Luchando contra la Rabia: Nuevos Métodos de Prueba en el Horizonte

La rabia es una enfermedad seria causada por un virus que afecta el sistema nervioso central, llevando a la muerte si no se trata rápido. La mayoría de los casos de rabia en humanos provienen de perros infectados, representando alrededor del 99%. El virus se transmite principalmente a través de mordeduras. También se puede pasar por rasguños o heridas abiertas que entran en contacto con la saliva de un animal infectado. Aunque la rabia se puede prevenir con una vacuna, sigue siendo un problema de salud preocupante, sobre todo en países con recursos limitados.

Cada año, más de 59,000 personas mueren de rabia en todo el mundo, lo que resulta en una pérdida económica significativa estimada en alrededor de $8.6 mil millones. Filipinas es un lugar crítico para la rabia, reportando entre 200 y 300 casos cada año. En respuesta a este problema, el gobierno estableció la Ley Anti-Rabia en 2007. Desafortunadamente, a pesar de estos esfuerzos, el número de casos de rabia no disminuyó significativamente entre 2006 y 2015.

#La Importancia de la Detección Temprana

La detección y tratamiento tempranos juegan un papel crucial en reducir las posibilidades de muerte por rabia. El método más común para detectar rabia en animales se llama prueba de anticuerpos fluorescentes directos (dFAT). Esta prueba requiere Tejido cerebral para encontrar el virus de la rabia. Aunque es conocida por ser rápida y precisa, su efectividad disminuye cuando el tejido cerebral se descompone, lo que es un gran problema en climas cálidos como Filipinas.

En condiciones tropicales, las Muestras de cerebro pueden estropearse rápido, haciéndolas no aptas para la prueba. Investigaciones indican que cuando el tejido cerebral se almacena a altas temperaturas, la capacidad de detectar el virus disminuye rápidamente. Sin embargo, se puede identificar ARN viable de muestras cerebrales por más tiempo incluso a temperaturas elevadas.

#Avances en la Prueba de Rabia

Para mejorar la prueba de rabia, los científicos están investigando nuevos métodos que ofrezcan mejor sensibilidad y rapidez. Un enfoque prometedor es el uso de la Reacción en Cadena de la Polimerasa por Transcripción Inversa (RT-PCR). Esta técnica puede detectar el virus de la rabia en tejidos que pueden tener niveles bajos del virus, como saliva o biopsias de piel.

Aunque los métodos tradicionales de RT-PCR a veces pueden dar falsos positivos por contaminación, versiones más nuevas de esta prueba han aumentado la precisión. El ensayo LN34 Pan-Lyssavirus es un método RT-PCR popular que detecta una amplia gama de virus de la rabia y exhibe un alto grado de sensibilidad.

#Recopilando Muestras para la Prueba

Para llevar a cabo investigaciones sobre la rabia, los científicos necesitan recolectar muestras. Para esto, recogen tejido cerebral, así como otros tejidos como piel de la nariz y folículos pilosos de perros. Estas muestras se almacenan a temperaturas bajo cero hasta que están listas para el análisis.

Recolectar muestras del cerebro implica un proceso detallado. Comienza con la cuidadosa extracción del cráneo para acceder al cerebro. Los investigadores toman muestras de áreas específicas del cerebro que llevan mayores cantidades del virus.

Otras muestras, como los complejos foliculares y el planum nasal, requieren técnicas diferentes. Para estas, se hacen pequeñas incisiones para recolectar tejido.

#Extrayendo ARN para la Prueba

Una vez recolectadas las muestras, los investigadores necesitan extraer ARN, que es una copia del material genético del virus. Esto implica descomponer el tejido y usar kits especiales para aislar el ARN. El ARN extraído se mantiene a temperaturas ultra-bajas hasta que se necesita para la prueba.

Usando el ARN extraído de muestras cerebrales positivas, los científicos realizan pruebas de RT-qPCR para detectar el virus de la rabia. Se utilizan muestras de control positivas para asegurar que las pruebas funcionen correctamente.

#Configurando la Prueba RT-qPCR

Las pruebas RT-qPCR requieren condiciones específicas. Esto incluye encontrar la temperatura adecuada para la prueba, así como la cantidad correcta de iniciadores y sondas necesarias para detectar el virus. Los investigadores experimentan con diferentes temperaturas y concentraciones para encontrar la configuración óptima para la prueba.

Durante este proceso, observan qué tan bien funciona el ensayo creando una curva estándar. Esta curva ayuda a determinar qué tan eficientemente puede el ensayo detectar el virus a diferentes concentraciones.

#Validando la Prueba para Exactitud

La validación es crucial al probar nuevos métodos. Durante este proceso, el ensayo se prueba contra muestras conocidas positivas y negativas para medir su precisión. Las pruebas buscan asegurar que el ensayo identifique correctamente la rabia y no la confunda con otros virus caninos.

Los investigadores también necesitan comprobar que el ensayo puede dar resultados similares cuando lo realizan diferentes personas o usando diferentes máquinas. Resultados consistentes ayudan a confirmar la confiabilidad de la prueba.

#Resultados de la Prueba

Después de una extensa validación, el ensayo RT-qPCR optimizado mostró resultados prometedores. Demostró la capacidad de detectar ARN del virus de la rabia tanto en muestras cerebrales positivas como en muestras alternativas no cerebrales. De hecho, todas las muestras probadas mostraron resultados confiables, lo cual es una buena noticia para los esfuerzos continuos de vigilancia de la rabia.

Sin embargo, se identificaron algunos desafíos. Algunas muestras previamente etiquetadas como negativas devolvieron resultados positivos. Esta discrepancia podría ocurrir debido a niveles bajos del virus que no eran detectables por otros métodos de prueba, lo que señala la necesidad de una mejora continua en la precisión de las pruebas.

#El Camino a Seguir para el Control de la Rabia

Las organizaciones de salud pública en todo el mundo están trabajando para eliminar la rabia, con el objetivo de lograr cero muertes por rabia mediadas por perros para 2030. Mejorar los métodos de diagnóstico es una parte clave de este objetivo. El ensayo RT-qPCR recién desarrollado puede ayudar a acelerar las pruebas y mejorar los esfuerzos de monitoreo de la rabia.

Sin embargo, el ensayo actual está algo limitado a tipos de muestras específicas. La investigación futura necesita explorar otras fuentes de muestras potenciales para la prueba de rabia. Además, deberían desarrollarse nuevos métodos de prueba para reducir costos y hacerlos más accesibles.

#Conclusión

La rabia representa una amenaza significativa para la salud pública, especialmente en lugares donde las mordeduras de perros son comunes. Aunque hay vacunas disponibles, la rabia sigue reclamando miles de vidas cada año. Los métodos de prueba mejorados, como el nuevo ensayo RT-qPCR, presentan un camino a seguir. Esta prueba puede ayudar en la detección más rápida y eficiente de la rabia, contribuyendo en última instancia a un mejor manejo y control de la enfermedad.

A medida que avanzamos hacia un mundo libre de rabia, la investigación y la innovación continuas serán esenciales para superar los desafíos que se presentan. Después de todo, todos podríamos usar un mundo donde podamos pasear a nuestros amigos peludos sin preocuparnos por la rabia.