Organismos Cerebrais Pequenos: Uma Nova Fronteira na Neurociência
Organoides cerebrais oferecem uma nova forma de estudar o desenvolvimento do cérebro humano e doenças.
Daniel J Lloyd-Davies Sánchez, Feline W Lindhout, Alexander J Anderson, Laura Pellegrini, Madeline A Lancaster
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Índice
- O Desafio de Estudar o Desenvolvimento do Cérebro Humano
- A Chegada dos Organoides Cerebrais Derivados de Células-Tronco
- Como os Organoides Cerebrais São Feitos
- Comparando Organoides de Camundongos e Humanos
- Desenvolvimento de Organoides Cerebrais de Camundongos
- Organoides Cerebrais Específicos de Regiões
- A Importância de Culturas de Longa Duração
- Entendendo a Maturação Neuronal
- Atividade Neuronal Funcional
- O Futuro dos Organoides Cerebrais
- Conclusão
- Fonte original
Organoides Cerebrais são estruturas minúsculas, cultivadas em laboratório, que imitam o desenvolvimento e a função do cérebro humano. Eles são feitos a partir de Células-tronco, que são células especiais que podem se transformar em qualquer tipo de célula do corpo. Os cientistas usam esses organoides para estudar o cérebro porque conseguir acesso a tecido cerebral humano para pesquisa é tão fácil quanto achar um unicórnio no seu quintal.
Assim como um chef precisa dos ingredientes certos e de uma receita para fazer uma refeição deliciosa, os pesquisadores precisam de condições e métodos específicos para criar esses organoides cerebrais. Eles conseguem cultivar organoides que representam diferentes partes do cérebro, permitindo que os cientistas vejam como as diversas células cerebrais se desenvolvem ao longo do tempo.
Pense nos organoides cerebrais como "cérebro em uma placa." Eles permitem que os cientistas olhem mais de perto como nossos cérebros crescem e funcionam sem precisar entrar na realidade bagunçada dos cérebros vivos.
O Desafio de Estudar o Desenvolvimento do Cérebro Humano
Estudar o desenvolvimento do cérebro humano é complicado. O cérebro humano é incrivelmente complexo e diferente do de outros animais. Por exemplo, o cérebro de um camundongo é bem menor e menos complicado que o cérebro humano. Quando os pesquisadores tentam estudar o cérebro humano olhando para os cérebros de camundongos, as coisas podem ficar um pouco bagunçadas.
Um dos principais desafios é que as técnicas usadas em estudos de laboratório, como in vitro (fora de um organismo vivo) e in vivo (dentro de um organismo vivo), muitas vezes não se encaixam perfeitamente. Isso pode levar a diferenças em como os achados em camundongos se traduzem em humanos.
A busca para entender o desenvolvimento do cérebro humano também enfrenta outros obstáculos. Por exemplo, o tecido cerebral humano é difícil de conseguir, e quando os pesquisadores conseguem algum, muitas vezes não conseguem experimentar com ele da mesma forma que fariam com camundongos. Há muito o que descompactar nessa teia complicada de pesquisa, mas a boa notícia é que os cientistas estão sempre buscando novas maneiras de estudar o cérebro.
A Chegada dos Organoides Cerebrais Derivados de Células-Tronco
Nos últimos anos, os cientistas descobriram uma solução incrível: organoides cerebrais derivados de células-tronco. Essas pequenas estruturas cerebrais dão aos pesquisadores a chance de observar o neurodesenvolvimento humano do conforto de suas mesas de laboratório.
Usando células-tronco, os pesquisadores conseguem criar mini-cérebros que desenvolvem características semelhantes às encontradas em verdadeiros cérebros humanos. Isso abriu caminhos emocionantes para a pesquisa, permitindo o estudo de condições cerebrais específicas, como a doença de Alzheimer e a microcefalia. Organoides cerebrais fornecem um contexto mais relevante do que modelos de camundongos, que às vezes falham em mostrar os mesmos traços de doenças vistos em humanos.
Como os Organoides Cerebrais São Feitos
Criar organoides cerebrais envolve uma série de etapas cuidadosamente cronometradas. Os cientistas começam com células-tronco e gradualmente introduzem fatores de crescimento específicos, meio que como adicionar ingredientes a uma receita. As células-tronco começam a se diferenciar e se agrupar, formando estruturas semelhantes a mini-cérebros.
Uma vez que esses organoides crescem, eles podem ser monitorados para estudar seu desenvolvimento ao longo do tempo. É como assistir a um filhote crescer; você consegue ver todas as pequenas mudanças que acontecem dia após dia.
Os pesquisadores podem até usar tecnologias como edição gênica nesses organoides, permitindo que criem modelos de doenças. Eles podem comparar como organoides de indivíduos saudáveis diferem daqueles derivados de pessoas com certas condições, dando a eles insights sobre como essas doenças funcionam.
Comparando Organoides de Camundongos e Humanos
Como o camundongo é um dos animais mais populares para pesquisa, ele é frequentemente usado como ponto de referência para comparar achados de organoides cerebrais humanos. Pode-se pensar nisso como o Mario Kart do mundo científico: pequeno, rápido e muito conhecido.
Os cérebros de camundongos e humanos têm tamanhos e formas diferentes, o que pode levar a discrepâncias em como o desenvolvimento cerebral avança nas duas espécies. Por exemplo, organoides cerebrais de camundongos frequentemente se desenvolvem mais rápido que os humanos. Se você já teve um hamster, pode saber que hamsters conseguem crescer e fazer coisas de hamster muito mais rápido que um bebê humano.
Essa diferença na velocidade de desenvolvimento pode levar a desafios ao tentar usar o que os pesquisadores aprendem com organoides de camundongos para fazer previsões sobre a função do cérebro humano. Os cientistas precisam encontrar maneiras de garantir que esses organoides realmente imitam a natureza complexa do desenvolvimento cerebral humano.
Desenvolvimento de Organoides Cerebrais de Camundongos
Pesquisas mostraram que organoides cerebrais de camundongos podem ajudar a conectar a lacuna entre camundongos e humanos em estudos de neurodesenvolvimento. Cientistas recentemente tiveram sucesso em gerar organoides cerebrais de camundongos usando um protocolo semelhante ao usado para criar organoides humanos.
Esses organoides de camundongos exibem algumas características clássicas do desenvolvimento cerebral, como o estabelecimento de camadas distintas e a presença de tipos celulares especializados. É como assistir a um mini-filme do cérebro crescendo. Com o tempo, esses organoides de camundongos também mostram sinais de maturidade, exibindo características semelhantes às encontradas em cérebros reais de camundongos.
Os pesquisadores descobriram que organoides de camundongos se desenvolvem mais rápido que organoides humanos. Por exemplo, eles atingem um estado chamado neurogênese mais cedo, o que significa que as células começam a se formar em neurônios mais rapidamente.
Essencialmente, os cientistas estão começando a aprender que organoides de camundongos podem nos ensinar muito sobre como o cérebro amadurece e as melhores maneiras de estudar doenças sem precisar passar por todos aqueles obstáculos associados aos testes tradicionais em animais.
Organoides Cerebrais Específicos de Regiões
Assim como uma cidade tem diferentes bairros, os organoides cerebrais também podem ser projetados para representar regiões específicas do cérebro. Esses organoides específicos de regiões permitem que os pesquisadores estudem as características e funções únicas de diferentes partes do cérebro.
Por exemplo, os pesquisadores podem criar organoides que imitam o plexo coróide — uma parte do cérebro responsável pela produção do líquido cefalorraquidiano (LCR). O LCR é super importante porque protege o cérebro e ajuda a transportar nutrientes.
Usando sinais específicos para guiar o desenvolvimento desses organoides, os pesquisadores podem criar miniaturas do plexo coróide que se parecem muito com seus equivalentes funcionais em animais vivos. Isso significa que os cientistas podem estudar doenças relacionadas à produção de LCR ou entender como a barreira sangue-LCR funciona.
A Importância de Culturas de Longa Duração
Um dos aspectos mais legais desses organoides é como eles podem ser mantidos a longo prazo. Ao fatiar os organoides e colocá-los em um setup de cultura especial chamado de interface ar-líquido (ALI), os pesquisadores conseguem mantê-los vivos por períodos prolongados.
Esse método permite que eles observem a interação de diferentes células cerebrais ao longo do tempo. Pense nisso como convidar seus amigos para uma festa longa — quanto mais tempo eles passam juntos, melhor eles se conhecem.
À medida que os organoides amadurecem, eles desenvolvem estruturas mais complexas, incluindo conexões sinápticas, semelhantes às encontradas em tecido cerebral real. Isso ajuda os cientistas a entender como as células cerebrais se comunicam e formam redes, fornecendo insights vitais sobre a função cerebral e doenças.
Entendendo a Maturação Neuronal
Como aprendemos antes, o caminho para neurônios maduros é longo. Neurônios passam por muitas mudanças à medida que crescem, muito parecido com adolescentes tentando descobrir seu estilo.
Nos organoides de camundongos, os pesquisadores podem rastrear essas mudanças por meio de imunomarcação, uma técnica que destaca diferentes tipos celulares e suas características. Eles conseguem ver o desenvolvimento de axônios (as projeções longas dos neurônios) e dendritos (as estruturas ramificadas que recebem sinais de outros neurônios).
À medida que essas estruturas amadurecem, elas estabelecem redes funcionais que permitem a comunicação entre diferentes partes do organoide. Isso significa que os pesquisadores podem estudar como os neurônios formam conexões e funcionam juntos, o que é super importante para entender condições como autismo, epilepsia e outros distúrbios neurológicos.
Atividade Neuronal Funcional
O que é ainda mais impressionante é que esses organoides de camundongos podem exibir atividade elétrica semelhante à de neurônios reais. Isso significa que os cientistas podem realmente medir e observar como esses neurônios estão "disparando" e se comunicando entre si.
Usando setups especiais, como matrizes de multieletrodos, os pesquisadores podem capturar e analisar os sinais elétricos gerados pelos organoides. É como colocar pequenos microfones na festa do organoide para ver quem está conversando com quem e com que frequência.
Ao estudar essas atividades elétricas, os pesquisadores podem aprender muito sobre como os neurônios se comportam, incluindo seus padrões de disparo e velocidades de condução. Essas informações ajudam a comparar a atividade dos organoides com a de tecido cerebral real, proporcionando uma compreensão mais clara de como o cérebro funciona em saúde e doença.
O Futuro dos Organoides Cerebrais
A pesquisa sobre organoides cerebrais ainda está em andamento, com cientistas trabalhando para refinar suas técnicas e criar modelos ainda mais sofisticados. Esses avanços podem levar a descobertas em nossa compreensão de várias condições neurológicas e abrir caminho para novos tratamentos.
Organoides cerebrais também podem desempenhar um papel na medicina personalizada. Os pesquisadores podem eventualmente ser capazes de criar organoides a partir das próprias células de um paciente, permitindo que eles testem diferentes tratamentos e vejam qual funciona melhor. Imagine poder encontrar o remédio certo para o seu cérebro sem precisar adivinhar e testar como se estivesse experimentando sapatos.
No geral, organoides cerebrais oferecem um caminho promissor para a pesquisa que pode conectar estudos tradicionais em animais e aplicações humanas. Eles fornecem aos cientistas uma ferramenta única para investigar os mistérios do cérebro, programando a próxima geração de pesquisa neurológica enquanto reduzem a dependência de animais vivos.
Conclusão
Em conclusão, organoides cerebrais estão transformando a maneira como os pesquisadores estudam o cérebro. Ao mimetizar o desenvolvimento cerebral humano, eles permitem que os cientistas obtenham insights sobre o funcionamento interno do cérebro e suas doenças associadas.
Por meio de técnicas que criam organoides específicos de regiões e culturas de longa duração, os pesquisadores podem observar o desenvolvimento cerebral como nunca antes. À medida que desbloqueamos o potencial desses mini-cérebros notáveis, o futuro parece promissor para a neurociência, oferecendo novas esperanças para entender e tratar condições relacionadas ao cérebro.
Então, da próxima vez que alguém mencionar "organoides cerebrais", você pode sorrir sabendo, talvez imaginando pequenos cérebros fazendo uma festa em uma placa, tudo enquanto aprende sobre a fascinante jornada do desenvolvimento cerebral. Quem diria que a ciência poderia ser tão divertida?
Fonte original
Título: Mouse brain organoids model in vivo neurodevelopment and function and capture differences to human
Resumo: In the last decade since their emergence, brain organoids have offered an increasingly popular and powerful model for the study of early development and disease in humans. These 3D stem cell-derived models exist in a newer space at the intersection of in vivo and 2D in vitro models. Functional benchmarking has so far remained largely uncharacterised however, leaving the extent to which these models may accurately portray in vivo processes still yet to be fully realised. Here we present a standardised unguided protocol to generate brain organoids from mice, the most commonly-used in vivo mammalian model; and in parallel establish a guided protocol for generating region-specific choroid plexus mouse organoids. Both unguided and guided mouse organoids progress through neurodevelopmental stages with an in vivo-like tempo and recapitulate species-specific characteristics of neural and choroid plexus development, respectively. Neuroepithelial cells generate neural progenitors that give rise to different neural subtypes including deep-layer neurons, upper-layer neurons, and glial cells. We further adapted protocols to prolong mouse cerebral organoid (CO) cultures as slices at the air-liquid interface (ALI), enhancing accessibility for long-term studies and functional investigations. In mature mouse ALI-COs, we observed mature glia, as well as synaptic structures and long-range axon tracts projecting to distant regions, suggesting an establishment and maturation of neural circuitry. Indeed, functional analyses with high-density multi-electrode arrays (HD-MEAs) indicate comparable activity to ex vivo organotypic mouse brain slices. Having established protocols for both region-specific and unpatterned mouse brain organoids, we demonstrate that their neurodevelopmental trajectories, and resultant mature features, closely mimic the in vivo models to which they are benchmarked across multiple biochemical, morphological, and functional read-outs. We propose that mouse brain organoids are a valuable model for functional studies, and provide insight into how closely brain organoids of other species, such as human, may recapitulate their own respective in vivo development.
Autores: Daniel J Lloyd-Davies Sánchez, Feline W Lindhout, Alexander J Anderson, Laura Pellegrini, Madeline A Lancaster
Última atualização: 2024-12-24 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.21.629881
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.21.629881.full.pdf
Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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