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# Biología # Bioingeniería

Apuntando a Células con Nanostructuras de ADN

Los científicos usan origami de ADN para mejorar la entrega de medicamentos específicos para enfermedades.

Indra Van Zundert, Elena Spezzani, Roger R. Brillas, Lars Paffen, Angelina Yurchenko, Tom F. A. de Greef, Lorenzo Albertazzi, Alessandro Bertucci, Tania Patiño

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Las interacciones en la superficie de las células son súper importantes para muchos procesos biológicos. Ayudan en cosas como la comunicación entre células, el funcionamiento de nuestro sistema inmune y cómo las células se pegan entre sí. Estas interacciones también son clave para mantener nuestros tejidos sanos. Cuando algo falla, puede llevar a enfermedades. Así que entender cómo funcionan estas interacciones puede ayudar a los científicos a desarrollar nuevos medicamentos y herramientas para diagnosticar condiciones.

El Papel de la Nanotecnología

Recientemente, los científicos han visto un gran potencial en usar partículas diminutas, conocidas como Nanopartículas, para apuntar a Receptores celulares específicos. Estas nanopartículas se pueden personalizar en tamaño y tienen superficies especiales que les permiten unirse a varias moléculas. Esta personalización puede hacerlas más efectivas para apuntar a ciertas células. Por ejemplo, unir más señales o “ligandos” a una sola nanopartícula puede mejorar su capacidad para encontrar y unirse a receptores celulares específicos.

El Desafío de Apuntar

Aunque ha habido avances en el uso de nanopartículas para el apunte, controlar cuántas señales hay en una partícula y dónde están posicionadas es bastante complicado. Aquí es donde entra el origami de ADN. Usando un largo tramo de ADN, los científicos pueden crear formas y estructuras que son precisas y programables. Pueden colocar diferentes moléculas en estas estructuras de ADN exactamente donde las quieren, lo que puede mejorar cómo apuntan a las células.

Origami de ADN: Un Cambio de Juego

El origami de ADN permite a los investigadores construir estructuras diminutas en 1D, 2D e incluso 3D a partir de ADN. Estas estructuras pueden actuar como pequeños autobuses, llevando moléculas importantes a células específicas. La capacidad de poner estas moléculas en lugares específicos es crucial para el apunte. Diferentes espacios entre las señales pueden influir en qué tan bien se unen a las células. Debido a esta flexibilidad de diseño, el origami de ADN muestra potencial para estudiar cómo interactúan las células.

Aplicaciones del Mundo Real del Origami de ADN

En los últimos diez años, los científicos han trabajado duro para asegurar que el origami de ADN sea seguro para usar en organismos vivos. Esto significa asegurarse de que no cause daño ni se descomponga demasiado rápido en el cuerpo. Buscan aplicar el origami de ADN en varios campos, incluyendo el tratamiento del cáncer, la terapia génica y el desarrollo de vacunas. Por ejemplo, el origami de ADN puede entregar medicamentos contra el cáncer directamente a las células tumorales, minimizando el daño a las células sanas.

Desafíos en la Investigación Actual

Hasta ahora, la mayoría de los estudios han mirado qué tan bien el origami de ADN apunta a las células, pero hay muchos detalles que aún se desconocen. No se sabe mucho sobre cómo interactúa el origami de ADN con las células a pequeña escala. La mayoría de la investigación se ha centrado en medir resultados después de un cierto tiempo, sin mirar las interacciones iniciales entre las estructuras de ADN y las membranas celulares.

Los Próximos Pasos

Para llenar estos vacíos, los investigadores están estudiando cómo interactúa el origami de ADN con las membranas celulares desde el principio. Están usando un método llamado seguimiento de partículas individuales (SPT). Esta técnica les permite observar el movimiento de estructuras de ADN individuales a lo largo del tiempo. Al observar cómo estas estructuras se difunden, se unen y entran en las células, pueden obtener información sobre cómo funciona la entrega de medicamentos dirigida en tiempo real.

Experimentando con Nanovarillas de ADN

En sus experimentos, los científicos crearon nanovarillas de ADN que fueron funcionalizadas con anticuerpos especiales o Aptámeros. Estos son como pequeñas banderas que ayudan a la varilla a encontrar y unirse a receptores específicos en la superficie de células de cáncer de mama, que tienen un montón de un receptor llamado EGFR. Al observar cómo se mueven y se unen estas nanovarillas, los investigadores pueden aprender más sobre qué tan efectivas son sus métodos de apunte.

La Configuración Experimental

Los investigadores usaron dos tipos de células: células de cáncer de mama (con alto EGFR) y células renales (con bajo EGFR) para comparación. El objetivo era ver qué tan bien las nanovarillas podían diferenciar entre los dos tipos de células según la cantidad de receptores que tienen. Esto puede ayudar a establecer si su enfoque de apunte es selectivo.

Monitoreando Interacciones

Para monitorear qué tan bien las nanovarillas de ADN se estaban uniendo a las células, los investigadores capturaron imágenes de estas interacciones. Usaron microscopios avanzados para visualizar cómo se comportaban las nanovarillas de ADN después de ser introducidas en las células. Al analizar las imágenes, pudieron ver cuántas varillas se unieron a las células y cuánto tiempo permanecieron unidas.

Observando el Movimiento

En sus observaciones, las nanovarillas de ADN no funcionalizadas (las simples sin banderas especiales) se movieron de manera aleatoria, como un niño corriendo en un parque. En cambio, las nanovarillas funcionalizadas mostraron patrones de movimiento diferentes cuando encontraban su objetivo. Algunas se ralentizaban cerca de la superficie celular, indicando que se estaban uniendo con éxito a la célula.

Estadísticas de Unión

Los investigadores calcularon cuántas de estas nanovarillas se unieron con éxito a las células objetivo a lo largo del tiempo. Notaron que las varillas funcionalizadas tenían un porcentaje de unión significativamente más alto en comparación con las no funcionalizadas. Esto sugiere que su enfoque de apunte funcionó bien.

La Especificidad Importa

Curiosamente, las nanovarillas decoradas con aptámeros (un tipo de bandera) mostraron un patrón de unión diferente en comparación con las que tenían anticuerpos (otro tipo de bandera). Mientras que los anticuerpos tenían una caída abrupta en la unión después de un pico inicial, las varillas cubiertas con aptámeros aumentaron su unión con el tiempo. Esta observación puede indicar que los aptámeros pueden proporcionar una interacción más fuerte y estable con el receptor objetivo.

Probando Diferentes Tipos de Células

A continuación, los investigadores querían ver cómo se desempeñaban las nanovarillas en células con menor expresión de receptores. Al comparar la unión de nanovarillas a células de alto y bajo nivel de EGFR, podrían evaluar qué tan efectiva era su método de apunte. Observaron que las nanovarillas apuntaban a las células más efectivamente con altos niveles de EGFR, sugiriendo que su selectividad era buena.

La Cinética de la Unión

Para entender mejor cómo interactuaban las nanovarillas con los receptores, los investigadores examinaron la cinética de estas interacciones. Se centraron en qué tan rápido las nanovarillas se unían a los receptores y cuán pronto se despegaban. Al analizar cuánto tiempo las varillas permanecían unidas, los investigadores podían calcular la fuerza de su unión.

Decodificando la Dinámica de Unión

Los resultados revelaron algunos hallazgos sorprendentes. Por ejemplo, incluso con más banderas de unión en las nanovarillas, el tiempo de unión no aumentó significativamente para las varillas decoradas con anticuerpos. Esto podría deberse al tamaño más grande de los anticuerpos, causando alguna interferencia, mientras que los aptámeros, siendo más pequeños, permitieron mejores interacciones.

Implicaciones para la Investigación Futura

Los hallazgos de estos experimentos arrojan luz sobre cómo el origami de ADN puede apuntar efectivamente a tipos específicos de células. Estos conocimientos tienen implicaciones significativas para diseñar mejores sistemas de entrega de medicamentos. Los científicos pueden usar esta información para crear tratamientos más efectivos y selectivos para enfermedades, incluyendo el cáncer.

En Resumen: La Imagen Más Grande

En conclusión, los investigadores están haciendo avances emocionantes para entender cómo el origami de ADN interactúa con las superficies celulares. Al usar técnicas avanzadas como el seguimiento de partículas individuales, pueden sondear estas interacciones más a fondo que nunca. Sus hallazgos no solo mejoran el conocimiento científico, sino que también abren nuevas puertas para crear terapias dirigidas y sistemas de entrega de medicamentos. El futuro se ve brillante a medida que los investigadores continúan desentrañando los misterios de las nanoestructuras de ADN y su potencial en la medicina.

Por Qué Esto Importa

En términos más simples, la capacidad de apuntar a células específicas es como enviar un misil guiado a una zona objetivo mientras se evitan los transeúntes inocentes. A medida que los científicos se vuelven más hábiles en usar el origami de ADN para estos propósitos, no solo mejoran las terapias, sino que también aseguran menos efectos secundarios para los pacientes. En el mundo de la ciencia, cada descubrimiento puede llevar a nuevos y mejores enfoques para enfrentar desafíos de salud complejos.

¿Y quién sabe? En el futuro, podríamos tener nanobots zumbando en nuestro torrente sanguíneo, entregando medicamentos justo donde se necesitan, mientras evitan todo el tráfico molesto de nuestro cuerpo.

Fuente original

Título: Unveiling DNA Origami Interaction Dynamics on Living Cell Surfaces by Single Particle Tracking

Resumen: Due to the unique spatial addressability of DNA origami, targeting ligands (e.g. aptamers or antibodies) can be specifically positioned onto the surface of the nanostructure, constituting an essential tool for studying ligand-receptor interactions at the cell surface. While the design and ligand incorporation into DNA origami nanostructures are well-established, the study of cell surface interaction dynamics is still in the explorative phase, where in depth fundamental understanding on the molecular interactions remains underexplored. This study uniquely captures real-time encounters between DNA origami and cells in-situ using single particle tracking (SPT). Here, we functionalized DNA nanorods (NRs) with antibodies or aptamers specific to the epidermal growth factor receptor (EGFR) and used them to target EGFR-overexpressing cancer cells. SPT data revealed that ligand coated NRs selectively bound to the receptors expressed in target cancer cells, while non-functionalized NRs only display negligible cell interactions. Furthermore, we explored the effect of ligand density on the DNA origami, which revealed that aptamer-decorated NRs exhibit non-linear binding characteristics, whereas this effect in antibody-decorated NRs was less pronounced. This study provides new mechanistic insights into the fundamental understanding of DNA origami behaviour at the cell interface, with unprecedented spatiotemporal resolution, aiding the rational design of ligand-targeted DNA origami for biomedical applications.

Autores: Indra Van Zundert, Elena Spezzani, Roger R. Brillas, Lars Paffen, Angelina Yurchenko, Tom F. A. de Greef, Lorenzo Albertazzi, Alessandro Bertucci, Tania Patiño

Última actualización: Dec 23, 2024

Idioma: English

Fuente URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.23.628980

Fuente PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.23.628980.full.pdf

Licencia: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Cambios: Este resumen se ha elaborado con la ayuda de AI y puede contener imprecisiones. Para obtener información precisa, consulte los documentos originales enlazados aquí.

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