La Danza del ADN: Cómo el Entorno Moldea Sus Pasos
Descubre cómo varias sustancias influyen en el comportamiento del ADN dentro de las células.
Parth Rakesh Desai, John F. Marko
― 7 minilectura
Tabla de contenidos
- ¿Qué es la Superenrollamiento del ADN?
- El ambiente ocupado de las células
- Glicerol: El 'socio' astuto
- Etilenglicol: El observador silencioso
- Polietilenglicol (PEG): El transformador
- ¿Cómo estudian esto los científicos?
- Los resultados: hallazgos sorprendentes
- Aplicaciones en la vida real
- La gran imagen
- Fuente original
El ADN, la famosa molécula que guarda nuestro código genético, no está solo por ahí. En las células vivas, está influenciado por muchas otras moléculas que pueden cambiar cómo se comporta el ADN. Imagina el ADN como un fideo de espagueti que se retuerce y se gira, pero cuando le agregas algunos ingredientes extra a la olla, cambia su forma y cómo reacciona a tu cocina. En este caso, esos ingredientes son varios compuestos químicos que se encuentran en las células.
Superenrollamiento del ADN?
¿Qué es laLa superenrollamiento del ADN es un término fancy para describir el ADN enredado fuertemente. Piensa en ello como enredar una goma elástica. Cuando la retuerces demasiado, empieza a enrollarse sobre sí misma, lo que puede crear bucles o nudos. La superenrollamiento es importante para que el ADN quepa dentro del pequeño espacio de una célula y ayuda en procesos como la replicación del ADN y la expresión génica.
Ahora, el ADN puede estar superenrollado positivamente, donde se retuerce en una dirección, o negativamente superenrollado, donde se retuerce en la otra dirección. Al igual que decidir si girar tu goma elástica en sentido horario o antihorario, estas dos formas tienen efectos diferentes en cómo funciona el ADN.
El ambiente ocupado de las células
Dentro de una célula, el ADN no flota solo; tiene un montón de compañeros. Hay proteínas, sales y otras moléculas orgánicas que se apiñan alrededor, haciendo que el ambiente del ADN esté bien ocupado. Este hacinamiento puede afectar cómo se comporta el ADN, como cuando demasiados cocineros en la cocina pueden arruinar el caldo.
Un tipo importante de molécula que afecta al ADN son los solutos. Estos se pueden pensar como ingredientes que pueden ayudar o dificultar el rendimiento del ADN. Por ejemplo, cuando agregamos Glicerol o etilenglicol a una solución que contiene ADN, puede cambiar la forma en que el ADN se retuerce y se gira.
Glicerol: El 'socio' astuto
El glicerol es una sustancia común que a menudo se utiliza en laboratorios para ayudar a mantener estable el ADN. Sin embargo, en realidad puede hacer que el ADN sea menos estable cuando se trata de cambios de temperatura. En términos más simples, el glicerol puede hacer que el ADN sea más propenso a abrirse y separar sus cadenas cuando las cosas se calientan. Pero cuando se trata de estrés mecánico, como cuando se retuerce, el glicerol también tiene la capacidad de aumentar la separación de cadenas en el ADN, lo que significa que puede hacer que el ADN se desenrosque más fácilmente.
Imagínate tratando de retorcer una goma elástica, pero tu amigo (el glicerol) sigue aflojándola. Así que mientras intentas superenrollar tu goma elástica, no va a cooperar tan bien como antes.
Etilenglicol: El observador silencioso
Luego tenemos el etilenglicol, un primo cercano del glicerol. Lo interesante del etilenglicol es que, aunque también puede cambiar la temperatura de fusión del ADN, no tiene los mismos efectos cuando se trata de causar separación de cadenas. Bajo estrés mecánico, el etilenglicol no impacta significativamente la superenrollamiento del ADN. Es como un amigo que solo te observa retorcer esa goma elástica sin intentar ayudar o obstaculizar.
Polietilenglicol (PEG): El transformador
Ahora, hablemos del polietilenglicol, o PEG para abreviar. El PEG a veces puede hacer que el ADN se compacte, como cuando empacas demasiada ropa en una maleta y se vuelve más difícil cerrarla. Cuando usamos PEG de mayor peso molecular, genera una respuesta única en el ADN. En lugar de causar que el ADN se separe, el PEG puede suprimir la separación local de cadenas en el ADN superenrollado negativamente.
Esto significa que cuando el PEG está presente, el ADN puede ser menos propenso a abrir sus cadenas, haciéndolo más estable. Es como si el PEG fuera el portero en la puerta de una club, manteniendo todo en orden y evitando la separación no deseada de cadenas.
¿Cómo estudian esto los científicos?
Para averiguar todo esto, los científicos utilizan una técnica llamada pinzas magnéticas de una sola molécula. Esto puede sonar como algo sacado de una película de ciencia ficción, pero es una forma ingeniosa de estudiar el ADN. Las pinzas pueden estirar y retorcer una sola molécula de ADN mientras miden cómo reacciona.
Usando esta técnica, los científicos pueden medir cómo responde el ADN a cambios en su ambiente, como la presencia de agentes hacinados o deshidratantes como glicerol, etilenglicol o PEG. Pueden ver si el ADN se alarga o acorta, cuánto se retuerce o cuándo forma bucles.
Los resultados: hallazgos sorprendentes
La parte divertida de toda esta exploración es lo que encontraron los científicos. El glicerol, que ya sabemos ayuda con la estabilidad térmica, también afloja las cosas bajo estrés mecánico. Cuando está presente, el glicerol aumenta la separación local de cadenas tanto en ADN superenrollado positivamente como negativamente. Esto muestra cuánto influye este compuesto en nuestro querido ADN.
Por otro lado, el etilenglicol fue un poco aburrido. No afectó significativamente la superenrollamiento del ADN bajo estrés. Se comportó como ese amigo que no contribuye mucho a la diversión de una salida en grupo.
En contraste, el PEG fue la estrella del espectáculo. Suprimió la separación local de cadenas en ADN superenrollado negativamente y facilitó que el ADN mantuviera su estructura. Esto muestra que diferentes agentes tienen roles únicos cuando se trata del ambiente del ADN.
Aplicaciones en la vida real
Entender cómo los co-solutos afectan al ADN es importante por varias razones. Primero, puede ayudar a los científicos a entender mejor cómo se comporta el ADN en organismos vivos. Dado que las células vivas están llenas de muchos tipos diferentes de moléculas, lo que vemos en pruebas de laboratorio con ADN puede no aplicarse siempre a lo que sucede en la vida real.
Para los investigadores, los hallazgos pueden ayudar a mejorar experimentos que involucran ADN y proteínas. Si el ADN actúa de manera diferente en condiciones hacinadas, entonces los científicos deben tener eso en cuenta cuando usan estudios en vitro (en tubos de ensayo) para hacer predicciones sobre lo que sucede en vivo (en organismos vivos).
La gran imagen
Al final, el estudio de cómo diferentes sustancias afectan la superenrollamiento del ADN resalta la complejidad de la biología molecular. El ADN no solo es afectado por sí mismo, sino por todo su entorno circundante. Estas interacciones y dinámicas son importantes para entender correctamente cómo funciona el ADN y cómo interactúa con otras moléculas.
Así que la próxima vez que pienses en el ADN, no lo imagines solo como una sencilla doble hélice. Piénsalo como un bailarín en una sala llena, respondiendo a las melodías tocadas por sus varios compañeros. Con la cantidad justa de glicerol o PEG, la actuación puede ser suave o torpe, dependiendo del ambiente. ¡Y eso es lo que hace que estudiar el ADN sea tan emocionante!
Fuente original
Título: Molecular Crowding Suppresses Mechanical Stress-Driven DNA Strand Separation
Resumen: Molecular crowding influences DNA mechanics and DNA - protein interactions and is ubiquitous in living cells. Quantifying the effects of molecular crowding on DNA supercoiling is essential to relating in-vitro experiments to in-vivo DNA supercoiling. We use single molecule magnetic tweezers to study DNA supercoiling in the presence of dehydrating or crowding co-solutes. To study DNA supercoiling, we apply a stretching force of 0.8 pN to the DNA and then rotate one end of the DNA to induce supercoiling. In a 200 mM NaCl buffer without co-solutes, negatively supercoiled DNA absorbs some of the tortional stress by forming locally melted DNA regions. The base-pairs in these locally melted regions are believed to adopt a configuration where nucleotide base pairing is disrupted. We find that the presence of dehydrating co-solutes like glycerol and ethylene glycol results in further destabilization of base-pairs in negatively supercoiled DNA. The presence of polyethylene glycol, commonly used as crowding agents, suppresses local strand separation and results in plectoneme formation even when DNA is negatively supercoiled. The results presented in this letter suggest many further directions for studies of DNA supercoiling and supercoiled DNA - protein interactions in molecular conditions that approximate in-vivo molecular composition. SIGNIFICANCEAccurate modelling of DNA mechanics is central to interpreting results of single molecule studies of DNA mechanics and DNA-protein interactions. While the effect of molecular conditions on short and relaxed DNA has been studied, the influence of molecular conditions on DNA supercoiling has not been explored. We present the first single molecule study of DNA supercoiling in presence of crowding and dehydrating co-solutes. We observe that co-solutes can increase or completely suppress stress-driven local strand separation in negatively supercoiled DNA. This change of DNA supercoiling is likely to significantly affect the function of DNA-binding proteins. Our results motivate the need for systematic exploration of DNA supercoiling in presence of co-solutes to accurately relate in-vitro DNA-protein interactions to in-vivo DNA-protein interactions.
Autores: Parth Rakesh Desai, John F. Marko
Última actualización: 2024-12-12 00:00:00
Idioma: English
Fuente URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.11.628023
Fuente PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.11.628023.full.pdf
Licencia: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
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