Mesurer les microbes : méthodes et impacts
Différentes méthodes nous aident à comprendre les microbes du sol et leur rôle dans les écosystèmes.
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Table des matières
- Méthodes Courantes pour Mesurer les Microbes du Sol
- Pourquoi Comparer les Méthodes est Important
- Comprendre les Écosystèmes du Sol
- Expérimenter avec les Microbes du Sol
- Observer les Changements Microbiens
- Comparer les Méthodes de Mesure
- Respiration Basale du Sol
- Conclusion : Choisir la Meilleure Méthode
- Source originale
Le sol est plein de petites créatures qu'on appelle des Microbes. Ça inclut des bactéries et des champignons, qui jouent un rôle super important pour garder nos écosystèmes en bonne santé. Ils aident à faire pousser les plantes, à recycler les nutriments, à nettoyer la pollution, à contrôler les maladies, et même à influencer le climat. Le nombre et les types de microbes dans le sol affectent la façon dont tout ça fonctionne.
Comprendre combien de microbes sont dans le sol, c'est important pour différents domaines comme l'écologie, l'agriculture et les projets de restauration. Mesurer ces microbes peut se faire de plusieurs manières, chacune avec ses propres avantages et inconvénients.
Méthodes Courantes pour Mesurer les Microbes du Sol
1. Méthode EL-FAME
La méthode EL-FAME regarde les acides gras produits par les microbes. On prend des échantillons de sol, on extrait les acides gras, puis on les transforme en une forme facile à mesurer. La quantité de chaque type d'acide gras peut nous en dire long sur les différents groupes de microbes présents dans le sol. Cette méthode est plus rapide et moins chère comparée à d'autres, ce qui attire beaucoup de chercheurs.
2. Méthode PLFA
La méthode PLFA est similaire à EL-FAME mais se concentre spécifiquement sur les phospholipides trouvés dans les membranes cellulaires des microbes vivants. Cette méthode nécessite un processus d'extraction plus complexe et prend généralement plus de temps. Cependant, elle est considérée comme fournissant une image plus claire de la communauté microbienne vivante, puisque les phospholipides se décomposent rapidement après la mort des microbes.
3. Méthode qPCR
La méthode qPCR utilise l'analyse de l'ADN pour compter les microbes. Elle peut cibler des gènes spécifiques liés aux bactéries ou aux champignons, permettant une identification détaillée. Cette méthode est connue pour sa précision, mais elle peut aussi capturer de l'ADN résiduel de microbes morts, ce qui peut compliquer les résultats.
Pourquoi Comparer les Méthodes est Important
Chaque méthode a ses propres avantages. Par exemple, même si qPCR est très spécifique, elle pourrait inclure de l'ADN de microbes morts, ce qui peut fausser les résultats. D'un autre côté, EL-FAME et PLFA fournissent une image plus claire des organismes vivants. C'est donc important de comparer ces méthodes pour déterminer laquelle est la plus efficace selon les situations.
Comprendre les Écosystèmes du Sol
Le sol est constitué de différentes couches et contient divers matériaux, y compris des minéraux, de la matière organique, de l'air et de l'eau. Ces composants créent un habitat complexe pour les microbes. Le type de sol et ses conditions, comme l'humidité et les niveaux de nutriments, peuvent influencer grandement les types et les quantités de microbes présents.
Les microbes sont essentiels pour la santé du sol. Ils décomposent la matière organique, qui libère des nutriments dont les plantes ont besoin pour croître. Ils sont aussi en compétition avec des pathogènes nuisibles, aidant à garder les plantes en bonne santé. En plus, les microbes du sol jouent un rôle dans le cycle du carbone, impactant le climat global.
Expérimenter avec les Microbes du Sol
Pour comprendre comment différentes méthodes de mesure des microbes fonctionnent, des chercheurs ont mené une expérience. Ils ont pris des échantillons de sol de trois environnements différents : badland, terre agricole et forêt. Ces échantillons ont été traités de différentes manières, en ajoutant des nutriments ou des antibiotiques, pour voir comment les communautés microbiennes réagissaient au fil du temps.
Traitements Appliqués
- Contrôle : Aucun changement n'a été effectué sur le sol, servant de référence pour la comparaison.
- Ajout de Nutriments : Des nutriments sous forme de glucose, de nitrate d'ammonium et de phosphate monopotassique ont été ajoutés pour promouvoir la croissance microbienne.
- Ajout d'Antibiotiques : De la streptomycine et de la cycloheximide, qui tuent les bactéries et les champignons, ont été ajoutées pour voir comment elles affectaient les populations microbiennes.
Les chercheurs ont surveillé le sol pendant 28 jours, mesurant les populations microbiennes à différents intervalles.
Observer les Changements Microbiens
Quand les microbes ont été exposés à des nutriments supplémentaires, leurs populations ont rapidement augmenté. Ça s'est produit en seulement quelques jours, surtout dans les sols agricoles et badlands. Cependant, après plusieurs jours, les nombres ont commencé à diminuer à mesure que les nutriments devenaient limités et que la concurrence entre microbes augmentait.
En revanche, l'ajout d'antibiotiques a d'abord diminué les nombres de microbes. C'était attendu, car les antibiotiques étaient conçus pour tuer les microbes.
Observations au Fil du Temps
- Dans les 2 Jours : L'ajout de nutriments a entraîné une forte augmentation des populations microbiennes dans les différents sols.
- Après 7 Jours : Dans les sols badlands et agricoles, les nombres de microbes les plus élevés ont été enregistrés, tandis que le sol forestier a montré un léger retard de réponse.
- Après 14 et 28 Jours : En général, les nombres ont commencé à diminuer à mesure que les nutriments étaient consommés.
Comparer les Méthodes de Mesure
Une fois les expériences terminées, les chercheurs ont analysé les données de chaque méthode de mesure. Ils ont constaté que les méthodes basées sur les acides gras (EL-FAME et PLFA) fournissaient souvent des résultats similaires. Elles mesuraient les augmentations et diminutions des nombres de microbes très proches l'une de l'autre. Cependant, qPCR produisait parfois des résultats différents, en particulier dans le sol forestier.
Dans l'ensemble, les méthodes basées sur les acides gras étaient meilleures pour capturer les changements rapides dans les populations microbiennes grâce à leur capacité à se concentrer uniquement sur les microbes vivants.
Respiration Basale du Sol
En plus de mesurer les populations microbiennes, la respiration du sol a aussi été surveillée. Cela mesure combien de dioxyde de carbone le sol émet, ce qui est un signe de l'activité microbienne. À mesure que les nombres de microbes augmentaient à cause de l'ajout de nutriments, les taux de respiration du sol augmentaient également.
L'équipe a observé ce qui suit :
- L'ajout de nutriments a causé une forte augmentation de la respiration du sol, le sol badland montrant le plus grand pic.
- L'ajout d'antibiotiques a généralement causé une baisse de la respiration mais a intrigué en entraînant des augmentations après plusieurs jours dans certains sols.
Conclusion : Choisir la Meilleure Méthode
Cette recherche a montré que les méthodes pour mesurer les microbes du sol ont chacune leurs forces. Bien que qPCR soit précise, elle peut inclure des microbes morts, ce qui signifie qu'elle pourrait ne pas toujours montrer la communauté vivante de manière précise. Les méthodes basées sur les acides gras comme EL-FAME et PLFA sont plus rapides et peuvent mieux se concentrer sur les microbes vivants, ce qui les rend préférées pour des études nécessitant des réponses rapides.
Pour ceux qui recherchent la santé du sol, ces découvertes sont précieuses. Elles soulignent l'importance de choisir la bonne méthode pour mesurer les microbes du sol, surtout lors d'expériences à court terme. Comprendre la dynamique microbienne peut mener à de meilleures pratiques de gestion du sol, bénéficiant finalement à l'agriculture et à la santé environnementale.
Titre: A comparison among EL-FAME, PLFA, and quantitative PCR methods to detect changes in the abundance of soil bacteria and fungi
Résumé: EL-FAME (ester-linked fatty acid methyl ester), PLFA (phospholipid fatty acid) and qPCR (quantitative PCR) of ribosomal genes are three of the most common methods used to quantify soil microbial communities. The reliability of these three methods has not been simultaneously compared in situations of rapid changes in soil microbial abundances. For this purpose, we (i) incubated badland, cropland, and forest soils with nutrients or antibiotics for 2, 7, 14, and 28 days, (ii) quantified total, bacterial, and fungal abundances through EL-FAME, PLFA, and qPCR methods, and (iii) measured soil basal respiration. The general dynamic patterns of the three soil microbial fractions in response to soil addition of nutrients and antibiotics were captured by the three methods, which led to strong and positive associations between the abundances of total microorganisms, bacteria, and fungi measured by the three techniques. However, these relationships were found to be stronger between the EL-FAME and PLFA results, indicating that reliability of the fatty-acid based methods is higher than that of the qPCR. Further, soil basal respiration was associated to a higher extent with total, bacterial, and fungal abundances captured by EL-FAME and PLFA analyses than with those measured by qPCR, which suggests that the first two methods are most closely related to the soil living microbial community. In general, dynamics in the abundance of total and bacterial communities were better captured than those of fungi. The PLFA analysis seems to perform better than the EL-FAME method in forest soil and in detecting the small antibiotic-induced decreases in microbial abundances. Since the EL-FAME method is cheaper and allows a much faster processing of samples than the PLFA method, and the reliability of both methods is similar in detecting rapid changes of soil microbial abundances, choosing EL-FAME over PLFA may be advantageous in most cases.
Auteurs: José A. Siles, R. Gomez Perez, A. Vera, C. Garcia, F. Bastida
Dernière mise à jour: 2024-05-09 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.09.593327
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.09.593327.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
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