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# Biologia # Ecologia

Revolucionando a Pesquisa em Biodiversidade com eDNA

Uma nova base de dados melhora estudos de biodiversidade ao analisar DNA ambiental.

Rubén González-Miguéns, Alex Gàlvez-Morante, Margarita Skamnelou, Meritxell Antó, Elena Casacuberta, Daniel J. Richter, Daniel Vaulot, Javier del Campo, Iñaki Ruiz-Trillo

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Banco de Dados de eDNA Banco de Dados de eDNA Aumenta as Perspectivas de Biodiversidade estudo da vida na Terra. Nova base de dados eKOI transforma o
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Metabarcoding é um método moderno usado pra estudar a biodiversidade, especialmente a variedade de vida encontrada em diferentes habitats. Nos últimos 20 anos, se tornou uma ferramenta favorita entre os pesquisadores porque permite que eles coletem dados sem os preconceitos que métodos tradicionais podem trazer. A amostragem tradicional muitas vezes envolve coletar amostras fisicamente, o que pode deixar de fora muitos organismos, principalmente os minúsculos. O metabarcoding permite que os cientistas coletem e analisem o DNA ambiental (eDNA), o que significa que conseguem detectar organismos simplesmente amostrando o ambiente, em vez de precisar pegá-los primeiro.

Essa inovação é como descobrir o que tem dentro de uma caixa sem abri-la. Você só olha a poeira em cima pra saber o que tinha lá dentro. Neste caso, em vez de poeira, os cientistas tão olhando pra material genético flutuando no solo ou na água.

Por Que o eDNA É Importante?

O DNA ambiental é o material genético que os organismos deixam pra trás no ambiente. Pode ser células da pele, pelos, fezes, ou até pedaços de DNA que se desprendem pro ambiente. Os pesquisadores podem coletar amostras de lugares como rios, lagos ou solo de florestas, e depois analisar esse DNA pra descobrir quais espécies estão presentes. Esse método é especialmente útil pra criaturas difíceis de encontrar como insetos ou microrganismos, que podem ser perdidos nos métodos tradicionais de amostragem.

Imagina tentar contar todos os peixes em um lago grande pescando um por um. Isso ia levar uma eternidade, e você provavelmente ia perder muitos peixes que nadam pra longe. Mas se você pudesse pegar uma amostra de água e procurar pelo DNA dos peixes, teria uma visão muito mais clara do que tá vivendo ali.

Genes Ribossomais e Seu Papel

Um método popular de analisar eDNA é olhar pra genes ribossomais como o gene 18S rRNA. Esses genes estão presentes em todos os seres vivos e são fundamentais pra como as células funcionam. O gene 18S é especialmente útil porque tem regiões que são muito semelhantes entre as espécies, além de regiões que variam mais, ajudando os cientistas a identificar relações entre diferentes tipos de organismos.

Mas o gene 18S tem algumas desvantagens. Ele pode ser um pouco "seguro demais" na hora de identificar espécies intimamente relacionadas. Pense nisso como tentar diferenciar dois gêmeos idênticos—às vezes, você simplesmente não consegue. Pra contornar isso, os cientistas começaram a procurar outras regiões de genes ribossomais ou até diferentes tipos de genes que possam oferecer distinções mais claras entre as espécies.

A Busca por Marcadores Melhores

Uma alternativa ao gene 18S é a região do spacer transcrito interno (ITS) de genes ribossomais ou genes como o subunidade do citocromo oxidase I (COI). O Gene COI se tornou bastante popular como o "código de barras" pra identificar animais, especialmente aqueles com grande movimento, como peixes ou insetos.

Existem muitos bancos de dados que compilam esses "códigos de barras" genéticos pra ajudar os pesquisadores. Porém, muitos desses bancos de dados focam principalmente em certos grupos, como animais, e podem deixar de lado outros grupos importantes, como fungos ou criaturas minúsculas que habitam os oceanos.

Imagina entrar numa biblioteca onde a maioria dos livros é sobre gatos, e você tá procurando uma história sobre rãs. Você ia se dar mal! A mesma coisa acontece quando os pesquisadores tentam encontrar dados genéticos pra determinados grupos de organismos—pode ser difícil quando os bancos de dados não são abrangentes.

A Necessidade de Um Novo Banco de Dados

Reconhecendo as lacunas nos bancos de dados existentes, os pesquisadores decidiram criar um novo focado no gene COI, que abrange uma ampla gama de organismos. Esse novo banco de dados tinha como objetivo incluir uma variedade maior de formas de vida, especialmente de grupos que talvez não tenham recebido atenção suficiente em pesquisas anteriores.

Eles arregaçaram as mangas e reuniram todos os dados de COI disponíveis de várias fontes. Esses dados vieram de bancos de dados de acesso livre e envolveram um meticuloso processo de limpeza pra garantir que tudo estivesse preciso. O resultado foi uma coleção bem organizada de informações que permitiria que os cientistas identificassem um número maior de espécies usando metabarcoding.

Limpando os Dados

Construir um banco de dados não é tão simples quanto jogar todos os seus dados numa grande panela e misturar. Um cuidado meticuloso é necessário pra um resultado bem-sucedido. Enquanto compunham os dados, os pesquisadores precisavam remover duplicatas, eliminar sequências que eram muito curtas ou muito longas, e garantir que as informações estivessem o mais limpas e precisas possível.

Isso era como fazer um smoothie bem misturado; se você acidentalmente jogar uma casca de banana velha ou pedaços de gelo que nunca se misturaram, você não ia querer servir isso pros seus convidados, certo? O mesmo princípio se aplica a um banco de dados científico. Cada sequência foi checada e rechecada pra ter certeza que seria útil pra estudos taxonômicos.

Adicionando Mais Ingredientes

Depois de curar as sequências do gene COI, os pesquisadores as combinaram com dados genéticos de genomas mitocondriais completos. Os genomas mitocondriais são basicamente as usinas de energia das células e hospedam um DNA vital que informa muitos aspectos da biologia de um organismo. Os pesquisadores garantiram que tudo estivesse rotulado corretamente. Isso não foi uma tarefa fácil, especialmente porque algumas sequências tinham partes que foram rotuladas incorretamente ou até contaminações de outros organismos.

Pra verificar a integridade das sequências coletadas, eles realizaram experimentos usando a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Esse é um método que permite que os cientistas amplifiquem pequenas quantidades de DNA, facilitando o trabalho com isso. Assim como pegar um eco de um som pra ouvi-lo mais claramente, a PCR ajuda a tornar fragmentos de DNA pequenos e difíceis de detectar muito mais notáveis.

Criando um Banco de Dados Amigável

Com os dados limpos e organizados, o próximo passo foi apresentá-los de uma maneira amigável. Eles desenvolveram um novo banco de dados taxonômico que permitiria que os pesquisadores encontrassem, acessassem e usassem facilmente as informações. Isso foi feito criando categorias padronizadas que ajudariam a garantir que cada pedaço de dado se encaixasse direitinho em seu lugar designado, como uma despensa bem organizada.

Criar uma taxonomia padronizada é vital porque permite que os pesquisadores se comuniquem efetivamente sobre suas descobertas. Por exemplo, se uma pessoa diz "maçã vermelha" e outra diz "maçã que é vermelha," ambas estão se referindo à mesma coisa, mas as palavras podem confundir as discussões. Ter um padrão faz com que todos estejam na mesma página.

Testando o Banco de Dados

Uma vez que tudo estava configurado, era hora de testar a eficácia do banco de dados. Os pesquisadores revisaram 15 estudos diferentes que usaram metabarcoding de COI, analisando o quão bem o novo banco de dados poderia identificar organismos a partir das amostras de eDNA.

Entender essa quantidade imensa de dados não foi uma tarefa simples. Pra visualizar os resultados, eles criaram árvores filogenéticas pra ajudar a ilustrar as relações entre as diferentes espécies identificadas através de seu trabalho. Isso foi uma forma de ver como o DNA se traduziu no que os organismos estavam presentes em cada estudo, meio que traçando uma árvore genealógica.

O Que Eles Encontraram?

Quando os pesquisadores se aprofundaram nos dados e aplicaram o novo banco de dados, foram recompensados com uma empolgante variedade de descobertas. Usando o banco de dados eKOI atualizado, conseguiram identificar muitos organismos, incluindo alguns que tinham sido perdidos antes.

Entre as descobertas estavam grupos antes sub-representados como coanoflagelados e Picozoa. Em termos simples, esses eram pequenos protistas que tinham escapado dos estudos anteriores. Ter um banco de dados mais amplo ajudou os pesquisadores a iluminar esses organismos negligenciados, pintando um quadro mais claro da diversidade ecológica que existe no mundo.

Os Benefícios do eKOI

O banco de dados eKOI se destaca porque aprimora a pesquisa sobre organismos eucariotos. Com sequências mais precisamente curadas, os pesquisadores podem fazer melhores atribuições taxonômicas, especialmente pra grupos que eram difíceis de identificar corretamente.

Aqui vai uma piadinha: se esse banco de dados fosse um restaurante, você poderia dizer que oferece um menu de buffet em vez de apenas hambúrgueres. Você pode experimentar uma variedade maior de pratos em vez de se contentar com apenas uma ou duas opções!

Ao preencher as lacunas nos bancos de dados existentes e fornecer uma abordagem mais inclusiva pra pesquisa de eDNA, o eKOI permite que mais cientistas estudem a vasta gama de formas de vida—especialmente as pequenas, muitas vezes ignoradas.

Aplicações Futuras

E agora, o que vem a seguir? Bem, o banco de dados eKOI abre muitas possibilidades pra futuras pesquisas. Ele pode ajudar no desenvolvimento de primers específicos direcionados a diferentes táxons, semelhante ao que foi feito com os genes ribossomais. Isso significa que os pesquisadores podem criar novas ferramentas pra direcionar organismos específicos e se aprofundar ainda mais no entendimento deles.

Pense nisso como montar uma armadilha de isca especial pra certos peixes em vez de apenas lançar uma rede e torcer pra dar certo. O direcionamento específico permite estudos mais precisos que podem gerar insights valiosos sobre o ecossistema, incluindo como as populações interagem, evoluem e respondem às mudanças ambientais.

Considerações Finais

O banco de dados eKOI contribui significativamente pro campo da pesquisa em biodiversidade. Ao fornecer um recurso robusto e abrangente pra atribuições taxonômicas usando o gene COI, os pesquisadores podem se destacar na compreensão da diversidade de vida que existe no nosso mundo.

Resumindo, pense no banco de dados eKOI como um guia confiável em uma vasta floresta de biodiversidade, ajudando os cientistas a navegar por caminhos desconhecidos e descobrir as joias ocultas da vida eucariota. Essa nova ferramenta pode expandir as fronteiras de como estudamos e entendemos a vida na Terra, guiando o caminho pra desvendarmos os mistérios bem debaixo dos nossos narizes—ou melhor, embaixo dos lagos, no solo e nas profundezas dos nossos oceanos!

Fonte original

Título: A Novel Taxonomic Database for eukaryotic Mitochondrial Cytochrome Oxidase subunit I Gene (eKOI): Enhancing taxonomic resolution at community-level in metabarcoding analyses

Resumo: Metabarcoding has emerged as a robust method for understanding biodiversity patterns by retrieving environmental DNA (eDNA) directly from ecosystems. Its low cost and accessibility have extended its use across biological topics, from symbiosis to biogeography, and ecology. A successful metabarcoding application depends on accurate and comprehensive reference databases for proper taxonomic assignment. The 18S rRNA gene is the primary genetic marker used for general/broad eukaryotic metabarcoding due to its combination of conserved and hypervariable regions, and the availability of extensive taxonomically-informed reference databases like PR2 and SILVA. Despite its advantages, 18S rRNA has certain limitations at lower taxonomic levels, depending on the lineage. Alternative fast-evolving molecular markers, such as the mitochondrial cytochrome oxidase subunit I (COI) gene, have been adopted as widely used "barcoding genes" for eukaryotes due to their resolution to the species level. However, the COI gene lacks a curated taxonomically-informed database covering all eukaryotes, including protists, comparable to those available for 18S rRNA. To address this gap, we introduce eKOI, a curated COI gene database aimed at enhancing the taxonomic annotation and primer design for COI-based metabarcoding at the community level. This database integrates COI gene data from GenBank and mitochondrial genomes that are publicly available, followed by rigorous manual curation to eliminate redundancies and contaminants and to correct taxonomic annotations. We validate using the eKOI database for taxonomic annotation of protists by re-annotating several COI-based metabarcoding studies, revealing previously unidentified biodiversity. Phylogenetic analyses confirmed the accuracy of the taxonomic annotations, highlighting the potential of eKOI to uncover new biodiversity in various eukaryotic lineages.

Autores: Rubén González-Miguéns, Alex Gàlvez-Morante, Margarita Skamnelou, Meritxell Antó, Elena Casacuberta, Daniel J. Richter, Daniel Vaulot, Javier del Campo, Iñaki Ruiz-Trillo

Última atualização: 2024-12-09 00:00:00

Idioma: English

Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.05.626972

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.05.626972.full.pdf

Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Alterações: Este resumo foi elaborado com a assistência da AI e pode conter imprecisões. Para obter informações exactas, consulte os documentos originais ligados aqui.

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