Combattere la rabbia: nuovi metodi di test all'orizzonte

La rabbia è una malattia seria causata da un virus che colpisce il sistema nervoso centrale, portando alla morte se non trattata in fretta. La maggior parte dei casi di rabbia umana proviene da cani infetti, che rappresentano circa il 99%. Il virus si diffonde principalmente attraverso i morsi. Può anche essere trasmesso tramite graffi o ferite aperte che entrano in contatto con la saliva di un animale infetto. Anche se la rabbia può essere prevenuta con un vaccino, resta un problema di salute preoccupante, specialmente nei paesi con risorse limitate.

Ogni anno, più di 59.000 persone muoiono di rabbia in tutto il mondo, causando una notevole perdita economica stimata intorno agli 8,6 miliardi di dollari. Le Filippine sono un hotspot importante per la rabbia, segnalando circa 200-300 casi ogni anno. In risposta a questo problema continuo, il governo ha stabilito la Legge Anti-Rabbia nel 2007. Purtroppo, nonostante questi sforzi, il numero di casi di rabbia non è diminuito significativamente dal 2006 al 2015.

#L'importanza della rilevazione precoce

La rilevazione e il trattamento precoci giocano un ruolo cruciale nel ridurre le possibilità di morte per rabbia. Il metodo più comunemente usato per rilevare la rabbia negli animali è il test degli anticorpi fluorescenti diretti (dFAT). Questo test richiede Tessuto cerebrale per trovare il virus della rabbia. Anche se è noto per essere veloce e preciso, la sua efficacia diminuisce quando il tessuto cerebrale si decompone, il che è un grosso problema nei climi caldi come le Filippine.

In condizioni tropicali, i Campioni cerebrali possono deteriorarsi rapidamente, rendendoli inadatti per i test. La ricerca indica che quando il tessuto cerebrale viene conservato a temperature elevate, la capacità di rilevare il virus diminuisce rapidamente. Tuttavia, l'RNA vitale da campioni cerebrali può essere identificato per un periodo più lungo anche a temperature elevate.

#Innovazioni nei test per la rabbia

Per migliorare i test per la rabbia, gli scienziati stanno cercando nuovi metodi che offrano maggiore sensibilità e velocità. Un approccio promettente è l'uso della Reazione a Catena della Polimerasi con Trascrizione Inversa (RT-PCR). Questa tecnica può rilevare il virus della rabbia in tessuti che possono avere bassi livelli del virus, come saliva o biopsie cutanee.

Mentre i metodi tradizionali di RT-PCR possono a volte dare falsi positivi a causa di contaminazione, le versioni più recenti di questo test hanno aumentato la precisione. L'assay LN34 Pan-Lyssavirus è un metodo RT-PCR popolare che rileva una vasta gamma di virus della rabbia e mostra un alto grado di sensibilità.

#Raccolta di campioni per il test

Per condurre ricerche sulla rabbia, gli scienziati devono raccogliere campioni. Per questo, raccolgono tessuto cerebrale, oltre ad altri tessuti come la pelle del naso e i follicoli piliferi dai cani. Questi campioni vengono poi conservati a temperature di congelamento fino a quando non sono pronti per l'analisi.

Raccogliere campioni cerebrali comporta un processo dettagliato. Inizia con la rimozione attenta del cranio per accedere al cervello. I ricercatori prelevano campioni da aree specifiche del cervello note per avere maggiori quantità di virus.

Altri campioni, come i complessi sinusali follicolari e il piano nasale, richiedono tecniche diverse. Per questi, si effettuano piccole incisioni per raccogliere il tessuto.

#Estrazione dell'RNA per il test

Una volta raccolti i campioni, i ricercatori devono estrarre l'RNA, che è una copia del materiale genetico del virus. Questo comporta la scomposizione del tessuto e l'uso di kit speciali per isolare l'RNA. L'RNA estratto viene poi conservato a temperature ultrabasse finché non è necessario per il test.

Utilizzando l'RNA estratto da campioni cerebrali positivi, gli scienziati conducono test RT-qPCR per rilevare il virus della rabbia. Campioni di controllo positivi vengono utilizzati per garantire che i test funzionino correttamente.

#Impostazione del test RT-qPCR

I test RT-qPCR richiedono condizioni specifiche. Questo include trovare la temperatura giusta per il test, così come la giusta quantità di primer e sonde necessarie per rilevare il virus. I ricercatori sperimentano con diverse temperature e concentrazioni per trovare l'impostazione ottimale per il test.

Durante questo processo, osservano quanto bene funziona l'assay creando una curva standard. Questa curva aiuta a determinare quanto efficientemente l'assay può rilevare il virus a diverse concentrazioni.

#Validazione del test per precisione

La validazione è cruciale nei test di nuovi metodi. Durante questo processo, l'assay viene testato contro campioni positivi e negativi noti per misurare la sua precisione. I test mirano a garantire che l'assay identifichi correttamente la rabbia e non la scambi per altri virus canini.

I ricercatori devono anche verificare che l'assay possa dare risultati simili quando condotto da persone diverse o utilizzando macchine diverse. Risultati coerenti aiutano a confermare l'affidabilità del test.

#Risultati dai test

Dopo un'ampia validazione, l'assay RT-qPCR ottimizzato ha mostrato risultati promettenti. Ha dimostrato la capacità di rilevare l'RNA del virus della rabbia in campioni cerebrali positivi e in campioni alternativi non cerebrali. Infatti, tutti i campioni testati hanno mostrato risultati affidabili, il che è una buona notizia per gli sforzi di sorveglianza della rabbia in corso.

Tuttavia, sono state identificate alcune sfide. Alcuni campioni precedentemente etichettati come negativi hanno restituito risultati positivi. Questa discrepanza potrebbe verificarsi a causa di bassi livelli di virus che erano non rilevabili da altri metodi di testing, suggerendo la necessità di un miglioramento continuo nella precisione dei test.

#La strada da seguire per il controllo della rabbia

Le organizzazioni sanitarie pubbliche in tutto il mondo stanno lavorando per eliminare la rabbia, con l'obiettivo di raggiungere zero morti per rabbia mediata da cani entro il 2030. Migliorare i metodi diagnostici è una parte chiave di questo obiettivo. Il nuovo assay RT-qPCR sviluppato può aiutare ad accelerare i test e migliorare gli sforzi di monitoraggio della rabbia.

Tuttavia, l'attuale assay è un po' limitato a tipi specifici di campioni. La ricerca futura deve esplorare altre potenziali fonti di campioni per il testing della rabbia. Inoltre, dovrebbero essere sviluppati nuovi metodi di testing per ridurre i costi e renderli più ampiamente accessibili.

#Conclusione

La rabbia rappresenta una minaccia significativa per la salute pubblica, specialmente nei luoghi dove i morsi di cane sono comuni. Anche se ci sono vaccini disponibili, la rabbia continua a reclamare migliaia di vite ogni anno. Metodi di test potenziati, come il nuovo assay RT-qPCR, presentano una via da seguire. Questo test può aiutare a una rilevazione più rapida ed efficiente della rabbia, contribuendo infine a una migliore gestione e controllo della malattia.

Mentre ci sforziamo verso un mondo libero dalla rabbia, la ricerca continua e l'innovazione saranno essenziali per superare le sfide che ci attendono. Dopotutto, tutti noi potremmo usare un mondo in cui possiamo passeggiare con i nostri amici pelosi senza preoccuparci della rabbia.