Il Ruolo della Tensione nelle Funzioni del DNA
Esaminare come la tensione del DNA influenzi la copiatura e la lettura dei geni.
Michelle D Wang, P. M. Hall, L. M. Mayse, L. Bai, M. B. Smolka, B. F. Pugh
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Indice
- Il Ruolo della Tensione nei Processi del DNA
- Mappare la Tensione nel DNA
- Sviluppare un Nuovo Metodo
- La Relazione Tra Tensione ed Espressione genica
- Comprendere la Tensione Tra Gene Vicini
- Collegare Tensione e Struttura del Genoma
- L'Importanza di una Misurazione Accurata della Tensione
- Conclusione
- Fonte originale
Il DNA, la molecola che contiene la nostra informazione genetica, ha una struttura specifica che sembra una scala attorcigliata. Questa struttura può creare tensione quando il DNA viene copiato o quando viene letto per fare proteine. Questa tensione può causare problemi alle proteine che aiutano in questi processi. Una proteina importante coinvolta nella lettura del DNA si chiama RNA polimerasi. Si muove lungo il DNA, e quando il suo movimento è limitato, il DNA si attorciglia. Questo attorcigliamento crea diversi tipi di tensione nel DNA.
Il Ruolo della Tensione nei Processi del DNA
Quando l'RNA polimerasi si muove, crea due tipi di tensione: negativa e positiva. La tensione negativa si verifica dietro l'RNA polimerasi, mentre la tensione positiva avviene davanti a essa. Questo può rendere più difficile il lavoro dell'RNA polimerasi e può anche influenzare altre proteine che aiutano a rilassare questa tensione. Le Topoisomerasi sono enzimi che aiutano ad alleviare questa tensione. Sono fondamentali per la crescita della cellula e per il corretto funzionamento del DNA.
Curiosamente, un po' di tensione può essere vantaggiosa. La tensione negativa può effettivamente aiutare nei processi che richiedono che il DNA si svolga, come quando il DNA viene copiato o riparato. La tensione positiva può aiutare a rimuovere le proteine che sono d'intralcio e può assistere nell'organizzazione del DNA all'interno della cellula.
Mappare la Tensione nel DNA
Per studiare gli effetti della tensione nel DNA, gli scienziati devono trovare un modo per misurarla con precisione. Questo richiede sensori speciali che si attaccano al DNA e possono mostrare quanto tensione è presente. Uno di questi sensori si chiama TMP. Il TMP può legarsi al DNA in un modo che rivela la quantità di tensione in base a come si attacca al DNA. Può essere introdotto facilmente nelle cellule, e il suo legame può essere controllato usando la luce.
Tuttavia, misurare la tensione non è semplice. Il livello di base, o livello iniziale di tensione, può variare in base alla sequenza del DNA e a quanto sia facile per il sensore accedere al DNA. Questo livello di base è importante per determinare se il DNA è sotto tensione negativa o positiva. Senza conoscere questo livello di base, può essere difficile capire se le letture della tensione sono accurate, poiché altri fattori possono influenzare i risultati.
Sviluppare un Nuovo Metodo
Per risolvere il problema della misurazione del livello di tensione, i ricercatori hanno ideato un nuovo metodo. Hanno preparato il DNA in uno stato in cui non c'era tensione mantenendo intatta la struttura del DNA. Questa preparazione ha comportato il fissare il DNA in posizione e poi usare un enzima per tagliarlo in un modo che rilasciasse tensione. Dopo ciò, hanno usato il sensore TMP per vedere come si legava al DNA. Questo metodo ha permesso loro di creare una mappa chiara che mostrava dove si trova la tensione nel DNA durante i normali processi cellulari.
Usando questo nuovo approccio, sono riusciti a misurare con precisione la tensione nel DNA e a capire come cambia durante il processo di copia e lettura del DNA. I risultati hanno mostrato che la tensione negativa si trova vicino all'inizio dei geni, mentre la tensione positiva si trova alle estremità. Questo schema aiuta a supportare l'idea che il DNA si comporti in un certo modo durante processi come la trascrizione, in cui il DNA viene trasformato in RNA.
Espressione genica
La Relazione Tra Tensione edLa quantità di tensione nel DNA è anche collegata a quanto è attivo un gene. I geni che vengono copiati più attivamente tendono a mostrare più tensione. I ricercatori hanno esaminato geni con diversi livelli di attività e hanno scoperto che i geni più attivi avevano livelli di tensione più elevati vicino all'inizio e alla fine. Questo dimostra che man mano che l'RNA polimerasi si muove lungo il DNA, genera più tensione quando il gene viene espresso.
Gli scienziati hanno anche investigato come le topoisomerasi siano coinvolte con la tensione nel DNA. Questi enzimi aiutano ad alleviare la tensione generata durante la trascrizione. La ricerca ha mostrato che man mano che la tensione aumenta, aumenta anche la presenza delle topoisomerasi, suggerendo che questi enzimi sono attratti da aree con maggiore tensione.
Comprendere la Tensione Tra Gene Vicini
La tensione nel DNA non rimane isolata a un solo gene. Può influenzare geni vicini. Ad esempio, la tensione negativa può accumularsi tra gli inizi di due geni vicini orientati l'uno lontano dall'altro. D'altra parte, la tensione positiva può accumularsi tra le estremità di due geni vicini orientati l'uno verso l'altro. Gli scienziati hanno mappato questi comportamenti e trovato schemi che suggeriscono che la tensione tra i geni può influenzare come vengono espressi e come interagiscono.
Collegare Tensione e Struttura del Genoma
Mantenere una corretta struttura tridimensionale del DNA all'interno della cellula è vitale per la sua funzione. La ricerca ha mostrato che aree con coppie di geni convergenti possono creare anelli nel DNA durante la divisione cellulare. Questi anelli sembrano essere correlati a regioni di tensione positiva, suggerendo che la tensione possa aiutare a organizzare la struttura del DNA. Esaminando i dati di diversi esperimenti che hanno studiato questi anelli, i ricercatori hanno scoperto che le aree con maggiore tensione corrispondevano a questi anelli.
L'Importanza di una Misurazione Accurata della Tensione
Misurare la tensione del DNA è fondamentale per comprendere questi processi. Stabilendo la tensione di base e utilizzando i nuovi metodi sviluppati, i ricercatori possono ottenere informazioni su come si comporta il DNA in diverse condizioni. Questa conoscenza potrebbe portare a una migliore comprensione di varie funzioni cellulari e di come viene regolata l'espressione genica.
Conclusione
In sintesi, la tensione nel DNA gioca un ruolo significativo nel modo in cui i geni vengono copiati e letti. I nuovi metodi sviluppati per misurare questa tensione con precisione forniscono utili approfondimenti nei processi cellulari. Man mano che i ricercatori continuano a esplorare questi schemi, scopriranno di più sulle complesse relazioni tra tensione del DNA, espressione genica e funzione cellulare. Questa comprensione può aprire la strada a progressi nella ricerca genetica e a potenziali approcci terapeutici in futuro.
Fonte originale
Titolo: High-Resolution Genome-Wide Maps Reveal Widespread Presence of Torsional Insulation
Estratto: Torsional stress in chromatin plays a fundamental role in cellular functions, influencing key processes such as transcription, replication, and chromatin organization. Transcription and other processes may generate and be regulated by torsional stress. In the genome, the interplay of these processes creates complicated patterns of both positive (+) and negative (-) torsion. However, a challenge in generating an accurate torsion map is determining the zero-torsion baseline signal, which is conflated with chromatin accessibility. Here, we introduce a high-resolution method based on the intercalator trimethylpsoralen (TMP) to address this challenge. We describe a method to establish the zero-torsion baseline while preserving the chromatin state of the genome of S. cerevisiae. This approach enables both high-resolution mapping of accessibility and torsional stress in chromatin in the cell. Our analysis shows transcription-generated torsional domains consistent with the twin-supercoiled-domain model of transcription and suggests a role for torsional stress in recruiting topoisomerases and in regulating 3D genome architecture via cohesin. Significantly, we reveal that insulator sequence-specific transcription factors decouple torsion between divergent promoters, whereas torsion spreads between divergent promoters lacking these factors, suggesting that torsion serves as a regulatory mechanism in these regions. Although insulators are known to decouple gene expression, our finding provides a physical explanation of how such decoupling may occur. This new method provides a potential path forward for using TMP to measure torsional stress in the genome without the confounding contribution of accessibility in chromatin.
Autori: Michelle D Wang, P. M. Hall, L. M. Mayse, L. Bai, M. B. Smolka, B. F. Pugh
Ultimo aggiornamento: 2025-01-04 00:00:00
Lingua: English
URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.11.617876
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.11.617876.full.pdf
Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.
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