Combattere la Legionella: il ruolo dei batteri nel controllo delle infezioni
La ricerca rivela come alcuni batteri combattono efficacemente le specie di Legionella.
Alessio Cavallaro, Silke Probst, Tobias Duft, Max Rieder, Oliver Abo El Fateh, Josch Stricker, Marco Gabrielli, Serina Robinson, Frederik Hammes
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Indice
I batteri della Legionella sono dei piccoli furfanti che si possono trovare nell'acqua. Possono causare una malattia seria chiamata malattia dei Legionari, che sta diventando sempre più comune in giro per il mondo. Il più noto del gruppo è la Legionella pneumophila, responsabile di oltre il 90% dei casi. Ci sono più di 70 altre specie di Legionella, alcune delle quali possono anche causare malattie negli esseri umani. Anche se sappiamo molto su L. pneumophila, non si presta molta attenzione ai suoi cugini meno famosi.
Questi batteri tendono a stare in posti come i sistemi idraulici degli edifici e le torri di raffreddamento. Purtroppo, possono essere abbastanza difficili da eliminare perché hanno dei trucchi sotto la manica, come formare strati protettivi chiamati biofilm e allearsi con altre piccole creature chiamate protisti.
Batteri in Azione
Negli ultimi anni, la gente ha cercato potenziali supereroi batterici che possano combattere contro la Legionella. Alcuni scienziati hanno diviso questi eroi in cinque gruppi in base alla loro origine. Ci sono proteine provenienti da altri organismi, piccoli peptidi di proteine creati in laboratorio, peptidi antimicrobici (che sono come le armi segrete dei batteri), oli essenziali (sì, proprio quelli dell'aromaterapia) e sostanze chiamate Biosurfattanti (pensa a loro come alla versione sapone dei batteri).
Tuttavia, molti di questi composti sono stati scoperti in laboratorio e potrebbero non funzionare affatto nel mondo reale dove la Legionella prospera.
Una Competizione Batterica
I ricercatori hanno portato le cose a un altro livello testando quanto bene altri batteri provenienti da fonti d'acqua possono combattere la Legionella. Uno studio ha analizzato 80 batteri provenienti dall'acqua del rubinetto e ha scoperto che circa la metà poteva rallentare almeno uno dei ceppi di Legionella. Altri studi hanno trovato risultati simili, in cui certi batteri sono stati messi alla prova contro la Legionella e hanno avuto vari gradi di successo.
Curiosamente, i vincitori di queste battaglie erano per lo più della famiglia Pseudomonas. Questi batteri sono noti per produrre tutti i tipi di sostanze che possono ostacolare i loro vicini, inclusa la Legionella.
Ma c'è un problema: mentre sappiamo che alcuni batteri possono fermare L. pneumophila, non sappiamo molto su come affrontano altri tipi di Legionella. È come concentrarsi su un solo film di supereroi ignorando tutti gli altri personaggi dell'universo.
La Nostra Missione
In questo studio, abbiamo deciso di trovare più batteri che potessero affrontare la Legionella e vedere come si comportano contro le diverse specie di Legionella. Abbiamo raccolto campioni d'acqua da varie località in Svizzera e cercato batteri che potessero aiutarci.
Il nostro obiettivo era:
- Trovare batteri che possono inibire la crescita della Legionella.
- Capire come diverse specie di Legionella rispondono a questi batteri antagonisti.
- Cercare strumenti genetici che questi batteri possono avere per produrre composti utili nella lotta.
Raccolta di Batteri
Abbiamo raccolto campioni d'acqua in bottiglie speciali e li abbiamo piantati su vari terreni di crescita per vedere chi poteva crescere. Dopo averli lasciati tranquilli per qualche giorno, abbiamo selezionato colonie distinte e le abbiamo fatte crescere in forma liquida per conservarle per uso futuro.
Per la Legionella, abbiamo usato un ceppo di riferimento per standardizzare i nostri test. Questo ceppo proveniva da una collezione tedesca di microrganismi, e abbiamo anche acquisito altri ceppi di Legionella conosciuti dalla Svizzera.
Il Test Spot-On-Lawn
Per valutare l'efficacia dei batteri che abbiamo isolato, abbiamo usato un metodo chiamato spot-on-lawn assays. Ecco come funziona: abbiamo fatto crescere la Legionella su piastre di agar, poi abbiamo aggiunto i nostri batteri antagonisti per vedere se potevano fermare la crescita della Legionella. Se lo facevano, avremmo visto delle zone chiare intorno ai batteri dove la Legionella non poteva crescere.
Abbiamo trovato diversi isolati che potevano inibire diversi ceppi di Legionella. Abbiamo notato che alcuni batteri erano più riusciti di altri e abbiamo anche tenuto traccia di quanto fosse efficace ciascun antagonista.
Analisi del Genoma
Poi, abbiamo esaminato più da vicino i genomi dei nostri batteri selezionati usando tecniche di sequenziamento avanzate. Esaminando il loro DNA, potevamo identificare potenziali composti che potrebbero spiegare come questi batteri inibissero la Legionella.
Abbiamo scoperto un tesoro di cluster genetici nei genomi dei batteri legati a vari composti. Una scoperta significativa è stata qualcosa chiamato cluster genici biosintetici di peptidi non ribosomiali (NRP), spesso responsabili della creazione di potenti composti antimicrobici.
Tra questi composti, abbiamo trovato un forte interesse per una sostanza chiamata viscosina. Questo è un lipopeptide prodotto da alcune specie di Pseudomonas, noto per le sue proprietà antimicrobiche.
Test per il Successo
Per verificare se i composti erano presenti nei supernatanti dei nostri batteri co-coltivati, abbiamo effettuato un'estrazione liquido-liquido. Questo processo aiuta a separare le sostanze prodotte dai nostri batteri, così potevamo analizzarle ulteriormente.
Durante la nostra analisi usando cromatografia liquida e spettrometria di massa, abbiamo confermato che la viscosina e altri composti correlati erano effettivamente presenti. Questo è stato un importante passo avanti perché indicava che la viscosina potrebbe essere un attore principale nell'inibire la Legionella.
Targeting la Legionella
Mentre esaminavamo il comportamento antagonista dei nostri batteri, abbiamo trovato una varietà di modelli di inibizione contro diverse specie di Legionella. Alcuni antagonisti erano davvero bravi a fermare ceppi specifici, mentre altri avevano un range più ampio. Ad esempio, L. anisa, una specie di Legionella, era particolarmente vulnerabile a diversi dei nostri antagonisti. D'altro canto, alcuni ceppi di L. pneumophila avevano risultati misti quando esposti agli stessi antagonisti.
Questa variabilità suggerisce che diverse specie di Legionella possono essersi adattate a resistere a certi batteri, mentre rimangono suscettibili ad altri. È un po' come un gioco di dodgeball dove alcuni giocatori possono schivare certi tiri mentre altri vengono colpiti facilmente.
Lezioni Apprese
La nostra ricerca ha messo in evidenza l'importanza di osservare la diversità sia della Legionella che dei batteri che le inibiscono. Le interazioni tra questi attori microbici possono dirci molto sui loro ruoli nell'ambiente.
Inoltre, i nostri risultati supportano l'idea che biosurfattanti come la viscosina potrebbero essere strumenti preziosi nella lotta contro la Legionella. Questi composti hanno il potenziale di offrire un'alternativa più ecologica ai tradizionali disinfettanti chimici, specialmente in posti come torri di raffreddamento e sistemi idraulici.
Anche se serve più ricerca per capire come queste interazioni si svolgono in contesti reali, i nostri risultati sono un passo avanti per svelare i misteri della Legionella e dei suoi antagonisti.
Conclusione
Alla fine, abbiamo scoperto che molti batteri possono inibire diverse specie di Legionella, ma i risultati variano. Questo evidenzia la necessità di ulteriori ricerche su come le specie di Legionella interagiscano con altri microrganismi. Abbiamo anche identificato la viscosina, un candidato promettente per studi futuri come strategia ecologica per controllare la Legionella in vari ambienti acquatici.
Con un po' di umorismo, possiamo paragonare la lotta tra i batteri buoni e la Legionella a una soap opera dove eroi e cattivi cercano costantemente di rubare la scena. Chi avrebbe mai pensato che i batteri potessero essere così intriganti? Il mondo microbico è pieno di drama e potenziale, e noi stiamo appena iniziando a scoprire!
Alla fine, possiamo trarre il messaggio che la natura ha i suoi modi per mantenere l'equilibrio, e studiando queste interazioni, possiamo imparare a sfruttarle per il bene comune.
Titolo: Variable inhibition of different Legionella species by antagonistic bacteria
Estratto: The genus Legionella includes opportunistic pathogens inhabiting engineered aquatic ecosystems, where managing their presence and abundance is crucial for public health. In these environments, Legionella interact positively or negatively with multiple members of the microbial communities. Here, we identified bacteria and compounds with Legionella-antagonistic properties. We isolated 212 bacterial colonies from various water sources in Switzerland and screened them for their ability to inhibit one reference strain of L. pneumophila. Ten selected antagonistic isolates were subsequently tested with spot-on-lawn-assays for inhibition towards seven environmental and two clinical isolates of Legionella, representing different species and strains. The antagonists produced highly variable inhibition patterns, highlighting distinct differences in susceptibility among Legionella species, and even strains. Only three isolates, all identified as Pseudomonas lurida, inhibited all Legionella species. Furthermore, we analysed the genomes of the antagonistic bacteria, and identified genes for several probable inhibitory compounds. We specifically found the gene cluster for the biosurfactant viscosin to be uniquely encoded by three Pseudomonas lurida isolates. This compound was subsequently detected in the supernatant of co-cultures inoculated with the antagonists and Legionella. This study provides new insights on the ability of aquatic microorganisms to compete with Legionella in controlled laboratory settings. It also highlights the diversity across and within Legionella species in their resistance to external antagonistic stress, and confirms the anti-Legionella activity of selected biosurfactants. These results can contribute to the understanding of how different species inhabit separate niches in the environment, and expand the discussion around alternative Legionella mitigation strategies.
Autori: Alessio Cavallaro, Silke Probst, Tobias Duft, Max Rieder, Oliver Abo El Fateh, Josch Stricker, Marco Gabrielli, Serina Robinson, Frederik Hammes
Ultimo aggiornamento: 2024-11-29 00:00:00
Lingua: English
URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.11.27.625680
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.11.27.625680.full.pdf
Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
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