Avancées en génétique de la levure avec le système pSPObooster
De nouvelles méthodes améliorent l'efficacité de la reproduction des levures pour la recherche génétique.
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Table des matières
La levure de boulanger, connue sous le nom de Saccharomyces cerevisiae, est un acteur clé dans la recherche scientifique depuis des années. Cette levure est super utilisée parce qu'il y a plein d'outils pour étudier sa génétique. L'une des premières souches de cette levure à avoir son code génétique entier séquencé était la S288C. Les scientifiques utilisent souvent des souches dérivées de S288C pour divers types de recherches. Mais ces souches de levure ont un souci : elles ne se reproduisent pas bien pendant un processus spécial appelé méiose. Ça peut rendre certains expérimentations compliquées, surtout dans des domaines comme la génétique et le vieillissement.
Le problème des souches de levure
Les souches dérivées de S288C, comme les BY4741 et BY4742, ont tendance à galérer avec la méiose. Cette limite réduit leur utilité dans plusieurs domaines de recherche. Les scientifiques ont étudié les raisons génétiques derrière cette mauvaise performance et ont découvert que certaines modifications dans l'ADN de ces souches de levure en sont responsables. Plus précisément, trois gènes ont été identifiés comme responsables : RME1, MKT1 et TAO3. Les changements dans la séquence d'ADN de ces gènes entraînent une capacité réduite pour la levure à se reproduire efficacement.
Par exemple, dans le gène RME1, un changement spécifique dans la séquence d'ADN augmente l'expression de ce gène, ce qui empêche la méiose de se dérouler correctement. De même, des modifications dans les gènes MKT1 et TAO3 perturbent aussi les processus nécessaires pour une sporulation réussie. Du coup, corriger les changements dans ces gènes pourrait vraiment améliorer l'efficacité de la sporulation des souches de levure.
Améliorer l'efficacité de la sporulation
Ces dernières années, les scientifiques ont bossé pour régler les problèmes liés à la sporulation dans les souches de levure. En corrigeant les changements génétiques dans RME1, MKT1 et TAO3, les chercheurs ont pu améliorer considérablement la capacité de reproduction de la levure. Une nouvelle souche de laboratoire, appelée souche DHY, a été créée en effectuant ces corrections, en ajoutant des changements supplémentaires pour renforcer la robustesse de la levure. Toutefois, étant donné que cette souche a plusieurs modifications génétiques, elle n'est pas facilement croisée avec des souches de laboratoire standard.
Cela a conduit au développement d'un nouveau système appelé pSPObooster. L'objectif principal de pSPObooster est de faciliter l'amélioration de la sporulation dans les souches de levure dérivées de S288C. Ce système utilise un morceau circulaire spécial d'ADN appelé plasmide, qui transporte les versions corrigées des gènes MKT1 et RME1. Le plasmide peut être introduit facilement dans la levure, soit comme un morceau d'ADN séparé, soit intégré dans leur matériel génétique.
Tester le système pSPObooster
Pour évaluer si pSPObooster peut vraiment améliorer la sporulation, les scientifiques ont introduit ce plasmide dans les souches BY4741 et BY4742. Ils ont ensuite laissé les cellules de levure se reproduire dans des conditions contrôlées. Les résultats ont montré que les souches de levure avec le plasmide pSPObooster étaient capables de sporuler beaucoup plus efficacement que celles sans.
Après seulement trois jours dans un environnement spécial conçu pour favoriser la sporulation, les cellules contenant pSPObooster ont montré une augmentation de 13 fois de l'efficacité de sporulation par rapport aux souches standard. Ça permet aux chercheurs d'obtenir de meilleurs résultats dans leurs expériences et de mener d'autres études plus fiablement.
Utiliser pSPObooster pour des expériences à haut débit
Un des gros avantages du système pSPObooster, c'est sa compatibilité avec les expérimentations à haut débit. Les méthodes à haut débit permettent aux scientifiques de réaliser plein de tests rapidement et efficacement. Avec pSPObooster, les chercheurs ont pu simplifier le processus de test génétique et de manipulation dans la levure.
Par exemple, une méthode appelée technologie de réseau génétique synthétique (SGA) a été utilisée pour étudier les interactions génétiques impliquant un gène spécifique connu sous le nom de POL32. Les chercheurs ont transformé les souches de levure avec pSPObooster et ont ensuite évalué comment ces souches se comportaient en termes d'interactions génétiques. Les résultats ont indiqué que les souches portant pSPObooster produisaient de plus grandes colonies que celles sans, peu importe le temps accordé pour la sporulation.
Ça veut dire que pSPObooster non seulement accélère le processus de sporulation, mais améliore aussi la performance globale de la levure dans les dépistages à haut débit. En permettant une plus grande efficacité dans les manipulations génétiques, pSPObooster peut aider les chercheurs à découvrir de nouvelles interactions et relations génétiques.
Conclusion
Le développement du système pSPObooster représente une avancée significative dans l'étude de la génétique des levures. Avec sa capacité à améliorer l'efficacité de la sporulation et à faciliter les expériences à haut débit, il offre aux chercheurs un outil puissant pour leurs études. Ce système ouvre la voie à des manipulations génétiques plus efficaces, ce qui conduit finalement à une meilleure compréhension de la levure et de ses applications dans divers domaines scientifiques.
En résumé, le système de plasmide pSPObooster répond aux limitations rencontrées par les souches de laboratoire traditionnelles dérivées de S288C. En corrigeant les problèmes génétiques sous-jacents, il permet une meilleure reproduction de la levure, ce qui est crucial pour de nombreux domaines de recherche. Les chercheurs peuvent maintenant s'attendre à obtenir des résultats plus fiables dans leurs études génétiques, ouvrant la voie à d'autres découvertes en biologie des levures.
Titre: pSPObooster: a plasmid system to improve sporulation efficiency of Saccharomyces cerevisiae lab strains
Résumé: Common S. cerevisiae lab yeast strains derived from S288C have meiotic defects and therefore are poor sporulators. Here, we developed a plasmid system containing corrected alleles of the MKT1 and RME1 genes to rescue the meiotic defects and show that standard BY4741 and BY4742 strains containing the plasmid display faster and more efficient sporulation. The plasmid, pSPObooster, can be maintained as an episome and easily cured or stably integrated into the genome at a single locus. We demonstrate the use of pSPObooster in low- and high-throughput yeast genetic manipulations and show that it can expedite both procedures without impacting strain behavior. Take AwayO_LIpSPObooster contains corrected alleles or RME1 and MKT1. C_LIO_LIpSPObooster can be maintained as an episome or integrated. C_LIO_LIpSPObooster increases sporulation efficiency by up to 13-fold. C_LIO_LIpSPObooster can be used to speed up high-throughput yeast strain engineering. C_LI
Auteurs: Raphael Loll-Krippleber, Y. K. Jiang, G. W. Brown
Dernière mise à jour: 2024-03-20 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.20.586023
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.20.586023.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.
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