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Nuovo metodo per studiare il tessuto adiposo bruno

La ricerca presenta un modo più sicuro per studiare il grasso bruno negli esseri umani.

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Il Tessuto adiposo bruno (BAT) ha attirato l'attenzione come possibile modo per combattere l'obesità e i problemi di salute correlati. Le ricerche dimostrano che le persone obese tendono ad avere meno BAT. Quando attivato, il BAT brucia energia e assorbe grassi e zuccheri. Gli scienziati spesso usano un tipo speciale di scansione che coinvolge un tracciante al glucosio per misurare quanta energia sta usando il BAT.

Tuttavia, studiare il BAT negli esseri umani è complicato. Il tessuto è difficile da raggiungere a causa della sua posizione nel corpo, rendendo difficile prendere Biopsie, che sono campioni di tessuto. La maggior parte delle informazioni che abbiamo sul BAT proviene da studi sugli animali, come i roditori. Ricerche recenti hanno evidenziato che il BAT umano si comporta in modo diverso rispetto al BAT dei roditori, in particolare nel modo in cui viene attivato dagli ormoni.

Negli adulti, una quantità significativa di grasso bruno si trova principalmente vicino ai reni, lungo la colonna vertebrale e nell'area del collo. Gran parte della nostra comprensione di questo tessuto proviene da studi che hanno preso campioni durante interventi chirurgici per altre condizioni. Questo metodo non consente studi in tempo reale poiché il BAT è solitamente inattivo durante queste procedure.

I ricercatori hanno cercato un modo migliore e più sicuro per prendere campioni di BAT senza dover ricorrere a procedure chirurgiche invasive. In questo studio, è stato testato un nuovo metodo che utilizza l'ecografia per guidare piccole biopsie con un ago. Questo potrebbe aiutare a raccogliere campioni da individui sani e consentire uno studio più approfondito del BAT.

Design dello studio

La ricerca ha ricevuto approvazione etica e sono stati invitati a partecipare volontari sani di età compresa tra 18 e 45 anni con un peso normale. Non sono stati inclusi coloro che avevano malattie recenti, erano in cura o avevano malattie croniche. Prima delle biopsie, ai partecipanti sono stati sottoposti vari test per assicurarsi che fossero sani.

Dopo un periodo di digiuno, i partecipanti sono venuti in ospedale. È stato chiesto loro di astenersi dall'esercizio prima della biopsia. I ricercatori hanno usato l'ecografia per localizzare il BAT nell'area del collo. Dopo aver iniettato un anestetico locale, hanno usato un piccolo ago da biopsia per raccogliere campioni di tessuto. Hanno anche prelevato un campione di grasso addominale per confronto.

In totale, 32 volontari sani hanno contribuito allo studio. Le biopsie sono state raccolte, congelate rapidamente per i test o utilizzate per far crescere cellule pre-adipocitarie, che hanno il potenziale per diventare cellule adipose.

Isolamento e analisi dell'RNA

I ricercatori hanno isolato l'RNA dai campioni di BAT e grasso addominale raccolti. Il processo di estrazione ha utilizzato un kit specializzato per massimizzare la quantità di RNA raccolta da piccoli campioni di tessuto. L'RNA è stato quindi utilizzato per valutare l'espressione di alcuni geni legati al metabolismo dei grassi.

Attraverso un'analisi accurata, sono stati in grado di verificare di aver isolato con successo una quantità sufficiente di RNA dalla maggior parte dei campioni. Hanno controllato la presenza di geni specifici tipicamente trovati nel grasso bruno e bianco per vedere come si confrontavano i campioni. Sorprendentemente, hanno trovato un particolare gene più attivo nel grasso bianco rispetto al grasso bruno.

Coltura cellulare e differenziazione

Le preadipociti, le cellule che possono svilupparsi in cellule adipose, sono state isolate da entrambi i tipi di campioni di grasso. I ricercatori miravano a coltivare queste cellule in laboratorio, il che avrebbe permesso loro di studiare il loro comportamento e le loro caratteristiche. Hanno scoperto che, mentre le cellule potevano essere cresciute, non tutte potevano essere trasformate in cellule adipose mature.

È stato notato che alcune colture mostravano una tendenza a svilupparsi in cellule che non accumulano grasso, il che è stato inaspettato. Questo ha indicato che il metodo di raccolta e gestione dei campioni necessitava di ulteriore affinamento per migliorare i tassi di successo.

Hanno anche esaminato l'espressione dei geni termogenici, che sono importanti per la combustione dei grassi. I risultati hanno mostrato che, sebbene alcuni geni potessero essere attivati, non c'era una chiara differenza tra le colture di grasso bruno e bianco.

Progressi nel metodo di biopsia

Il metodo di biopsia guidato da ecografia si è rivelato rapido e relativamente facile da eseguire. La maggior parte dei partecipanti ha riferito un disagio minimo, a parte un lieve bruciore dall'anestesia. Tuttavia, c'è stata una complicazione seria in cui un partecipante ha sviluppato un pneumotorace, una condizione in cui l'aria fuoriesce nello spazio intorno ai polmoni. Questo ha richiesto un intervento medico ma non ha portato a effetti a lungo termine.

Questo incidente ha evidenziato l'importanza di considerare attentamente i rischi associati al prelievo di campioni di tessuto da aree sensibili come il collo. I ricercatori hanno notato che l'uso di un ago più piccolo ha aiutato a prevenire ulteriori complicazioni, anche se hanno riconosciuto le sfide intrinseche in questa procedura.

Direzioni future e miglioramenti

Sebbene il nuovo metodo di ottenere campioni fosse promettente, ci sono diverse aree da migliorare. Un problema principale è la variazione nella quantità di grasso bruno presente nelle persone. Alcuni individui possono averne molto poco o addirittura nessuno, a seconda di fattori come l'età e il peso corporeo.

Studi futuri potrebbero includere controlli per la presenza di BAT utilizzando tecniche di imaging prima di tentare di prendere biopsie. Questo potrebbe aiutare i ricercatori a mirare a individui che hanno sufficiente BAT per uno studio significativo.

Un'altra area che necessita di attenzione è il processo di estrazione dell'RNA. I metodi utilizzati potrebbero essere adattati per ottenere risultati migliori da campioni più piccoli. Approcci più delicati potrebbero essere necessari per migliorare la qualità e la quantità dell'RNA.

Miglioramenti nel modo in cui le cellule vengono gestite e coltivate aiuterebbero anche a ottenere risultati più affidabili. Tecniche avanzate esistono per studiare cellule singole e potrebbero essere utili nell'analisi delle piccole biopsie prelevate in questo studio.

Inoltre, i ricercatori devono valutare attentamente i geni che stanno misurando. Alcuni risultati inaspettati hanno mostrato espressioni geniche nel grasso bianco che non erano state anticipate, indicando possibili errori tecnici.

Conclusione

Questa ricerca ha introdotto un nuovo metodo per ottenere in modo sicuro campioni di tessuto adiposo bruno da soggetti umani. La capacità di isolare preadipociti da questi campioni e analizzare l'Espressione genica offre un'opportunità preziosa per studiare la biologia del grasso bruno. Con ulteriori miglioramenti, questo metodo potrebbe rivelarsi fondamentale per comprendere il ruolo del BAT in varie malattie metaboliche e valutare come risponde a diversi stimoli.

Affinando le tecniche utilizzate in questi studi, gli scienziati sperano di sviluppare una migliore comprensione di come funziona il grasso bruno e del suo potenziale per aiutare nel trattamento dell'obesità. La ricerca futura potrebbe aprire porte per esplorare le interazioni tra il grasso bruno e altri processi corporei, preparando la strada a approcci innovativi per affrontare problemi di salute legati al peso.

Fonte originale

Titolo: An ultrasound-guided biopsy technique for obtaining supraclavicular brown fat biopsies and preadipocytes

Estratto: Studying activated human brown adipose tissue (BAT) in vivo poses challenges due to its intricate anatomical positioning. Through the implementation of an ultrasound-guided biopsy technique, we successfully collected BAT samples from the supraclavicular region of 27 healthy individuals. As a comparative control, subcutaneous white adipose tissue (WAT) was similarly extracted from the same participants. Furthermore, we isolated progenitor cells from four tissue biopsies in both regions, subsequently subjecting them to a 12-day in vitro differentiation protocol following stimulation with 10 {micro}M norepinephrine. To assess the mRNA expression of thermogenic genes within these small tissue samples, we employed a targeted cDNA amplification procedure, followed by conventional quantitative PCR (qPCR). Our study demonstrated that, with further refinement, this biopsy methodology can be used to obtain thermogenic adipose tissue. However, the expression data exhibited considerable diversity, and no statistically significant overall trends emerged for any of the five BAT marker genes (UCP1, PPARGC1A, PRDM16, CIDEA, CITED1), nor for the WAT marker HOXC8. The differentiation capacity of the progenitor cells revealed irregularities, with only three adipocyte cultures (two WAT and one BAT) displaying satisfactory differentiation potential. Remarkably, the differentiated BAT culture displayed a significantly elevated basal UCP mRNA expression level, further induced by 1.7-fold upon stimulation with norepinephrine. In summary, based on the in vitro data, brown adipose samples can be obtained using our ultrasound-guided biopsy technique approach. However, significant refinements are necessary before robust in vivo data can be generated in future intervention studies.

Autori: Søren Nielsen, E. S. Andersen, N. Z. Jespersen, T. I. Henriksen, B. K. Pedersen, C. Scheele

Ultimo aggiornamento: 2024-05-02 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.30.570595

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.30.570595.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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