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# Biologie # Biologie cellulaire

Une nouvelle façon d'étudier les structures cellulaires

Explorer les avantages de la microscopie ExAPC pour l'observation des cellules.

Takafumi Miyamoto, L. N. Sari, T. Nishimura, K. Kainoh, N. Onodera, M. Kano, M. Masuda, Y. Tamura, Y. Hayashi, Y. Yamamoto, S.-I. Takahashi, Y. Mishima, Y. Yoneyama, Y. Takeuchi, H. Ohno, Y. Ohashi, M. Sekiya, T. Matsuzaka, H. Shimano

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Les cellules sont les éléments de base de la vie. À l'intérieur de ces cellules, il y a des compartiments spéciaux appelés organelles. Chaque organelle a son propre boulot et ensemble, elles aident la cellule à bien fonctionner. La façon dont ces organelles sont formées, agencées et combien il y en a dans une cellule aide à définir à quoi ressemble la cellule et comment elle se comporte.

L'Importance de Voir l'Organisation Cellulaire

Pour comprendre comment les cellules fonctionnent, c'est super important de voir comment ces organelles sont organisées. Une façon pour les scientifiques de visualiser cette organisation est d'utiliser une méthode appelée imagerie par fluorescence. Cette technique utilise une lumière qui peut faire briller certaines parties de la cellule, permettant aux chercheurs de voir les formes et les emplacements des différentes organelles.

L'imagerie par fluorescence a plein d'avantages : c'est rapide, spécifique et ça peut être utilisé sur différents types de cellules. Cependant, cette méthode a aussi des inconvénients. Par exemple, la lumière brillante peut endommager les cellules ou faire disparaître les parties qui brillent. À cause de ces problèmes, les scientifiques cherchent d'autres méthodes comme l'imagerie sans marquage, qui leur permet d'observer les cellules sans ajouter de substances qui pourraient interférer avec leur état naturel.

Un Regard Plus Près sur l'Imagerie Sans Marquage

Les méthodes d'imagerie sans marquage offrent un moyen d'étudier les cellules sans avoir besoin de marqueurs fluorescents. Une méthode intéressante s'appelle la microscopie ExAPC. Dans ce processus, la lumière passe à travers une plaque spéciale qui aide à créer des images plus claires en réduisant les effets indésirables dus à la diffusion de la lumière.

Avec la microscopie ExAPC, les chercheurs peuvent regarder plusieurs organelles en même temps. C'est important car ça les aide à capturer des images détaillées qui peuvent révéler comment les organelles travaillent ensemble à l'intérieur de la cellule. Malgré ses promesses, la microscopie ExAPC est encore en test pour établir pleinement son efficacité en tant que moyen d'observer les cellules sans étiquettes.

Visualiser les Cellules Vivantes avec la Microscopie ExAPC

Des recherches ont montré que la microscopie ExAPC peut visualiser efficacement le fonctionnement interne des cellules vivantes. Par exemple, elle a été utilisée pour voir les formes et les comportements des cellules cancéreuses des poumons A549. Les images prises avec cette technique révèlent des structures clés dans ces cellules, comme le noyau et les Mitochondries, fournissant des aperçus sur leur organisation.

Cependant, distinguer les différentes organelles uniquement à partir de ces images peut être difficile. Les scientifiques ont découvert que certaines organelles peuvent être identifiées en fonction de leurs propriétés uniques, comme leur indice de réfraction, qui est la façon dont elles plient la lumière. Le noyau, le nucléole et les mitochondries font partie de ceux qui peuvent être bien vus avec la microscopie ExAPC.

Les chercheurs ont remarqué que quand les cellules étaient observées dans le temps, ils pouvaient voir comment les structures changeaient et interagissaient pendant différents processus comme la division cellulaire et la mort cellulaire programmée.

Observer les Comportements Cellulaires

Avec la microscopie ExAPC, les scientifiques ont pu étudier divers comportements des cellules. Ils ont observé comment les cellules se divisent et comment des structures spécifiques à l'intérieur des cellules se comportent pendant ce processus. Par exemple, pendant la division des cellules HeLa (un type de lignée cellulaire humaine), les chercheurs ont pu capturer des changements dans l'organisation de ces cellules en temps réel.

En plus de la division cellulaire, les chercheurs ont également observé comment les cellules subissent l'apoptose, un processus de mort cellulaire programmée, et un phénomène appelé entose, où une cellule engloutit une autre. Ces observations sont importantes car elles aident les scientifiques à comprendre comment les cellules vivent et meurent et comment elles interagissent avec leur environnement.

Les Condensats biomoléculaires et Leur Rôle dans les Cellules

Un point spécifique de recherche est sur les condensats biomoléculaires, qui sont des clusters denses de protéines et d'autres molécules dans les cellules. Ces condensats jouent des rôles importants dans l'organisation de diverses réactions biochimiques. Les scientifiques ont utilisé la microscopie ExAPC pour identifier ces structures dans des cellules vivantes, ce qui a donné des aperçus sur comment elles peuvent affecter les fonctions cellulaires.

Dans des expériences, les chercheurs ont découvert des structures sphériques dans le cytoplasme des cellules HeLa, connues sous le nom de structures ressemblant à des condensats biomoléculaires (BCLs). Ces structures ont été observées en train de fusionner et de se comporter de manière dynamique, changeant de forme et de taille. Des expériences qui modifiaient les conditions dans les cellules, comme l'ajout de certains produits chimiques, ont montré que ces BCLs pouvaient apparaître ou disparaître, mettant en lumière leur nature dynamique.

Les Gouttelettes lipidiques : Un Autre Composant Clé

Un autre sujet d'étude important est les gouttelettes lipidiques (LDs), qui sont de petits compartiments de stockage pour les graisses dans les cellules. Ces gouttelettes sont cruciales pour l'équilibre énergétique et aident à protéger les cellules des effets nocifs d'excès de graisses. Comme les condensats biomoléculaires, les gouttelettes lipidiques peuvent aussi se former et changer en fonction de diverses conditions.

Grâce à la microscopie ExAPC, les chercheurs ont cartographié la croissance et le comportement des gouttelettes lipidiques dans des cellules vivantes. Par exemple, ils ont étudié comment les gouttelettes lipidiques se forment lorsque les cellules sont exposées à certains nutriments. Ils ont observé différentes phases de croissance pour ces gouttelettes au fil du temps, aidant à clarifier comment elles se développent et augmentent de taille.

Les chercheurs ont découvert que les gouttelettes lipidiques interagissent souvent avec d'autres organelles dans la cellule, comme les mitochondries. Cette interaction est essentielle pour comprendre comment les cellules gèrent l'énergie et la communication. En suivant les mouvements des gouttelettes lipidiques, les scientifiques ont pu voir comment elles migrent vers différentes parties de la cellule.

La Dynamique Mitochondriale et Son Importance

Les mitochondries sont connues comme la centrale énergétique de la cellule. Elles produisent l'énergie dont les cellules ont besoin pour fonctionner. Les mitochondries ne sont pas statiques ; elles changent constamment de forme et peuvent se diviser ou se fusionner. Ce comportement dynamique est crucial pour de nombreux processus cellulaires, y compris la production d'énergie et l'apoptose.

La microscopie ExAPC a permis aux scientifiques d'observer de près ces changements dans les mitochondries sans utiliser de marqueurs nocifs. Les chercheurs ont pu identifier des points spécifiques où les mitochondries se divisent et fusionnent. Ils ont noté que les mitochondries de longueurs similaires ont tendance à se rejoindre lors des événements de fusion, ce qui éclaire les processus qui régulent leurs comportements.

Lorsque les cellules subissent du stress, comme l'exposition à des médicaments qui impactent la production d'énergie, les mitochondries peuvent changer leur structure de manière dramatique. Les chercheurs utilisant la microscopie ExAPC ont noté qu'après un traitement avec un de ces médicaments, la forme des mitochondries changeait rapidement de longues chaînes à des formes globulaires, ce qui est crucial pour comprendre l'impact du stress sur la santé des cellules.

L'Avenir de l'Imagerie et de la Recherche Cellulaire

La recherche autour de la microscopie ExAPC ne fait que commencer, mais elle montre de grandes promesses pour le futur de la biologie cellulaire. Cette technique permet aux scientifiques de voir des détails sur les structures et les comportements cellulaires sans avoir besoin de colorants fluorescents, ce qui pourrait mener à des observations plus précises et durables des cellules vivantes.

À mesure que cette technologie avance, elle peut mener à de nouvelles découvertes sur comment les composants cellulaires fonctionnent et interagissent sous différentes conditions. La compréhension des condensats biomoléculaires, des gouttelettes lipidiques et des mitochondries offrira des aperçus précieux sur diverses maladies et les principes fondamentaux de la vie.

En résumé, examiner comment les cellules sont organisées et comment elles fonctionnent est crucial pour comprendre la vie à un niveau cellulaire. Alors que les scientifiques développent de meilleures techniques d'imagerie comme la microscopie ExAPC, ils pourront explorer des comportements et interactions cellulaires plus complexes, aidant dans la quête continue de comprendre comment la vie fonctionne.

Source originale

Titre: Label-free imaging of intracellular structures in living mammalian cells via external apodization phase-contrast microscopy

Résumé: Developing techniques to visualize intracellular structures, which influence the spatiotemporal functionality of biomolecules, is essential for elucidating mechanisms governing cellular behavior. In this study, we demonstrate that label-free external apodization phase-contrast (ExAPC) microscopy serves as a valuable tool for the simultaneous observation of various intracellular structures with high spatiotemporal resolution, while successfully mitigating halo artifacts. Additionally, through quantitative analysis of images obtained by combining ExAPC microscopy with fluorescence microscopy, we identified distinct heterogeneities in biomolecular condensates, lipid droplets, and mitochondria. Our findings highlight the potential of ExAPC microscopy to provide detailed insights into alterations in intracellular structures associated with diverse cellular processes, corroborating the existing knowledge and potentially contributing to the discovery of novel cellular mechanisms.

Auteurs: Takafumi Miyamoto, L. N. Sari, T. Nishimura, K. Kainoh, N. Onodera, M. Kano, M. Masuda, Y. Tamura, Y. Hayashi, Y. Yamamoto, S.-I. Takahashi, Y. Mishima, Y. Yoneyama, Y. Takeuchi, H. Ohno, Y. Ohashi, M. Sekiya, T. Matsuzaka, H. Shimano

Dernière mise à jour: 2024-12-27 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.01.582671

Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.01.582671.full.pdf

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

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