Aperçus microbiaux sur la conversion de la biomasse
Une étude révèle comment A. bescii transporte des sucres pour la conversion de la biomasse.
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Table des matières
- Le Rôle des Microbes
- Anaerocellum bescii
- Aperçus grâce à la Transcriptomique
- Transporteurs de Sucre
- L'Importance de la Spécificité
- L'Objectif de l'Étude
- Résultats de la Recherche
- Spécificité du Substrat
- Analyse Biophysique
- Aperçus Structurels
- Modélisation Computationnelle
- Conclusion
- Directions Futures
- Source originale
Aujourd'hui, les gens font face à des défis avec l'énergie et l'environnement. Une solution serait d'utiliser la biomasse lignocellulosique, qui vient des plantes et peut être transformée en combustibles et produits chimiques renouvelables. Ce type de biomasse inclut des matériaux comme le bois, la paille et l'herbe. Cependant, la conversion en produits utiles est difficile car c'est compliqué à décomposer.
Le Rôle des Microbes
La nature a des microbes super utiles qui peuvent aider dans ce processus. Parmi eux, il y a certains thermophiles, des microbes qui vivent dans des environnements chauds et peuvent décomposer des matériaux végétaux résistants. Ces microbes peuvent utiliser efficacement différents sucres pour l'énergie. Cette capacité les rend précieux pour aider à convertir la biomasse lignocellulosique en combustibles et produits chimiques utiles comme l'éthanol ou l'acétone.
Anaerocellum bescii
Un microbe notable est Anaerocellum bescii, qui prospère à des températures élevées autour de 78°C. Cette bactérie se distingue car elle possède des enzymes puissantes qui décomposent les glucides, ne restreint pas l'utilisation des sucres et a un système génétique que les scientifiques peuvent modifier. À cause de ces traits, A. bescii est un bon candidat pour convertir la biomasse lignocellulosique en combustibles.
Des recherches ont montré que les scientifiques peuvent modifier génétiquement A. bescii pour produire des produits précieux comme l'acétone et l'éthanol à partir de lignocellulose à des niveaux adaptés à une utilisation industrielle. Cependant, notre connaissance de comment ce microbe utilise différentes sources de sucre est encore limitée. Comprendre comment A. bescii transporte les sucres est essentiel pour exploiter pleinement son potentiel.
Aperçus grâce à la Transcriptomique
Les scientifiques ont utilisé la transcriptomique, une méthode qui analyse l'activité des gènes, pour étudier le transport des sucres chez des microbes similaires. Certaines études ont examiné comment une bactérie similaire, C. saccharolyticus, fonctionne, en proposant comment ses transporteurs de sucre opèrent. Ces découvertes ont été élargies dans des études focalisées sur A. bescii, fournissant de nouveaux aperçus sur sa composition génétique et son utilisation des sucres.
Transporteurs de Sucre
Dans A. bescii et d'autres microbes similaires, le transport des sucres repose sur des protéines spéciales connues sous le nom de transporteurs ABC (ATP-Binding Cassette). Ces transporteurs sont composés d'une protéine de liaison au substrat, de deux protéines qui traversent la membrane cellulaire, et d'une protéine qui fournit de l'énergie.
Il y a deux familles de transporteurs ABC dans ces microbes : CUT1 et CUT2. Les transporteurs CUT1 sont conçus pour absorber des sucres plus gros, tandis que les transporteurs CUT2 préfèrent les plus petits sucres. Les deux types utilisent l'énergie provenant de la dégradation de l'ATP pour transporter les sucres dans la cellule.
La protéine de liaison au substrat est cruciale pour déterminer quel sucre peut être transporté. Ces protéines peuvent changer de forme lorsqu'elles se lient aux sucres, améliorant ainsi l'efficacité de l'absorption des sucres. Leur structure comprend deux parties reliées par une zone flexible, ce qui leur permet de piéger les sucres quand elles se lient.
L'Importance de la Spécificité
Des études sur les protéines de liaison au substrat montrent que celles qui se lient aux malto-oligosaccharides ont divers sites pour la coordination des sucres. Chaque unité de glucose de la maltodextrine peut s'adapter à des sites spécifiques à l'intérieur de la protéine, influençant leur capacité de liaison.
Dans E. coli, un exemple bien étudié de transport de sucre, les chercheurs ont identifié des transporteurs qui gèrent les maltodextrines. Pour A. bescii, la compréhension de comment ses transporteurs fonctionnent est encore en cours de développement.
L'Objectif de l'Étude
Notre étude se concentre sur deux transporteurs ABC dans A. bescii qui sont censés aider à transporter les maltodextrines. Les protéines de liaison au substrat de chaque transporteur ont été produites dans E. coli pour une investigation plus approfondie. Nous avons utilisé des techniques comme la calorimétrie différentielle à balayage (DSC) et la calorimétrie de titration isotherme (ITC) pour explorer la spécificité du substrat de ces transporteurs.
La méthode DSC aide à identifier comment les sucres affectent la stabilité des protéines, tandis que l'ITC mesure comment les protéines interagissent avec les sucres, fournissant des aperçus sur la force de liaison.
Résultats de la Recherche
Spécificité du Substrat
À travers nos expériences, nous avons trouvé que les deux transporteurs ont des préférences distinctes pour les sucres. Le premier, Athe_2310, se lie bien au maltose et au tréhalose, tandis que le second, Athe_2574, préfère les plus grandes maltodextrines.
Dans les expériences DSC, Athe_2310 a montré la plus grande stabilité thermique lorsqu'il est associé au maltose et légèrement moins avec le tréhalose et le maltotriose. En revanche, Athe_2574 était le plus stable avec des chaînes de maltodextrine plus longues.
Analyse Biophysique
En utilisant l'ITC, nous avons mesuré comment Athe_2310 se lie à divers sucres, constatant qu'il a de fortes interactions avec les plus petits sucres. En comparaison, Athe_2574 a affiché une forte affinité pour les sucres plus longs, en particulier le maltoheptaose.
Aperçus Structurels
Nous avons également examiné la structure de ces protéines pour comprendre pourquoi elles ont différentes préférences pour les sucres. Notre analyse a montré que les deux protéines ont des structures similaires à celles de protéines connues mais divergent dans leurs poches de liaison, ce qui impacte leur spécificité.
Modélisation Computationnelle
L'utilisation de modèles computationnels a aidé à confirmer nos résultats expérimentaux sur la liaison des sucres. Nous avons trouvé que l'énergie de liaison et l'agencement des molécules de sucre dans les poches de liaison correspondaient à nos résultats de laboratoire.
Conclusion
Nos résultats suggèrent qu'A. bescii utilise deux transporteurs ABC différents pour absorber des maltodextrines de tailles variées. Athe_2310 transporte principalement les plus petits sucres, tandis qu'Athe_2574 est conçu pour les plus grands. Ce système dual permet à A. bescii de chasser efficacement les sucres dans son environnement naturel, qui a souvent des ressources limitées.
Cette recherche pave la voie à d'autres études sur comment les bactéries peuvent être manipulées à des fins industrielles, surtout pour créer des combustibles et produits chimiques renouvelables à partir de matériaux végétaux. Comprendre comment A. bescii et des microbes similaires fonctionnent peut mener à de meilleures stratégies pour exploiter leur potentiel afin de relever des défis énergétiques et environnementaux.
Directions Futures
Pour l'avenir, plus de recherches sont nécessaires pour explorer d'autres systèmes de transport de sucre dans A. bescii et des espèces apparentées. En obtenant des insights sur ces mécanismes, les scientifiques peuvent développer des méthodes pour améliorer l'efficacité des processus de conversion de la biomasse, contribuant ainsi à des solutions énergétiques durables.
Comprendre ces processus peut aussi aider à affiner les modifications génétiques potentielles pour optimiser l'absorption des sucres et augmenter la production globale de combustibles et produits chimiques précieux à partir de la biomasse lignocellulosique.
Titre: Maltodextrin Transport in the Extremely Thermophilic, Lignocellulose Degrading Bacterium Anaerocellum bescii (f. Caldicellulosiruptor bescii)
Résumé: Sugar transport into microbial cells is a critical, yet understudied step in the conversion of lignocellulosic biomass to metabolic products. Anaerocellum bescii (formerly Caldicellulosiruptor bescii) is an extremely thermophilic, anaerobic bacterium that readily degrades the cellulose and hemicellulose components of lignocellulosic biomass into a diversity of oligosaccharide substrates. Despite significant understanding of how this microorganism degrades lignocellulose, the mechanisms underlying its highly efficient transport of the resulting oligosaccharides into the cell are comparatively underexplored. Here, we identify and characterize the ATP-Binding Cassette (ABC) transporters in A. bescii governing maltodextrin transport. Utilizing past transcriptomic studies on Anaerocellum and Caldicellulosiruptor species, we identify two maltodextrin transporters in A. bescii and express and purify their substrate-binding proteins (Athe_2310 and Athe_2574) for characterization. Using differential scanning calorimetry and isothermal titration calorimetry, we show that Athe_2310 strongly interacts with shorter maltodextrins such as maltose and trehalose with dissociation constants in the micromolar range, while Athe_2574 binds longer maltodextrins, with dissociation constants in the sub-micro molar range. Using a sequence-structure-function comparison approach combined with molecular modeling we provide context for the specificity of each of these substrate-binding proteins. We propose that A. bescii utilizes orthogonal ABC transporters to uptake malto-oligosaccharides of different lengths to maximize transport efficiency. ImportanceHere, we reveal the biophysical and structural basis for oligosaccharide transport by two maltodextrin ABC transporters in A. bescii. This is the first biophysical characterization of carbohydrate uptake in this organism and establishes a workflow for characterizing other oligosaccharide transporters in A. bescii and similar lignocellulosic thermophiles of interest for lignocellulosic bioprocessing. By deciphering the mechanisms underlying high affinity sugar uptake in A. bescii, we shed light on an underexplored step between extracellular lignocellulose degradation and intracellular conversion of sugars to metabolic products. This understanding will expand opportunities for harnessing sugar transport in thermophiles to reshape lignocellulose bioprocessing as part of a renewable bioeconomy.
Auteurs: Jonathan M Conway, H. Tjo, V. Jiang, J. A. Joseph
Dernière mise à jour: 2024-09-14 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.14.613025
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.14.613025.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.
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