiendo a los investigadores ver las formas y ubicaciones de diferentes orgánulos.

La imagen de fluorescencia tiene muchas ventajas; es rápida, específica y se puede usar en muchos tipos de células diferentes. Sin embargo, este método también tiene algunos inconvenientes. Por ejemplo, la luz brillante puede dañar las células o hacer que las partes que brillan se desvanezcan. Debido a estos problemas, los científicos están buscando otros métodos como la imagen sin etiquetas, que les permite observar las células sin añadir sustancias que puedan interferir con su estado natural.

Una mirada más cercana a la imagen sin etiquetas

Los métodos de imagen sin etiquetas proporcionan una forma de estudiar células sin la necesidad de marcadores fluorescentes. Un método interesante se llama microscopía ExAPC. En este proceso, la luz pasa a través de una placa especial que ayuda a crear imágenes más claras al reducir efectos no deseados de la dispersión de la luz.

Con la microscopía ExAPC, los investigadores pueden ver múltiples orgánulos a la vez. Esto es importante ya que les ayuda a capturar imágenes detalladas que pueden revelar cómo trabajan juntos los orgánulos dentro de la célula. A pesar de su promesa, la microscopía ExAPC aún se está probando para establecer completamente su efectividad como método para observar células sin etiquetas.

Visualizando células vivas con microscopía ExAPC

La investigación ha demostrado que la microscopía ExAPC puede visualizar efectivamente el funcionamiento interno de células vivas. Por ejemplo, se ha utilizado para ver las formas y comportamientos de células de cáncer de pulmón A549. Las imágenes tomadas con esta técnica revelan estructuras clave en estas células, como el núcleo y las Mitocondrias, proporcionando conocimientos sobre su organización.

Sin embargo, distinguir entre varios orgánulos solo a partir de estas imágenes puede ser difícil. Los científicos han encontrado que ciertos orgánulos pueden ser identificados según sus propiedades únicas como su índice de refracción, que es cómo doblan la luz. El núcleo, el nucleolo y las mitocondrias son algunos de los que se pueden ver claramente con la microscopía ExAPC.

Los investigadores observaron que al ver las células a lo largo del tiempo, podían ver cómo las estructuras cambiaban e interactuaban entre sí durante diferentes procesos como la división celular y la muerte celular programada.

Observando comportamientos celulares

Usando la microscopía ExAPC, los científicos han podido estudiar varios comportamientos de las células. Han mirado cómo se dividen las células y cómo se comportan estructuras específicas dentro de las células durante este proceso. Por ejemplo, durante la división de células HeLa (un tipo de línea celular humana), los investigadores pudieron capturar cambios en la organización de estas células en tiempo real.

Además de la división celular, los investigadores también observaron cómo las células experimentan apoptosis, un proceso de muerte celular programada, y un fenómeno llamado entosis, donde una célula engulle a otra. Estas observaciones son importantes ya que ayudan a los científicos a entender cómo viven y mueren las células, y cómo interactúan con su entorno.

Condensados biomoleculares y su papel en las células

Un enfoque específico de la investigación se centra en los condensados biomoleculares, que son grupos densos de proteínas y otras moléculas dentro de las células. Estos condensados desempeñan papeles importantes en la organización de diversas reacciones bioquímicas. Los científicos han utilizado la microscopía ExAPC para identificar estas estructuras en células vivas, lo que ha proporcionado información sobre cómo pueden afectar las funciones celulares.

En experimentos, los investigadores descubrieron estructuras esféricas en el citoplasma de células HeLa, conocidas como estructuras similares a condensados biomoleculares (BCLs). Estas estructuras se observaron fusionándose y comportándose de manera dinámica, cambiando de forma y tamaño. Experimentos que alteraron las condiciones en las células, como añadir ciertos químicos, mostraron que estos BCLs podían aparecer o desaparecer, destacando su naturaleza dinámica.

Gotitas lipídicas: otro componente clave

Otro tema importante de estudio son las gotitas lipídicas (LDs), que son pequeños compartimentos de almacenamiento para grasas dentro de las células. Estas gotitas son cruciales para el equilibrio energético y ayudan a proteger a las células de los efectos nocivos de las grasas en exceso. Al igual que los condensados biomoleculares, las gotitas lipídicas también pueden formarse y cambiar en respuesta a diversas condiciones.

Usando la microscopía ExAPC, los investigadores han mapeado el crecimiento y el comportamiento de las gotitas lipídicas en células vivas. Por ejemplo, investigaron cómo se forman las gotitas lipídicas cuando las células se exponen a ciertos nutrientes. Observaron diferentes fases de crecimiento para estas gotitas a lo largo del tiempo, ayudando a aclarar cómo se desarrollan y aumentan de tamaño.

Los investigadores encontraron que las gotitas lipídicas a menudo interactúan con otros orgánulos en la célula, como las mitocondrias. Esta interacción es esencial para entender cómo las células gestionan la energía y la comunicación. Al rastrear los movimientos de las gotitas lipídicas, los científicos pudieron ver cómo migran a diferentes partes de la célula.

Dinámicas mitocondriales y su importancia

Las mitocondrias son conocidas como la central energética de la célula. Producen la energía que las células necesitan para funcionar. Las mitocondrias no son estáticas; cambian constantemente de forma y pueden dividirse o unirse. Este comportamiento dinámico es crucial para muchos procesos celulares, incluida la producción de energía y la apoptosis.

La microscopía ExAPC ha permitido a los científicos observar de cerca estos cambios en las mitocondrias sin usar etiquetas dañinas. Los investigadores pudieron identificar puntos específicos donde las mitocondrias se dividen y se fusionan. Notaron que las mitocondrias de longitudes similares tienden a unirse durante los eventos de fusión, lo que arroja luz sobre los procesos que regulan sus comportamientos.

Cuando las células experimentan estrés, como la exposición a medicamentos que afectan la producción de energía, las mitocondrias pueden cambiar su estructura drásticamente. Los investigadores que utilizaron microscopía ExAPC notaron que tras el tratamiento con uno de estos medicamentos, la forma de las mitocondrias cambió rápidamente de hilos largos a formas globulares, lo que es crítico para entender el impacto del estrés en la salud celular.

El futuro de la imagenología y la investigación celular

La investigación sobre la microscopía ExAPC apenas comienza, pero muestra un gran potencial para el futuro de la biología celular. Esta técnica permite a los científicos ver detalles sobre las estructuras y comportamientos celulares sin la necesidad de colorantes fluorescentes, lo que podría llevar a observaciones más precisas y prolongadas de células vivas.

A medida que esta tecnología avance, puede conducir a más descubrimientos sobre cómo funcionan e interactúan los componentes celulares bajo diferentes condiciones. El entendimiento de los condensados biomoleculares, las gotitas lipídicas y las mitocondrias ofrecerá perspectivas valiosas sobre diversas enfermedades y los principios fundamentales de la vida.

En resumen, examinar cómo están organizadas y cómo funcionan las células es crucial para entender la vida a nivel celular. A medida que los científicos desarrollen mejores técnicas de imagen como la microscopía ExAPC, podrán explorar comportamientos e interacciones celulares más complejos, ayudando en la búsqueda continua de entender cómo funciona la vida.

Fuente original

Título: Label-free imaging of intracellular structures in living mammalian cells via external apodization phase-contrast microscopy

Resumen: Developing techniques to visualize intracellular structures, which influence the spatiotemporal functionality of biomolecules, is essential for elucidating mechanisms governing cellular behavior. In this study, we demonstrate that label-free external apodization phase-contrast (ExAPC) microscopy serves as a valuable tool for the simultaneous observation of various intracellular structures with high spatiotemporal resolution, while successfully mitigating halo artifacts. Additionally, through quantitative analysis of images obtained by combining ExAPC microscopy with fluorescence microscopy, we identified distinct heterogeneities in biomolecular condensates, lipid droplets, and mitochondria. Our findings highlight the potential of ExAPC microscopy to provide detailed insights into alterations in intracellular structures associated with diverse cellular processes, corroborating the existing knowledge and potentially contributing to the discovery of novel cellular mechanisms.

Autores: Takafumi Miyamoto, L. N. Sari, T. Nishimura, K. Kainoh, N. Onodera, M. Kano, M. Masuda, Y. Tamura, Y. Hayashi, Y. Yamamoto, S.-I. Takahashi, Y. Mishima, Y. Yoneyama, Y. Takeuchi, H. Ohno, Y. Ohashi, M. Sekiya, T. Matsuzaka, H. Shimano

Última actualización: 2024-12-27 00:00:00

Idioma: English

Fuente URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.01.582671

Fuente PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.01.582671.full.pdf

Licencia: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Cambios: Este resumen se ha elaborado con la ayuda de AI y puede contener imprecisiones. Para obtener información precisa, consulte los documentos originales enlazados aquí.

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