鶏の胚の非侵襲的イメージングの進歩
研究者たちは、鶏の胚発生を妨げずに観察するための画像技術を改善してるよ。
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鶏の卵は食べ物の源だけじゃなくて、科学研究にも大事なんだ。研究者たちは鶏や他の鳥の胚を調べて、発達について学んだり、ワクチンを作ったり、農業を改善したりしてる。特に注目されてるのが、卵黄膜(CAM)ってやつ。これ、鶏の胚を囲む特別な層で、血管がたくさん含まれてる。CAMは胚に酸素や栄養を供給して、成長する間に守ってくれるんだ。
CAMの研究は、心臓の発達や血管の形成についての情報をくれる。さらに、CAMは癌の成長を研究するためのテスト場としても使える。だから、研究者たちは胚を傷めずにCAMの写真を撮る方法を見つけるために、ずっと努力してる。
鶏の卵を研究するための画像技術
鶏の胚のCAMを高品質の画像で撮る方法は2つある。1つ目は、卵から胚を取り出して、ラボの皿で育てる方法。2つ目は、卵の殻に小さな穴をあけて、保護膜の一部を取り除いて、透明な窓を作って、胚がまだ卵の中にいる間に見る方法。
どちらの方法でも、科学者たちはいろんな画像技術を使う。一般的な技術には、白色光イメージング、蛍光顕微鏡、光干渉断層法がある。でも、保護層を取り除くと、胚の成長に影響を与えたり、感染症のリスクが高まったり、呼吸の問題を引き起こしたりすることがある。これが、胚の生存の可能性を下げることにつながる。
だから、科学者たちは卵を壊さずにCAMを観察する方法を見つけることに興味を持ってるんだ、特に胚の発達初期段階でね。
非侵襲的画像法
研究者たちは、鶏の卵の中を見るための2つの非侵襲的画像技術を開発した。1つ目は、明視野透過イメージング(卵の照明)って呼ばれる技術。これは、鶏の卵の中の血管を見るための伝統的な方法なんだ。光源を卵の下に置いて、光が透過すると、卵の中の部分がどれだけ光を吸収するかによって、いろんな部分が見えるようになる。
でも、この技術は、卵の殻にひびが入ってたり、卵の色素が光を吸収しちゃったりすると、効果が制限されることがある。光の明るさをコントロールするのも、オーバーエクスポーズやアンダーエクスポーズを防ぐために重要なんだ。
2つ目の非侵襲的画像技術は、レーザースペックルコントラストイメージング(LSCI)っていう。これは、レーザー光が胚に当たって跳ね返り、点のパターン(スペックル)を作るんだ。血液細胞の動きを、これらのスペックルの変化を通して見ることができる。LSCIは、鶏の胚の初期段階を含む様々な生きた組織の血管を可視化するのに役立つことが分かってる。でも、胚が成長するにつれて、周りの組織が増えると、画像がはっきり見えにくくなることがある。
画像システムの改善
LSCIで撮影した画像の質を向上させるために、研究者たちは新しいシステムを開発した。この強化されたシステムは、若い鶏の胚の血管ネットワークを捕えることに焦点を当ててる一方で、画像のノイズを減少させることを目指してる。目標は、以前の研究よりも明瞭な画像を提供することなんだ。
今回の研究では、LSCIと明視野透過イメージングのシステムを1つのプラットフォームに統合した。このおかげで、科学者たちは両方の方法の強みと弱みを比較できるようになった。結果として、LSCIが血管の明瞭度を提供し、明視野透過イメージングに比べて卵の殻の色に影響されにくいことが示された。
画像比較の結果
いくつかの鶏の卵が両方の画像技術を使って調査された。明視野透過イメージングは、血管が見えにくい暗い卵には効果的じゃなかった。一方、LSCIは、すべての卵のタイプで血管をうまく可視化した。結果は、LSCIが視認性と詳細をより良く提供できることを示してる、卵の殻の色が異なってもね。
LSCIシステムは、暗い斑点のある白い殻を持つウズラの卵にも試されて、やっぱりLSCIが血管を可視化するのに効果的だった。一方、明視野透過イメージングは、卵殻の暗い部分では苦戦してた。
血管発達の追跡
LSCIシステムのワクワクする応用の1つは、血管ネットワークの成長を時間をかけてモニターする能力だ。今回の研究では、研究者たちは異なる発達段階の胚の画像をキャッチした。胚が成熟するにつれて、血管が卵の中でより密になって、深くなっていくことが分かったんだ。
ただ、研究者たちは、発達の後期段階では、胚や周りの組織の動きによって画像の質が悪くなることに気づいた。これを克服するために、画像の質を向上させるフィルタリング技術を適用した。
血流の動態を監視する
鶏の胚の血流を監視する能力は、健康を評価するために重要なんだ。LSCIを使って、研究者たちは心拍のさまざまなフェーズにおける胚の血流パターンを可視化することができた。この情報は、科学者が心臓の機能を理解したり、循環に関する潜在的な問題を評価したりするのに役立つ。
撮影された画像を分析することで、心臓が収縮したりリラックスしたりするときに血流がどう変化するかを見ることができた。このリアルタイムの監視は、胚が適切に発達していることを確認するために特に価値がある。
胚の発達段階の分類
血流を監視することに加えて、LSCI技術は鶏の胚の発達段階を分類するのにも使える。正確な段階付けは、臓器の発達についての研究や全体的な成長パターンを理解するために重要なんだ。
この研究では、研究者たちはLSCIで撮影した血管の画像に基づいて、鶏の胚の段階を分類するための機械学習アルゴリズムを訓練した。血管の長さや分岐のパターンなどの特徴を分析することによって、85%の分類精度を達成した。この方法は、卵を開けて胚を直接調べる伝統的な段階付けの非侵襲的な代替手段を提供するものだ。
結論
鶏の胚を研究するためにLSCIを使うのは、科学研究にとって有望な道だ。この非侵襲的な画像技術により、研究者たちは胚の自然な成長環境を壊さずに血管の発展を観察したり、心臓の機能を監視したりすることができる。
画像技術を組み合わせて、高度な処理技術を用いることで、研究者たちはより明瞭な画像を得て、胚発達に関する貴重な知見を集めることができる。この研究は、鳥類の生物学をより良く理解するために貢献するし、農業や医学の分野でも広がりのある影響が期待できる。
これからは、画像システムをさらに洗練させたり、胚の性別を特定することや、時間をかけた発達の研究を行うような追加の応用を探求する可能性がある。全体的に見ると、LSCIは鶏や他の鳥の胚の発達を研究するための非侵襲的画像技術の大きな進展を示してるんだ。
タイトル: Non-invasive laser speckle imaging of extra-embryonic blood vessels in intact few-days-old avian eggs
概要: Imaging blood vessels in early-stage avian embryos has a wide range of practical applications for developmental biology studies, drug and vaccine testing, and early sex determination. Optical imaging such as brightfield transmission imaging offers a compelling solution due to its safe non-ionizing radiation, and operational benefits. However, it comes with challenges such as eggshell opacity and light scattering. To address these, we have revisited an approach based on laser speckle contrast imaging (LSCI) and demonstrated a high quality, comprehensive and non-invasive visualization of blood vessels in few-days-old chicken eggs, with blood vessel as small as 100 {micro}m in diameter (with LSCI profile full-width-at-half-maximum of 275 {micro}m). We present its non-invasive use for monitoring blood flow, measuring the embryos heartbeat, and determining the embryos developmental stages using machine learning with 85% accuracy from stage HH15 to HH22. This method can potentially be used for non-invasive longitudinal studies of cardiovascular development and angiogenesis, as well as egg screening for the poultry industry.
著者: Simon Mahler, Z. Dong, C. Readhead, X. Chen, M. Dickson, M. E. Bronner, C. Yang
最終更新: 2024-03-14 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.11.584528
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.11.584528.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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