Simple Science

La science de pointe expliquée simplement

# Biologie# Bioingénierie

Une nouvelle méthode améliore la recherche sur les connexions neuronales

La méthode de patch-walking améliore l'efficacité dans l'étude des connexions cérébrales.

― 7 min lire


Révolutionner lesRévolutionner lestechniques de recherchesur les neuronesde connexion neuronale.La marche sur patch accélère les études
Table des matières

Les scientifiques étudient comment on pense, se souvient et prend des décisions en regardant l'activité cérébrale. Ça implique d'examiner de toutes petites cellules appelées Neurones, qui communiquent entre elles pour former des réseaux qui nous aident à traiter l'information. Ces Connexions, appelées Synapses, jouent un rôle crucial dans le fonctionnement de notre cerveau. Pour en savoir plus sur ces connexions, les scientifiques mesurent la force et la nature des signaux échangés entre les neurones. Cependant, étudier ces connexions est un vrai défi et prend beaucoup de temps, rendant difficile la collecte de suffisamment de données.

La Technique du Patch Clamp

Un des meilleurs moyens d'examiner des neurones individuels et leurs connexions, c'est un truc appelé l'enregistrement patch clamp. Cette technique permet d'obtenir des mesures très précises des signaux électriques dans les neurones. Les chercheurs l'ont utilisée pour comprendre le fonctionnement normal du cerveau et les changements dus aux maladies qui l'affectent. Mais bon, même si l'enregistrement patch clamp fournit des données de haute qualité, c'est aussi long et très laborieux.

Dans les expériences traditionnelles de patch clamp, les scientifiques doivent créer une connexion solide entre une pipette en verre et un neurone. Si la pipette est retirée, la partie restante du neurone peut rendre difficile de se connecter rapidement à un autre neurone. De plus, en travaillant avec des tranches de cerveau, les chercheurs doivent faire attention à ne pas endommager les cellules voisines ou le tissu lui-même. Ça limite le nombre de cellules qui peuvent être étudiées en une journée.

Amélioration du Débit avec l'Automatisation

Récemment, il y a eu des avancées dans la façon dont les expériences de patch clamp sont menées. En automatisant certaines parties du processus, comme la rapidité avec laquelle les pipettes se nettoient et se déplacent, ça a aidé à accélérer les choses. Avec ces améliorations, les chercheurs ont créé des systèmes robotiques qui peuvent effectuer des expériences de patch clamp sans avoir besoin d'une supervision humaine constante. Un de ces systèmes, appelé "PatcherBot", a montré des résultats prometteurs en établissant des connexions avec plusieurs neurones à la fois.

Au fur et à mesure que les scientifiques ont créé des méthodes plus sophistiquées, ils ont pu explorer beaucoup plus de connexions dans le cerveau bien plus vite qu’avant. Certains labos ont même pu étudier plus de vingt mille connexions en utilisant des systèmes automatisés. Bien que ces techniques soient impressionnantes, elles nécessitent souvent du matériel spécialisé, auquel tous les labos n'ont pas accès.

Approche à Deux Pipettes : Patch-Walking

Étant donné les défis des expériences traditionnelles de patch clamp et les améliorations de l'automatisation, une nouvelle méthode appelée "patch-walking" a été proposée. Au lieu d'enlever toutes les pipettes des neurones après chaque enregistrement, une pipette peut être réutilisée pendant que les autres restent en place. Cette méthode permet aux chercheurs d'explorer beaucoup plus de connexions en moins de temps.

En utilisant le patch-walking, les scientifiques peuvent déplacer une seule pipette à travers la tranche de cerveau tout en gardant les autres intactes. Cette méthode permet de collecter des données de plusieurs neurones sans devoir recommencer tout le processus à chaque fois. En adoptant cette technique, les chercheurs ont montré qu'ils pouvaient augmenter significativement le nombre de connexions étudiées.

Méthode et Résultats des Expériences de Patch-Walking

Pour tester l'efficacité du patch-walking, les scientifiques ont mis en place un système automatisé capable de réaliser cette méthode. Ils ont utilisé deux pipettes pour enregistrer systématiquement les neurones dans une tranche de cerveau. Pendant leurs essais, ils ont réussi à obtenir un grand niveau de succès dans la collecte de données utilisables à partir de ces neurones.

Lors de leurs expériences, ils ont réussi à enregistrer de nombreux neurones, avec un bon taux de réussite dans la formation de connexions. Le temps pour réaliser les enregistrements était comparable aux méthodes précédentes mais avec l'avantage supplémentaire de collecter plus de données.

Les expériences ont montré que cette nouvelle approche non seulement a accéléré le processus de collecte de données mais a également conduit à l'étude de plus de connexions. Par exemple, en utilisant la méthode traditionnelle, les chercheurs n’auraient pu examiner qu'une trentaine de connexions, tandis que la méthode de patch-walking a conduit à une augmentation des découvertes.

Test de Connexion

Après avoir enregistré des signaux de paires de neurones, les scientifiques vérifient s'ils sont connectés en stimulant un neurone et en observant la réponse de l'autre. Ça aide à vérifier si les neurones partagent une connexion synaptique. Il y a eu des cas où les scientifiques ont réussi à établir des connexions en fonction de la proximité des neurones, mais certains résultats étaient plus bas que prévu en raison de la variation naturelle du comportement des neurones.

Avantages du Patch-Walking

La méthode de patch-walking offre plusieurs avantages. D'abord, c'est plus rapide et moins dommageable pour le tissu cérébral parce qu'une seule pipette est déplacée à la fois. Ça réduit le risque de perturber des connexions qui pourraient être encore intactes. Ensuite, cette méthode permet aux chercheurs d'obtenir des données des neurones avant que la mort cellulaire ne se produise, ce qui est particulièrement crucial lorsqu'on travaille avec des échantillons précieux ou des types de tissu rares.

Cette approche facilite également le travail des chercheurs qui n’ont peut-être pas des dispositifs sophistiqués pour incorporer plusieurs pipettes dans leurs expériences. Du coup, plus de labos ont la possibilité de réaliser des recherches de haute qualité en utilisant cette technique.

Limitations et Perspectives Futures

Bien que le patch-walking montre un grand potentiel, il y a encore des limitations. Le nombre de connexions trouvées dans certaines expériences était moins que prévu, ce qui pourrait être dû à des variations entre les neurones. En élargissant la méthode pour inclure plus de pipettes, une planification minutieuse est nécessaire pour éviter les collisions entre les délicates pipettes en verre lors de leur déplacement dans la tranche de cerveau.

Dans les futures études, la méthode de patch-walking pourrait intégrer des techniques comme des protéines sensibles à la lumière pour aider à cartographier des réseaux plus larges dans le cerveau de manière plus efficace. De plus, l'apprentissage machine pourrait être utilisé pour trouver des types de cellules spécifiques, cibler certaines connexions et améliorer l'ensemble du processus de recherche.

Conclusion

En résumé, le cerveau est un réseau complexe de neurones connectés, et comprendre ces connexions est crucial pour saisir comment on pense, se souvient et prend des décisions. La technique du patch clamp a longtemps été un outil précieux dans cette recherche mais vient avec des défis qui peuvent ralentir les progrès. L'approche innovante du patch-walking offre un moyen de maximiser le potentiel de la méthode patch clamp, permettant une exploration plus rapide et plus efficace des connexions neuronales. Avec les avancées continues et une accessibilité accrue, cette technique pave la voie à d'autres découvertes en neuroscience.

Source originale

Titre: Patch-walking: Coordinated multi-pipette patch clamp for efficiently finding synaptic connections

Résumé: Significant technical challenges exist when measuring synaptic connections between neurons in living brain tissue. The patch clamping technique, when used to probe for synaptic connections, is manually laborious and time-consuming. To improve its efficiency, we pursued another approach: instead of retracting all patch clamping electrodes after each recording attempt, we cleaned just one of them and reused it to obtain another recording while maintaining the others. With one new patch clamp recording attempt, many new connections can be probed. By placing one pipette in front of the others in this way, one can "walk" across the tissue, termed "patch-walking." We performed 136 patch clamp attempts for two pipettes, achieving 71 successful whole cell recordings (52.2%). Of these, we probed 29 pairs (i.e., 58 bidirectional probed connections) averaging 91 {micro}m intersomatic distance, finding 3 connections. Patch-walking yields 80-92% more probed connections, for experiments with 10-100 cells than the traditional synaptic connection searching method. MotivationRecognizing the manual labor and time-intensive nature of patch clamping when trying to find synaptic connections, we aim to improve its efficiency. We introduce a novel approach, termed "patch-walking," where one patch clamping electrode is cleaned and reused, enabling the exploration of numerous connections with a single recording attempt and improving the efficiency of identifying synaptic connections.

Auteurs: Mighten C. Yip, M. M. Gonzalez, C. F. Lewallen, C. R. Landry, I. Kolb, B. Yang, W. M. Stoy, M.-f. Fong, M. J. Rowan, E. S. Boyden, C. R. Forest

Dernière mise à jour: 2024-08-15 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.30.587445

Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.30.587445.full.pdf

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

Merci à biorxiv pour l'utilisation de son interopérabilité en libre accès.

Plus d'auteurs

Articles similaires