Le Rôle de la Tension dans les Fonctions de l'ADN
Examiner comment la tension de l'ADN affecte la copie et la lecture des gènes.
Michelle D Wang, P. M. Hall, L. M. Mayse, L. Bai, M. B. Smolka, B. F. Pugh
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Table des matières
- Le rôle de la tension dans les processus de l'ADN
- Cartographier la tension dans l'ADN
- Développer une nouvelle méthode
- La relation entre tension et expression des gènes
- Comprendre la tension entre les gènes voisins
- Connecter la tension et la structure du génome
- L'importance d'une mesure précise de la tension
- Conclusion
- Source originale
L'ADN, la molécule qui contient notre info génétique, a une structure spécifique qui ressemble à une échelle tordue. Cette structure peut générer de la tension quand l'ADN est copié ou quand il est lu pour fabriquer des protéines. Cette tension peut causer des problèmes aux protéines qui aident ces processus. Une protéine importante impliquée dans la lecture de l'ADN s'appelle l'ARN polymérase. Elle se déplace le long de l'ADN, et quand son mouvement est limité, l'ADN se tord. Cette torsion crée différents types de tension dans l'ADN.
Le rôle de la tension dans les processus de l'ADN
Quand l'ARN polymérase bouge, elle crée deux types de tension : négative et positive. La tension négative se produit derrière l'ARN polymérase, tandis que la tension positive se manifeste devant elle. Ça peut rendre le boulot de l'ARN polymérase plus difficile et affecter aussi d'autres protéines qui aident à relâcher cette tension. Les Topoisomérases sont des enzymes qui aident à apaiser cette tension. Elles sont cruciales pour la croissance des cellules et le bon fonctionnement de l'ADN.
Fait intéressant, un peu de tension peut être bénéfique. La tension négative peut même aider dans des processus qui nécessitent que l'ADN se déroule, comme lors de la copie ou de la réparation de l'ADN. La tension positive peut aider à enlever les protéines qui gênent et peut aussi aider à organiser l'ADN dans la cellule.
Cartographier la tension dans l'ADN
Pour étudier les effets de la tension dans l'ADN, les scientifiques doivent trouver un moyen de la mesurer avec précision. Ça nécessite des capteurs spéciaux qui s'attachent à l'ADN et peuvent montrer combien de tension est présente. Un de ces capteurs s'appelle TMP. TMP peut se lier à l'ADN d'une manière qui révèle le niveau de tension selon comment il s'attache à l'ADN. Il peut être introduit facilement dans les cellules, et sa liaison peut être contrôlée à l'aide de lumière.
Cependant, mesurer la tension n'est pas simple. La ligne de base, ou le niveau de départ de la tension, peut varier en fonction de la séquence d'ADN et de la facilité d'accès du capteur à l'ADN. Cette ligne de base est importante pour déterminer si l'ADN est sous tension négative ou positive. Sans connaître cette ligne de base, il peut être difficile de dire si les lectures de tension sont précises, car d'autres facteurs peuvent influencer les résultats.
Développer une nouvelle méthode
Pour résoudre le problème de la mesure de la ligne de base de la tension, les chercheurs ont trouvé une nouvelle méthode. Ils ont préparé l'ADN dans un état où il n'y avait pas de tension tout en gardant la structure de l'ADN intacte. Cette préparation a impliqué de fixer l'ADN en place, puis d'utiliser une enzyme pour le couper d'une manière qui a relâché la tension. Après ça, ils ont utilisé le capteur TMP pour voir comment il se liait à l'ADN. Cette méthode leur a permis de créer une carte claire montrant où la tension se situe dans l'ADN lors des processus cellulaires normaux.
Avec cette nouvelle approche, ils ont pu mesurer la tension dans l'ADN avec précision et comprendre comment elle change pendant le processus de copie et de lecture de l'ADN. Les résultats ont montré que la tension négative se trouve près du début des gènes, tandis que la tension positive se trouve aux extrémités. Ce schéma soutient l'idée que l'ADN se comporte d'une certaine manière lors de processus comme la transcription, où l'ADN est transformé en ARN.
La relation entre tension et expression des gènes
La quantité de tension dans l'ADN est aussi liée à l'activité d'un gène. Les gènes qui sont plus activement copiés tendent à montrer plus de tension. Les chercheurs ont examiné des gènes avec des niveaux d'activité différents et ont découvert que les gènes plus actifs avaient des niveaux plus élevés de tension près du début et de la fin. Ça montre qu'au fur et à mesure que l'ARN polymérase avance le long de l'ADN, elle génère plus de tension quand le gène est exprimé.
Les scientifiques ont aussi examiné comment les topoisomérases sont impliquées dans la tension de l'ADN. Ces enzymes aident à soulager la tension générée durant la transcription. La recherche a montré qu'à mesure que la tension augmente, la présence des topoisomérases augmente aussi, suggérant que ces enzymes sont attirées vers les zones avec une tension plus élevée.
Comprendre la tension entre les gènes voisins
La tension dans l'ADN ne reste pas isolée à un seul gène. Elle peut influencer les gènes voisins. Par exemple, la tension négative peut s'accumuler entre les débuts de deux gènes voisins qui sont orientés l'un loin de l'autre. D'un autre côté, la tension positive peut s'accumuler entre les extrémités de deux gènes voisins qui sont orientés l'un vers l'autre. Les scientifiques ont cartographié ces comportements et trouvé des motifs qui suggèrent que la tension entre les gènes peut affecter comment ils sont exprimés et comment ils interagissent.
Connecter la tension et la structure du génome
Maintenir une structure tridimensionnelle adéquate de l'ADN dans la cellule est vital pour son fonctionnement. La recherche a montré que des zones avec des paires de gènes convergents peuvent créer des boucles dans l'ADN durant la division cellulaire. Ces boucles semblent être liées à des régions de tension positive, suggérant que la tension peut aider à organiser la structure de l'ADN. En regardant les données de différentes expériences qui ont étudié ces boucles, les chercheurs ont trouvé que les zones avec plus de tension correspondaient à ces boucles.
L'importance d'une mesure précise de la tension
Mesurer la tension de l'ADN est essentiel pour comprendre ces processus. En établissant la tension de base et en utilisant les nouvelles méthodes développées, les chercheurs peuvent obtenir des aperçus sur comment l'ADN se comporte sous différentes conditions. Cette connaissance pourrait mener à une meilleure compréhension de diverses fonctions cellulaires et de comment l'expression des gènes est régulée.
Conclusion
En résumé, la tension dans l'ADN joue un rôle majeur dans la façon dont les gènes sont copiés et lus. Les nouvelles méthodes développées pour mesurer cette tension avec précision offrent des aperçus précieux sur les processus cellulaires. Alors que les chercheurs continuent d'explorer ces motifs, ils découvriront davantage sur les relations complexes entre la tension de l'ADN, l'expression des gènes et la fonction cellulaire. Cette compréhension pourrait ouvrir la voie à des avancées dans la recherche génétique et des approches thérapeutiques potentielles à l'avenir.
Source originale
Titre: High-Resolution Genome-Wide Maps Reveal Widespread Presence of Torsional Insulation
Résumé: Torsional stress in chromatin plays a fundamental role in cellular functions, influencing key processes such as transcription, replication, and chromatin organization. Transcription and other processes may generate and be regulated by torsional stress. In the genome, the interplay of these processes creates complicated patterns of both positive (+) and negative (-) torsion. However, a challenge in generating an accurate torsion map is determining the zero-torsion baseline signal, which is conflated with chromatin accessibility. Here, we introduce a high-resolution method based on the intercalator trimethylpsoralen (TMP) to address this challenge. We describe a method to establish the zero-torsion baseline while preserving the chromatin state of the genome of S. cerevisiae. This approach enables both high-resolution mapping of accessibility and torsional stress in chromatin in the cell. Our analysis shows transcription-generated torsional domains consistent with the twin-supercoiled-domain model of transcription and suggests a role for torsional stress in recruiting topoisomerases and in regulating 3D genome architecture via cohesin. Significantly, we reveal that insulator sequence-specific transcription factors decouple torsion between divergent promoters, whereas torsion spreads between divergent promoters lacking these factors, suggesting that torsion serves as a regulatory mechanism in these regions. Although insulators are known to decouple gene expression, our finding provides a physical explanation of how such decoupling may occur. This new method provides a potential path forward for using TMP to measure torsional stress in the genome without the confounding contribution of accessibility in chromatin.
Auteurs: Michelle D Wang, P. M. Hall, L. M. Mayse, L. Bai, M. B. Smolka, B. F. Pugh
Dernière mise à jour: 2025-01-04 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.11.617876
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.11.617876.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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