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Nuova Speranza Contro le Infezioni Resistenti agli Antibiotici

La ricerca mostra che i fagi ingegnerizzati potrebbero combattere i batteri resistenti ai farmaci in modo sicuro.

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Gli antibiotici sono farmaci usati per combattere le infezioni causate da batteri. Ci sono molti tipi di antibiotici, chiamati antibiotici ad ampio spettro, che possono trattare una vasta gamma di infezioni batteriche. Tuttavia, usare questi antibiotici troppo spesso può portare alla creazione di batteri che non rispondono ai trattamenti, noti come batteri multi-resistenti (MDR). Quando le persone si ammalano a causa di questi batteri resistenti, possono avere ospedalizzazioni più lunghe e un rischio maggiore di morte. Inoltre, l'abuso di antibiotici può danneggiare i batteri benefici nel nostro corpo, portando ad altri problemi di salute, comprese le malattie croniche.

Batteriofagi come opzione di trattamento

Una delle alternative in fase di ricerca per le infezioni causate da batteri MDR sono i batteriofagi. I batteriofagi, o fagi per breve, sono virus che infettano e uccidono i batteri. L'idea di usare i fagi per trattare le infezioni batteriche esiste da oltre cento anni, ma oggi sta riacquistando interesse. Gli studi mostrano che i fagi possono trattare con successo le infezioni causate da batteri MDR e possono persino funzionare bene insieme agli antibiotici tradizionali.

Limitazioni della terapia con fagi

Nonostante il successo della terapia con fagi, ci sono ancora delle sfide da considerare. I fagi mirano naturalmente a batteri specifici. Alcuni fagi potrebbero non essere efficaci contro certi ceppi di batteri. I batteri possono anche sviluppare resistenza ai fagi, proprio come possono diventare resistenti agli antibiotici. C'è anche preoccupazione che i fagi possano influenzare altri batteri benefici nel corpo.

Per espandere l'uso della terapia con fagi, gli scienziati stanno cercando modi per modificare i fagi. Questo include renderli in grado di mirare a una varietà più ampia di batteri, migliorando la loro capacità di uccidere e assicurandosi che non influenzino altri batteri nel corpo.

Preoccupazioni normative

Un'altra sfida con la terapia con fagi è garantire il loro uso sicuro. Le autorità regolatorie sono caute riguardo a come i fagi ingegnerizzati possano comportarsi nel corpo umano o nell'ambiente. Una soluzione per affrontare queste preoccupazioni sulla sicurezza è creare sistemi che impediscano ai fagi ingegnerizzati di diffondersi oltre il loro uso previsto. Questo implica modificare il patrimonio genetico dei fagi in modo che possano replicarsi solo in condizioni o ambienti specifici.

Creazione di un sistema di biocontenimento per i fagi

In questo studio, i ricercatori hanno sviluppato un modo semplice per creare un sistema di biocontenimento per i fagi. Questo sistema si basa su un tipo speciale di materiale genetico chiamato tRNA soppressore ambra, che consente al Fago di replicarsi solo in presenza di questo materiale genetico specifico. Ingenerizzando i fagi affinché dipendano da questo tRNA ambra, i ricercatori possono impedire loro di replicarsi e diffondersi in modi indesiderati quando questo tRNA è assente.

Il sistema è stato testato utilizzando diversi ceppi batterici per assicurarsi che funzionasse efficacemente. I fagi ingegnerizzati potevano ancora infettare e uccidere i batteri bersaglio senza danneggiare i ceppi non bersaglio.

Metodi usati nello studio

Batteri e condizioni di crescita

Lo studio ha utilizzato diversi ceppi di batteri E. coli. Questi ceppi sono stati coltivati in un brodo nutriente speciale per prepararli agli esperimenti. L'obiettivo era vedere come si comportavano i fagi ingegnerizzati quando venivano introdotti in questi batteri.

Creazione di mutanti del fago

I ricercatori hanno progettato versioni mutanti di un fago specifico chiamato ϕX174. Hanno alterato alcuni geni in questi fagi per renderli dipendenti dal tRNA ambra. Questo è stato fatto attraverso una serie di passaggi pianificati con cura per garantire che i mutanti funzionassero correttamente.

Test dell'efficacia del fago

I ricercatori hanno testato questi fagi modificati esponendoli a vari batteri. Hanno osservato quanto bene i fagi potevano infettare e uccidere i batteri, assicurandosi che non influenzassero altri ceppi che non erano destinati ad essere bersagliati.

Osservazioni dagli esperimenti

Gli esperimenti hanno mostrato che i fagi ingegnerizzati erano efficaci nell'infettare i batteri bersaglio, portando alla morte cellulare. Inoltre, quando il tRNA ambra non era presente, questi fagi non potevano replicarsi, il che ha minimizzato il rischio di diffusione incontrollata.

Prestazioni contro diversi ceppi batterici

Lo studio ha trovato che i diversi fagi ingegnerizzati si comportavano in modo diverso a seconda del ceppo batterico che stavano prendendo di mira. Alcuni mostrano una forte lisi, o distruzione dei batteri, mentre altri erano meno efficaci. Questa variazione sottolinea l'importanza di testare i fagi su più ceppi batterici per garantire l'efficacia.

Effetti sui batteri non bersaglio

I fagi ingegnerizzati sono stati testati su ceppi batterici non bersaglio per confermare che non li avrebbero danneggiati. I risultati hanno indicato che anche a concentrazioni elevate, i fagi non influenzavano la crescita di questi ceppi non bersaglio. Questa scoperta è significativa perché dimostra che il sistema di biocontenimento aiuta a focalizzare il trattamento con fagi solo sui batteri dannosi.

Implicazioni per la terapia con fagi

Lo studio suggerisce che il sistema di biocontenimento descritto potrebbe consentire un uso più ampio della terapia con fagi. Fornisce agli scienziati uno strumento per garantire che i fagi non possano replicarsi e diffondersi in modi non desiderati. Poiché la terapia con fagi offre una potenziale soluzione alla resistenza agli antibiotici, avere un metodo affidabile e sicuro per utilizzare questi trattamenti potrebbe essere molto importante per la salute pubblica.

Direzioni future

Ci sono ancora molte cose da considerare per il futuro. Il sistema di biocontenimento è attualmente progettato per E. coli, ma potrebbe essere adattato per altri tipi di batteri. Serve più ricerca per migliorare ulteriormente il sistema e valutare la sua efficacia su scala più ampia.

Il costo di produzione dei fagi ingegnerizzati potrebbe essere un ostacolo per un uso diffuso. Tuttavia, i ricercatori credono che con metodi migliori per creare questi fagi, i costi possano essere gestiti. Se avranno successo, questo potrebbe portare a opzioni di trattamento più accessibili per le infezioni batteriche.

Conclusione

Usare fagi ingegnerizzati rappresenta una strada promettente per trattare le infezioni causate da batteri resistenti agli antibiotici. Lo sviluppo di un sistema di biocontenimento che impedisce ai fagi di diffondersi troppo è cruciale per garantire il loro uso sicuro. La continua ricerca sulla terapia con fagi aiuterà a affrontare le limitazioni attuali e aprirà la strada a trattamenti innovativi che potrebbero salvare vite nella lotta contro le infezioni batteriche.

Fonte originale

Titolo: Designing a simple and efficient phage biocontainment system using the amber suppressor

Estratto: Multidrug-resistant infections are becoming increasingly prevalent worldwide. One of the fastest emerging alternative and adjuvant therapies being proposed is phage therapy. Naturally-isolated phages are used in the vast majority of phage therapy treatments today. Engineered phages are being developed to enhance the effectiveness of phage therapy, but concerns over their potential escape remains a salient issue. To address this problem, we designed a biocontained phage system based on conditional replication using amber stop codon suppression. This system can be easily installed on any natural phage with a known genome sequence. To test the system, we mutated the start codons of three essential capsid genes in the phage {phi}X174 to the amber stop codon (TAG). These phages were able to efficiently infect host cells expressing the amber initiator tRNA, which suppresses the amber stop codon and initiates translation at TAG stop codons. The amber phage mutants were also able to successfully infect host cells and reduce their population on solid agar and liquid culture but could not produce infectious particles in the absence of the amber initiator tRNA or complementing capsid gene. We did not detect any growth-inhibiting effects on E. coli strains known to lack a receptor for {phi}X174, and we show that engineered phages have a limited propensity for reversion. The approach outlined here may be useful to control engineered phage replication in both the lab and clinic.

Autori: Paul R Jaschke, P. R. Tsoumbris, R. Vincent

Ultimo aggiornamento: 2024-07-29 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.29.605542

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.29.605542.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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