Approfondimenti sui motori flagellari batterici
La ricerca svela i percorsi evolutivi dei meccanismi di movimento dei batteri.
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Indice
- Come Funziona il Motore Flagellare
- L'Origine del Motore Flagellare
- Relazioni Filogenetiche
- Risultati Principali sui Statori Flagellari
- Caratteristiche Strutturali di FIT e GIT
- L'Importanza del Dominio TGI
- Evoluzione delle Caratteristiche Strutturali
- Differenze nei Meccanismi di Motilità
- Conduzione di Assay di Motilità
- Conclusioni
- Futuri Sviluppi
- Fonte originale
- Link di riferimento
I batteri sono piccole cose viventi che devono muoversi per sopravvivere. Uno dei modi più antichi che usano è sfruttare delle strutture chiamate flagelli, che sono come piccole code. Questi flagelli permettono ai batteri di nuotare e cambiare direzione. Il movimento di questi flagelli è controllato da una macchina speciale nei batteri chiamata Motore Flagellare Batterico (BFM). Questo motore fa girare i flagelli per spingere i batteri nell'ambiente circostante.
Come Funziona il Motore Flagellare
Il BFM funziona usando un sistema che converte l'energia degli ioni-piccole particelle cariche- in movimento. Questo sistema è composto da due parti principali: la subunità A e la subunità B. Insieme, queste subunità creano un canale che permette agli ioni di passare attraverso la membrana interna dei batteri. Quando gli ioni passano, fanno girare il motore e muovere i flagelli.
Dentro il motore, la subunità A si collega a una parte chiamata FliG, che è fondamentale per la rotazione dei flagelli. Questa connessione è davvero importante per il movimento dei batteri ed è stata trovata simile tra diversi tipi di batteri, il che significa che è stata preservata attraverso l'evoluzione.
L'Origine del Motore Flagellare
Gli scienziati credono che il BFM esista da molto tempo, anche prima che esistessero i batteri moderni. Si pensa che sia evoluto da sistemi più semplici che usavano ioni per trasportare sostanze attraverso la membrana esterna dei batteri. La presenza di sistemi simili in molti tipi di batteri suggerisce che questi sistemi condividano un antenato comune. Questo potrebbe significare che comprendere l'evoluzione del motore flagellare può fornire informazioni sulle prime fasi della vita batterica.
Relazioni Filogenetiche
Nel nostro studio, abbiamo esaminato come i componenti del motore flagellare siano correlati ad altre strutture simili nei batteri. Abbiamo raccolto informazioni da 193 genomi batterici diversi per vedere come questi componenti si siano evoluti nel tempo. Abbiamo usato varie tecniche, inclusa l'allineamento delle sequenze proteiche, per costruire un quadro di come le diverse proteine batteriche siano collegate tra loro.
Durante la nostra ricerca, abbiamo trovato un totale di 746 potenziali corrispondenze proteiche per la subunità A e abbiamo creato con successo un dataset per la subunità B esaminando i geni attorno ad essa. Abbiamo scoperto che mentre le proteine delle subunità A avevano sequenze più simili, le subunità B erano più varie e più difficili da confrontare.
Risultati Principali sui Statori Flagellari
Quando abbiamo analizzato le relazioni tra le subunità A e B, abbiamo visto che formano due gruppi principali. Il primo gruppo include i motori flagellari ben noti, come quelli di E. coli, mentre il secondo gruppo è composto da proteine che svolgono funzioni diverse ma hanno caratteristiche strutturali simili.
Abbiamo chiamato il primo gruppo Trasportatori di Ioni Flagellari Batterici (FIT) e il secondo gruppo Trasportatori di Ioni Generici Batterici (GIT). Il gruppo FIT include principalmente proteine di batteri Gram-negativi come E. coli, mentre il gruppo GIT contiene un mix di batteri Gram-positivi e Gram-negativi.
Caratteristiche Strutturali di FIT e GIT
Attraverso la nostra analisi, abbiamo trovato che le proteine FIT hanno strutture uniche. Hanno un dominio speciale che aiuta a generare la forza necessaria per far girare i flagelli. Le proteine GIT, d'altra parte, mostrano più varietà nella loro struttura, specialmente alle estremità. Mancano anche di alcune caratteristiche chiave trovate nelle proteine FIT, il che suggerisce che potrebbero essersi evolute per svolgere ruoli diversi.
Nel nostro studio, abbiamo osservato da vicino le caratteristiche strutturali di queste proteine usando strumenti di previsione. Abbiamo notato che le proteine FIT hanno una piega quadrata distintiva e sono capaci di interagire con la parte rotorica del motore. Questo è fondamentale per la loro funzione come motori flagellari. Abbiamo scoperto che queste caratteristiche sono assenti nelle proteine GIT, mostrando che, sebbene siano correlate, si sono divise in percorsi diversi.
L'Importanza del Dominio TGI
Abbiamo esaminato specificamente una sezione della subunità A chiamata Interfaccia Generatrice di Torque (TGI). Questo dominio è vitale per il movimento dei batteri. Quando abbiamo sperimentato rimuovendo parti di questo dominio negli E. coli, i batteri hanno perso la capacità di muoversi. Questo risultato sottolinea quanto sia essenziale questa parte della proteina per la funzione del motore flagellare.
Evoluzione delle Caratteristiche Strutturali
Abbiamo anche esaminato come queste caratteristiche strutturali potrebbero essersi evolute nel tempo. La nostra ricerca suggerisce che l'antenato comune delle proteine FIT avesse una forma più semplice, e nel tempo, hanno sviluppato strutture più complesse. Questa progressione evolutiva indica come diverse pressioni ambientali possano aver spinto lo sviluppo di questi motori per aiutare a superare varie sfide affrontate dai batteri.
Differenze nei Meccanismi di Motilità
Abbiamo trovato che i due sottogruppi all'interno delle proteine FIT potrebbero utilizzare metodi diversi per interagire con i loro componenti rotorici. Il sottogruppo TGI4 ha una struttura leggermente diversa rispetto al sottogruppo TGI5. Questo potrebbe significare che regolano il movimento in modi distinti, anche se sono necessari ulteriori esperimenti per confermarlo.
Conduzione di Assay di Motilità
Per approfondire la questione, abbiamo condotto assay di motilità con diverse varianti della proteina MotA. Abbiamo modificato il dominio TGI e testato come questi cambiamenti influenzassero la capacità di movimento dei batteri. I risultati hanno chiaramente dimostrato che le proteine con sezioni del TGI eliminate non erano in grado di spingersi, evidenziando l'importanza di questo dominio.
Conclusioni
Il nostro studio fa luce sulle diverse relazioni e caratteristiche strutturali dei motori flagellari attraverso vari tipi di batteri. Comprendere queste connessioni aiuta a dipingere un quadro più ampio di come questi piccoli organismi si siano evoluti e adattati ai loro ambienti.
Abbiamo anche scoperto che le caratteristiche strutturali uniche delle proteine FIT non sono presenti nelle proteine GIT, suggerendo una separazione nei loro percorsi evolutivi. I risultati indicano che, sebbene ci siano molte somiglianze tra i batteri, ci sia anche una notevole diversità nel modo in cui funzionano e si muovono, il che ha importanti implicazioni per comprendere il comportamento e l'ecologia batterica.
Futuri Sviluppi
Guardando al futuro, le conoscenze ottenute da questo studio possono aprire la strada a ulteriori indagini sui ruoli di queste proteine nei diversi stili di vita batterici. La ricerca futura potrebbe concentrarsi sulle funzioni sconosciute di vari domini, in particolare nelle proteine GIT. Comprendere queste funzioni potrebbe portare a scoprire nuovi meccanismi biologici.
In generale, il nostro lavoro contribuisce al crescente campo della microbiologia, fornendo preziose intuizioni sulle complessità del movimento batterico e le forze evolutive che hanno plasmato questi sistemi nel corso di milioni di anni.
Titolo: Molecular and structural innovations of the stator motor complex at the dawn of flagellar motility
Estratto: The rotation of the bacterial flagellum is powered by the MotAB stator complex, which converts ion flux into torque. The origin and evolution of this remarkable complex is understudied. Here, we perform the first phylogenetic and structural characterisation and classification of MotAB and nonflagellar relatives. Using 193 genomes sampled across 27 bacterial phyla, we estimated phylogenies and ancestral sequences, and generated AlphaFold predictions for all extant and reconstructed proteins. We then mapped them onto the phylogeny to determine patterns of diversity and distribution of structural innovations. We identify two discrete groups: the Flagellar Ion Transporters (FIT) and the Generic Ion Transporters (GIT). The FIT proteins are structurally conserved and have a square fold domain and a torque-generating interface (TGI). FIT proteins are divided into two clades, termed TGI4 and TGI5, referring to whether there have 4 or 5 short helices in the TGI. TGI5 motors are predominantly found in Proteobacteria and include the well-studied E. coli K12 system, while TGI4 motors are found in diverse phyla and include the Na+-powered polar motors of Vibrio (PomAB). The GIT proteins, on the other hand, are structurally diverse and lack these attributes. The interaction between the A and B subunits is conserved across the FIT and GIT proteins. The two subunits are jointly necessary for function, with the genes typically adjacent within an operon. Motility assays in E. coli show that the structural elements unique to FIT play an important role in flagellar motility. Our results indicate that the stator motor complex has a single origin and shares unique motility-related structural traits. Significance StatementFlagellar motility is a key feature in bacterial pathogenicity and survival. It allows bacteria to propel themselves and direct movement according to environmental conditions. We investigated the molecular and structural diversity of the stator motor proteins that provide the ion motive force to power flagellar rotation. This study integrates phylogenetics, 3D protein structure modeling, motility assays and ancestral state reconstruction (ASR) to provide insights into the structural mechanisms that first powered the flagellar motor. We provide the first phylogenetic and structural characterisation and classification of MotAB and relatives.
Autori: Matthew AB Baker, C. Puente-Lelievre, P. Ridone, J. Douglas, K. Amritkar, B. Kacar, N. J. Matzke
Ultimo aggiornamento: 2024-07-23 00:00:00
Lingua: English
URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.22.604496
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.22.604496.full.pdf
Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
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