Alternatives Écologiques aux Teintures Synthétiques
Des recherches mettent en avant les pigments microbiaux issus des déchets agricoles comme solutions de teinture écolos.
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Table des matières
Il y a un intérêt croissant pour les produits colorés, ce qui a entraîné une augmentation de l'utilisation de colorants synthétiques. Malheureusement, beaucoup de ces colorants sont nuisibles pour l'environnement. Depuis le milieu du 19ème siècle, les colorants synthétiques ont remplacé les pigments naturels car ils sont moins chers à produire. On estime qu'environ 800 000 tonnes de colorants synthétiques sont produites chaque année dans le monde, avec plus de 10 000 types différents utilisés.
Peu importe les propriétés du colorant, les étapes finales de teinture impliquent un lavage pour éliminer tout excès de colorant qui n’a pas adhéré au tissu. L'utilisation continue de colorants synthétiques et le déversement constant d'eaux usées teintées dans l'environnement ne sont pas des problèmes négligeables. Au contraire, cela pose un défi significatif qui affecte les écosystèmes et la biodiversité. Cela est principalement dû à leur résistance à la lumière, à la chaleur, à l'eau, aux détergents et à d'autres produits chimiques, permettant à ces polluants de rester dans l'environnement pendant de longues périodes. L'essor des industries qui dépendent des colorants synthétiques, associé à une forte consommation d'eau, impacte négativement les écosystèmes, ce qui peut réduire la productivité et menacer la biodiversité.
Pour répondre à ces préoccupations environnementales, il est nécessaire de trouver des alternatives écologiques aux colorants synthétiques. Une solution potentielle est d'utiliser des produits naturels issus de microbes, car ils peuvent produire divers pigments par leurs processus biologiques. Ces pigments microbiaux offrent de nombreuses applications potentielles. Pour rendre la production de ces pigments économiquement viable, il est important de maximiser le rendement tout en minimisant les coûts de production. Une façon d'y parvenir est l'optimisation des processus, qui peut utiliser des déchets agricoles peu coûteux comme milieu de culture pour les microbes.
Les déchets agricoles consister en divers matériaux organiques, qui sont une source renouvelable de nutriments pour la croissance microbienne. Dans des expériences axées sur l'optimisation, les chercheurs visent à identifier les facteurs qui influencent le rendement en pigments et à déterminer les meilleures valeurs pour ces variables influentes. Une méthode qui peut aider dans ce processus est connue sous le nom de Plackett-Burman Design (PBD). Cette approche permet un dépistage efficace de différentes variables de processus pour identifier celles qui sont les plus significatives pour la production de pigments.
Une autre méthode utile est la Réponse de Surface Méthodologie (RSM). Cette technique aide à améliorer la production de pigments en réduisant le nombre de variables impliquées, ainsi que le temps et les coûts associés au processus. La RSM peut fournir des informations précieuses sur la façon dont différents facteurs interagissent entre eux pour affecter la production de pigments.
Avec ces approches, cette recherche vise à optimiser les conditions de culture et les composants du milieu pour une meilleure production de pigments d'un microbe spécifique, Exiguobacterium aurantiacum, tout en utilisant des extraits de déchets agricoles comme milieu de culture.
Matériaux et Méthodes
Produits chimiques, Équipement et Réactifs
Pour la croissance des bactéries, on a utilisé de l'Agar Nutrient (NA). Les bactéries ont été cultivées dans des extraits liquides créés à partir de déchets agricoles. Des solvants organiques ont été utilisés pour l'extraction des pigments, obtenus d'un laboratoire de recherche en santé local. Les concentrations des pigments résultants ont été mesurées à l'aide de photomètres et de spectrophotomètres UV-Vis.
Collecte d'échantillons et Isolement des bactéries
Des échantillons d'air ont été collectés en utilisant une méthode spécifique qui impliquait d'exposer des plaques d'agar nutritif à l'air pendant une période définie. Les plaques ont ensuite été incubées pour permettre la croissance bactérienne. Une fois que des colonies sont apparues, des cultures pures de bactéries produisant des pigments ont été isolées pour une étude plus approfondie. L'identification de ces bactéries a été réalisée à l'aide d'une technique de spectrométrie de masse qui permet une identification précise au niveau de l'espèce.
Cultivation de la Culture
La croissance de bactéries potentielles productrices de pigments a été testée en utilisant douze extraits de déchets agricoles différents, comme la pomme de terre, le chou, la tomate, etc. Ces extraits ont été choisis en raison de leur richesse nutritionnelle. Les déchets agricoles ont été nettoyés, séchés, réduits en poudre et bouillis pour extraire les nutriments. L'efficacité de chaque extrait de déchet à promouvoir la croissance bactérienne a été mesurée pendant une période d'incubation définie.
Dépistage des Variables de Processus Utilisant PBD
Pour identifier les variables les plus impactantes sur la croissance bactérienne et la production de pigments, neuf facteurs différents ont été analysés. Cela comprenait des aspects comme la température, le pH, le taux d'agitation et les concentrations de nutriments. La méthode PBD a été utilisée pour analyser les effets de ces variables sur la croissance d'Exiguobacterium aurantiacum. Les expériences ont été menées dans un ordre aléatoire pour garantir la fiabilité.
Optimisation des Facteurs Significatifs Utilisant RSM
Après avoir identifié les variables les plus significatives, la RSM a été appliquée pour optimiser leurs niveaux. Cette méthode a contribué à créer un modèle mathématique décrivant comment les différents facteurs interagissaient les uns avec les autres. Toutes les variables jugées non significatives ont été maintenues constantes pour se concentrer sur les facteurs principaux d'intérêt.
Test de Vérification
Avant l'optimisation finale, une culture utilisant de l'extrait de déchet de tomate a été réalisée pour comprendre comment les variables significatives affectaient la croissance bactérienne et la production de pigments. Une expérience de vérification a ensuite été effectuée dans des conditions optimisées pour évaluer les résultats.
Extraction des Pigments
Les pigments extraits ont été obtenus par une méthode d'extraction par solvant. La biomasse récoltée a été resuspendue dans divers solvants, et le solvant qui dissolvait le mieux les pigments a été sélectionné. Après traitement, le pigment a été filtré et séché pour une analyse plus approfondie.
Caractérisation des Pigments
Le pigment extrait a subi plusieurs tests analytiques pour caractériser sa composition chimique. La spectroscopie infrarouge (IR), la spectroscopie UV-visible et les analyses de chromatographie liquide-spectrométrie de masse ont permis de déterminer la présence de différents composés dans le pigment.
Résultats et Discussion
Isolement et Identification des Bactéries Productrices de Pigments
Parmi les colonies cultivées à partir d'échantillons d'air, une souche spécifique a montré une pigmentation jaune-orange et a été sélectionnée pour une analyse plus approfondie. Cet isolat a été identifié comme Exiguobacterium aurantiacum et a été choisi pour la production de pigments en raison de ses caractéristiques prometteuses.
Cultivation de la Culture avec des Extraits de Déchets Agricoles
Sur les douze extraits de déchets agricoles testés, trois (banane, betterave, et reste de pain) n'ont pas soutenu la croissance bactérienne. Les extraits restants ont montré des niveaux d'efficacité variables. Parmi eux, l'extrait de déchet de tomate a entraîné la plus forte croissance bactérienne.
Dépistage des Variables de Processus
Grâce à la méthode PBD, neuf variables différentes ont été évaluées. L'analyse a révélé que plusieurs facteurs, en particulier l'agitation de la culture, le pH initial, l'extrait de levure et la concentration de sel, avaient une influence significative sur la croissance bactérienne. L'analyse statistique a confirmé que ces variables affectaient de manière significative la croissance de la culture.
Optimisation des Facteurs Significatifs
En utilisant la RSM, une compréhension plus détaillée de la façon dont les facteurs significatifs interagissaient a été développée. Cela a révélé des conditions optimales pour la croissance, y compris le taux d'agitation et le niveau de pH. Les résultats indiquaient qu'en maximisant les conditions de croissance, on pouvait améliorer la production de pigments.
Vérification des Résultats
Une expérience de vérification a confirmé les résultats de la phase d'optimisation. Les résultats ont montré qu'en conditions optimisées, la bactérie produisait une quantité plus importante de biomasse et de pigments.
Caractérisation des Pigments
Le pigment extrait a été analysé à l'aide de diverses techniques. La spectroscopie IR a révélé la présence de groupes fonctionnels associés aux caroténoïdes. La spectroscopie UV-visible a montré un pic d'absorbance fort typique des composés caroténoïdes. Les résultats de la LC-MS ont confirmé la présence de composés caroténoïdes spécifiques, validant la qualité des pigments extraits.
Conclusion
Grâce à cette recherche, il a été établi qu'Exiguobacterium aurantiacum pouvait servir de source efficace pour produire des pigments naturels à partir d'extraits de déchets agricoles. L'optimisation des conditions de croissance a conduit à des améliorations significatives du rendement en pigments. Les analyses de caractérisation ont confirmé la qualité et la nature des pigments, avec un potentiel pour diverses applications dans des produits écologiques.
Cette étude souligne l'importance d'utiliser les déchets organiques comme substrats de croissance, non seulement comme moyen de produire des pigments naturels, mais aussi comme stratégie de gestion durable des déchets et de conservation de l'environnement. Les résultats créent une base pour des recherches ultérieures et des applications commerciales des pigments microbiens dans diverses industries.
Alors que les industries visent de plus en plus à réduire leur impact environnemental, des solutions comme celles-ci ouvrent la voie à des pratiques durables, favorisant l'utilisation d'alternatives écologiques aux colorants synthétiques.
Titre: Enhancing pigment production by a chromogenic bacterium (Exiguobacterium aurantiacum) using tomato waste extract: A Statistical approach
Résumé: There is high demand for microbial pigments as promising alternative for synthetic pigments basically for safety and economic reasons. This study aimed at the optimization of yellowish-orange pigment production by Exiguobacterium aurantiacum using agro-waste extract as growth substrate. Air samples were collected using depositional method. Pure cultures of pigment producing bacteria were isolated by subsequent culturing on fresh nutrient agar medium and the potent isolate was identified using MALDI-TOF technique. Culture conditions were screened using Plackett-Burman design and the most three significant variables were optimized by response surface methodology. Fermentation was conducted in 150 mL agro-waste decoctions from which tomato waste extract was selected because of higher optical density of the culture compared to other agro-waste extracts. Pigment was extracted by solvent extraction method and the best solvent was selected based on its ability to dissolve the culture suspension. The pigment was characterized using spectroscopic and chromatographic techniques. Culture agitation rate, initial medium pH and concentration of yeast extract were identified as the most significant (p< 0.0001) variables affecting pigment production. At optimized conditions, 0.96 g/L of pigment was extracted from 4.73 g/L of culture biomass and the extracted pigment under optimized conditions was 1.6 times higher than the pigment extracted under un-optimized conditions. The spectroscopic and chromatographic analyses demonstrated the presence of different functional groups and carotenoids were identified as parts of the molecule responsible for the yellowish-orange pigmentation of the extract. This study demonstrated the potential for optimization of pigment production by bacteria using agro-waste extract as substrate. Hence, the current findings strongly encourage for further study at a large-scale level for industrial production.
Auteurs: Diriba Muleta, B. Zeleke, H. A. Dinka, D. A. Tsegaye, J. Hassen
Dernière mise à jour: 2024-10-17 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.17.618848
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.17.618848.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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