O Papel do Tbh no Comportamento e Saúde das Frutas Moscas
A tirosina-beta-hidroxilase é crucial pra produção de octopamina e comportamento nas moscas da fruta.
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Índice
- Importância do Tbh em Drosophila melanogaster
- Estudos Mutantes sobre Tbh
- Análise Comportamental dos Mutantes de Tbh
- Desenvolvimento de Tolerância nas Moscas
- Criando Novos Mutantes
- Avaliando a Sensibilidade ao Etanol
- Avaliações de Movimento em Mutantes
- Atividade Neuronal e Tbh
- Conclusão
- Fonte original
- Ligações de referência
O sistema octopaminérgico em moscas-da-fruta é super importante pra regular várias funções do corpo, tipo uso de energia e comportamento. Um lance crucial desse sistema é a enzima Tyramina-beta-hidroxilase (Tbh), que ajuda a transformar tiramina em octopamina. Essa enzima é fundamental tanto pra regular comportamentos quanto pra manter a saúde.
Drosophila melanogaster
Importância do Tbh emDrosophila melanogaster, ou a mosca-da-fruta comum, serve como modelo pra estudar funções neurológicas e comportamentais. Tbh é a enzima que facilita a produção de octopamina, que é importante pra várias coisas nas moscas. Nos mamíferos, uma enzima parecida chamada Dopamina-beta-hidroxilase (Dbh) converte dopamina em noradrenalina, que tem papéis semelhantes aos da octopamina nas moscas.
Estudos Mutantes sobre Tbh
Pra investigar o papel da octopamina, os pesquisadores criaram moscas-da-fruta mutantes que não têm esse neurotransmissor usando um método chamado mutagênese por excisão de P-elemento. Um mutante notável é o TbhnM18. Esse mutante tem níveis de octopamina super baixos e muito mais tiramina, cerca de dez vezes mais do que as moscas normais. Estudos mostram que Tbh é essencial pra fertilidade feminina e também tá envolvido em vários comportamentos.
Análise Comportamental dos Mutantes de Tbh
Os pesquisadores notaram que moscas adultas sem octopamina ainda conseguem correr rápido, mas têm dificuldade em começar a se mover quando enfrentam desafios ou oportunidades. Por exemplo, esses mutantes têm menos tendência a voar pra longe quando estão em perigo e são menos propensas a estender a probóscide quando o açúcar é oferecido. Mas, uma vez que respondem, eles se comportam de maneira similar às moscas normais.
O Etanol é uma substância que estimula o movimento. Quando as moscas são expostas ao etanol, normalmente elas mostram uma reação conhecida como resposta de sobressalto olfativa, que aumenta sua atividade. Curiosamente, essa resposta é mais fraca nos mutantes TbhnM18, reforçando a importância da octopamina. No entanto, após serem expostas ao etanol por mais tempo, esses mutantes mostram aumento na atividade, indicando que conseguem se adaptar ao longo do tempo.
Desenvolvimento de Tolerância nas Moscas
As moscas geralmente desenvolvem tolerância a substâncias como etanol após exposições repetidas. Os mutantes TbhnM18 inicialmente demonstram uma tolerância reduzida em comparação com as moscas normais, mas acabam atingindo níveis similares após várias exposições. Isso sugere que eles conseguem se adaptar ao longo do tempo, mas o processo demora mais pra eles.
Os pesquisadores também examinaram como o Tbh está envolvido em processos celulares. Ao analisar o gene Tbh usando técnicas como RT-PCR, eles encontraram múltiplos transcritos e variantes de splicing do Tbh, indicando uma regulação complexa de sua expressão. Criaram um novo mutante de Tbh usando um método diferente pra explorar ainda mais suas funções.
Criando Novos Mutantes
O mutante TbhDel3 foi criado por um processo chamado recombinação FLP/FRT, resultando em uma deleção significativa de parte do gene. Esse novo mutante teve uma deleção de 9,2 kb que inclui partes vitais do gene Tbh. Os pesquisadores analisaram se esse novo mutante apresentava características comportamentais e de tolerância similares aos mutantes TbhnM18.
Avaliando a Sensibilidade ao Etanol
Os cientistas testaram a sensibilidade e a tolerância ao etanol dos novos mutantes em comparação com os controles. Tanto os mutantes TbhDel3 quanto TbhnM18 mostraram tolerância reduzida, indicando que Tbh é crucial na forma como as moscas reagem ao etanol.
Avaliações de Movimento em Mutantes
Estudos adicionais sobre movimento mostraram que os mutantes Tbh, incluindo TbhnM18 e TbhDel3, tendem a se mover mais devagar em comparação com as moscas normais. Quando expostos a certos estressores, como sal, esses mutantes conseguem aumentar sua velocidade dramaticamente, sugerindo que suas habilidades motoras não estão fundamentalmente prejudicadas, mas podem precisar de estímulos específicos pra ativar.
Atividade Neuronal e Tbh
Ao restaurar a expressão de Tbh em neurônios específicos, os pesquisadores conseguiram identificar quais células do cérebro são necessárias pra desenvolver tolerância ao etanol. Novas ferramentas de pesquisa, como drivers Gal4, foram usadas pra marcar esses neurônios específicos. A expressão de Tbh nesses neurônios restaurou a tolerância reduzida dos mutantes.
Conclusão
A pesquisa mostra que Tbh desempenha um papel vital não só na síntese de octopamina, mas também na gestão de comportamentos e adaptação a mudanças no ambiente. Diferentes isoformas do Tbh se expressam em várias células, levando a uma diversidade funcional na síntese de neurotransmissores. A atividade do Tbh pode ser influenciada por vários fatores, sugerindo um mecanismo sofisticado por trás de como as moscas e potencialmente outros animais gerenciam suas respostas a estresses ambientais.
Esse conhecimento contribui pra nossa compreensão de como os sistemas de neurotransmissores funcionam e pode lançar luz sobre sistemas semelhantes em outras espécies, incluindo os humanos. A pesquisa contínua vai continuar a investigar as implicações mais amplas do Tbh para comportamento e fisiologia.
Título: The Drosophila tyramine-beta-hydroxylase gene encodes multiple isoforms with different functions
Resumo: The Tyramine-beta-hydroxylase (Tbh) is required for octopamine synthesis. To better understand the function of Tbh in neurotransmitter synthesis, we analyzed the molecular genetic organization of the Drosophila melanogaster Tbh gene and found that the Tbh gene encodes multiple transcripts. The transcripts differ in their 5UTR, which results in proteins that differ in their size and putative phosphorylation sites, suggesting that the Tbh function is regulated at translational and posttranslational levels. We generated a new Tbh mutant - TbhDel3 - using FLP/FRT recombination mutagenesis to remove the translational start site still that is present in TbhnM18mutants. The TbhDel3 mutants share ethanol tolerance and larval locomotion defects with the TbhnM18 mutants. But, they differ in terms of their cellular stress response. To develop normal levels of ethanol tolerance, Tbh is required in a subset of Tbh expressing neurons in the adult brain, which was identified using a newly generated Tbh-Gal4 driver. Taking advantage of a newly generated Tbh antibody serum, we show that one Tbh isoform is expressed in a group of peptidergic Hugin-positive and noradrenergic neurons uncoupling Tbh function from octopamine synthesis. The existence of different functional Tbh isoforms impacts our understanding of the regulatory mechanisms of neurotransmitter synthesis and the function of the octopaminergic neurotransmitter system in cellular processes and the regulation of behavior. Author SummaryVertebrates and insects have structurally identical signaling molecules in their nervous system, such as the neurotransmitter dopamine. But, there are also neurotransmitters that are thought to only occur in the vertebrate or insect brain. Noradrenaline is one such neurotransmitter that regulates flight and fight responses in vertebrates. In insects such as the fruit fly Drosophila melanogaster, the structurally very similar neurotransmitter octopamine is considered to be an invertebrate-specific neurotransmitter that performs similar functions to noradrenaline. The functional similarities also extend to enzymes required for synthesis. Our analysis shows that the enzyme for octopamine synthesis exists in several variations and that the connection between the enzymes and the synthesized neurotransmitter may not be as simple as presumed. Exploiting molecular, behavioral and neuroanatomical studies, we show that different variants might be used in response to different environmental conditions and/or the synthesis of alternative, structurally similar neurotransmitters, such as noradrenaline. These results challenge our view on the functions of octopamine and noradrenaline in the regulation of behavior.
Autores: Henrike Scholz, M. Ruppert, S. Hampel, N. Sambrani, O. Cibik, G. Classen, A. Duenisch, C. Fuchs, T. Kell, S. Paluri
Última atualização: 2024-06-11 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.10.598396
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.10.598396.full.pdf
Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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