Presentamos PatternJ: Una herramienta fácil de usar para analizar patrones biológicos
PatternJ simplifica la medición de patrones regulares en imágenes para biólogos.
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Tabla de contenidos
Se pueden ver Patrones regulares en muchos animales. Por ejemplo, la forma en que el cuerpo se divide en segmentos es importante para el desarrollo de criaturas que van desde las moscas hasta los humanos. En los insectos, las bristles están organizadas en patrones regulares, muy parecido a las plumas de los pájaros o las escamas de los reptiles. Incluso a un nivel diminuto, podemos ver estructuras regulares como anillos en las células nerviosas y formas organizadas al mirar las células musculares bajo un microscopio.
Para aprender cómo se forman estos patrones y cómo cambian debido a diferentes factores, los científicos necesitan medir sus características con precisión. Esto significa averiguar el tamaño, la forma y otros detalles de cada patrón en una imagen. Los biólogos a menudo quieren este tipo de información detallada, pero hacerlo a mano puede ser lento y propenso a errores, especialmente para aquellos que no tienen habilidades en programación.
Herramientas para Analizar Patrones
En respuesta a esta necesidad, se han creado varias herramientas automatizadas a lo largo de los años, especialmente en el campo de la investigación muscular. Recientemente se han publicado unas diez herramientas diferentes que ayudan a analizar patrones musculares. Algunas herramientas se centran en la contracción de los Músculos, ofreciendo información sobre cuánto se está contrayendo el músculo, mientras que otras pueden delinear segmentos individuales y medir sus longitudes. Unas pocas herramientas pueden estimar la longitud promedio de los segmentos musculares a partir de una imagen sin mucha entrada del usuario.
La mayoría de estas herramientas esperan que las imágenes muestren múltiples patrones repetitivos. Generalmente requieren algo de conocimiento en codificación para operar de manera efectiva, y algunas herramientas son más fáciles de usar que otras. Actualmente, hay una herramienta llamada sarcApp que puede proporcionar análisis detallados de patrones, pero aún necesita algo de conocimiento en programación y requiere una computadora potente para funcionar correctamente. Hay una necesidad real de una herramienta que pueda analizar las características de los patrones sin que los usuarios tengan que entender programación o tener acceso a computadoras de alto rendimiento.
Presentando PatternJ
PatternJ es una nueva herramienta diseñada para extraer características de imágenes de patrones regulares de manera fácil. Funciona con ImageJ/Fiji, un software popular de procesamiento de imágenes, y no requiere conocimientos de programación. PatternJ puede medir con precisión el tamaño de patrones repetitivos individuales e identificar sus formas, particularmente en células musculares teñidas con tintes específicos.
Esta herramienta está destinada a ayudar a los biólogos que necesitan medir patrones sin la molestia del trabajo manual. Proporciona una manera de visualizar el patrón promedio, lo cual es útil al lidiar con imágenes ruidosas. La herramienta ha sido probada para asegurarse de que funcione bien incluso en situaciones difíciles, como baja calidad de imagen o intensidades variables.
Cómo Funciona PatternJ
Usar PatternJ es simple. Después de instalarlo, los usuarios pueden acceder a sus funciones en la interfaz gráfica de ImageJ/Fiji. Aquí están los pasos principales involucrados:
Seleccionar una Región: Los usuarios comienzan dibujando una línea o curva alrededor del área que quieren analizar. Para imágenes con múltiples colores, un gráfico mostrará la intensidad para cada color.
Establecer Parámetros: Los usuarios especifican las características del patrón que quieren analizar a través de una ventana emergente. Pueden elegir de una lista de patrones comunes como bandas o bloques.
Extracción de Características: La herramienta identifica y mide automáticamente las características del patrón según las configuraciones elegidas. Los usuarios pueden verificar visualmente si las características fueron identificadas correctamente.
Guardar los Resultados: Una vez que se extraen las características, los usuarios pueden guardar los resultados y repetir el proceso para otras áreas en la imagen o en diferentes imágenes.
Analizar Datos: Después de extraer características de múltiples selecciones, los usuarios pueden analizar más los patrones. La herramienta calcula el período espacial para cada patrón y proporciona un perfil de intensidad promedio.
Además, los usuarios pueden aplicar pasos opcionales como usar desenfoque gaussiano para mejorar la calidad de la imagen antes del análisis, especialmente en casos con bajas relaciones señal-ruido.
Validando PatternJ
Para asegurar que PatternJ funcione efectivamente en varias situaciones, se realizaron pruebas usando imágenes simuladas. Estas imágenes fueron creadas para tener patrones regulares con ruido agregado. Las pruebas verificaron qué tan bien la herramienta podría identificar y medir las posiciones de las bandas cuando las imágenes tenían diferentes calidades.
Los hallazgos mostraron que en bajas relaciones señal-ruido, la herramienta aún podía identificar la mayoría de los patrones con precisión. Cuanto más alta era la relación señal-ruido (lo que significa imágenes más claras), mejor funcionaba la herramienta. Para imágenes con una baja relación señal-ruido, la precisión de localizar patrones seguía siendo bastante buena.
Cuando se aumentó el ancho de la selección hecha por el usuario, el rendimiento de la herramienta mejoró. Sin embargo, aún podía proporcionar resultados útiles incluso con selecciones más pequeñas.
Comparando PatternJ con Otras Herramientas
Hay varias otras herramientas disponibles para analizar patrones repetidos en imágenes, cada una con sus fortalezas y debilidades. Algunas herramientas analizan imágenes completas y proporcionan una medición para el patrón general, mientras que otras pueden analizar segmentos individuales. Herramientas como sarcApp y otras pueden extraer patrones complejos pero a menudo requieren conocimientos de codificación y computadoras potentes.
PatternJ se destaca porque es fácil de usar y no requiere habilidades de codificación específicas. Permite a los usuarios elegir manualmente regiones de interés. Aunque algunas herramientas existentes automatizan completamente el proceso de selección, esto aún necesita verificaciones cuidadosas por parte de los usuarios.
Mientras que PatternJ necesita que los usuarios hagan selecciones manuales, automatiza el resto de los pasos, haciéndolo más fácil y rápido de usar. La herramienta también puede proporcionar una distribución de longitudes para los patrones, ofreciendo más información en comparación con herramientas que solo proporcionan una longitud promedio.
Aplicaciones de PatternJ en la Investigación Biológica
PatternJ ha sido probado en imágenes biológicas reales para confirmar su utilidad. Es más beneficioso al analizar imágenes musculares donde entender la organización de las proteínas es crítico. Por ejemplo, en imágenes de células musculares del corazón, PatternJ podría señalar las ubicaciones de proteínas específicas, proporcionando información valiosa sobre la estructura y función del músculo.
En otra prueba, PatternJ se aplicó a imágenes de un músculo larval de Drosophila. La herramienta identificó efectivamente diferentes proteínas, mostrando cómo estaban organizadas dentro del tejido muscular. Esto fue significativo para entender la organización y función muscular.
La microscopía electrónica se utiliza a menudo para estudiar tejidos musculares, pero presenta desafíos para el análisis debido a imágenes complejas. La herramienta se aplicó exitosamente a imágenes de microscopía electrónica, permitiendo la extracción precisa de estructuras importantes.
Conclusión
PatternJ es un conjunto de herramientas innovador que simplifica el proceso de analizar patrones regulares en imágenes biológicas. Su accesibilidad y eficacia lo convierten en un recurso valioso para investigadores en diversos campos que estudian patrones biológicos. Al permitir un análisis detallado de patrones complejos sin requerir habilidades técnicas extensas, PatternJ busca ayudar a los científicos en su trabajo y fomentar más descubrimientos en la investigación biológica. A través de su capacidad para trabajar con diferentes métodos de imagen y manejar condiciones desafiantes de imagen, allana el camino para aplicaciones más amplias en el estudio de la formación de patrones en la naturaleza.
Título: PatternJ: an ImageJ toolset for the automated and quantitative analysis of regular spatial patterns found in sarcomeres, axons, somites, and more
Resumen: Regular spatial patterns are ubiquitous forms of organization in nature. In animals, regular patterns can be found from the cellular scale to the tissue scale, and from early stages of development to adulthood. To understand the formation of these patterns, how they form and mature, and how they are affected by perturbations, a precise quantitative description of the patterns is essential. However, accessible tools that offer in-depth analysis without the need for computational skills are lacking for biologists. Here we present PatternJ, a novel toolset to analyze regular pattern organizations precisely and automatically. This toolset, to be used with the popular imaging processing program ImageJ/Fiji, facilitates the extraction of key geometric features within and between pattern repeats. We validated PatternJ on simulated data and tested it on images of sarcomeres in insect muscles and cardiomyocytes, actin rings in neurons, and somites in zebrafish embryos obtained using confocal fluorescence microscopy, STORM, electron microscopy, and bright-field imaging. We show that the toolset delivers subpixel feature extraction reliably even with images of low signal-to-noise ratio. PatternJs straightforward use and functionalities make it valuable for various scientific fields requiring quantitative pattern analysis, including the sarcomere biology of muscles or the patterning of mammalian axons, speeding up discoveries with the bonus of high reproducibility.
Autores: Pierre Mangeol, M. Baheux Blin, V. Loreau, F. Schnorrer
Última actualización: 2024-01-20 00:00:00
Idioma: English
Fuente URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.17.576053
Fuente PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.17.576053.full.pdf
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