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Innovazioni nella Tecnologia dei Vaccini: N-VelcroVax

N-VelcroVax rappresenta un nuovo approccio nello sviluppo dei vaccini per varie malattie.

Nicola J Stonehouse, K. Fatema, J. S. Snowden, A. Watson, L. Sherry, N. A. Ranson, D. Rowlands

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Nuova tecnologia Nuova tecnologia vaccinale: N-VelcroVax dei vaccini con N-VelcroVax. Un approccio promettente per il design
Indice

I vaccini sono uno strumento importante per combattere le malattie causate dai virus. I vaccini tradizionali funzionano usando versioni indebolite o uccise del virus per stimolare il sistema immunitario. Questi metodi tradizionali sono stati efficaci nel diminuire la diffusione delle malattie sia nelle persone che negli animali. Col passare del tempo, gli scienziati hanno fatto grandi progressi nel campo della biologia molecolare e dell'immunologia, aprendo nuove strade per creare vaccini. Oggi abbiamo più opzioni per realizzare vaccini contro malattie difficili da trattare e virus appena scoperti.

Nuovi Metodi di Sviluppo dei Vaccini

Lo sviluppo moderno dei vaccini include diverse tecniche innovative. Alcuni di questi metodi utilizzano parti del virus, come le proteine, per creare una risposta nel sistema immunitario. Questi possono includere tecniche avanzate come l'uso di particelle simili a virus (VLP), DNA o persino vaccini a RNA messaggero (mRNA).

Il primo vaccino VLP approvato per gli esseri umani è stato per l'Epatite B. Da allora, milioni di persone hanno ricevuto questo vaccino. Recentemente, sono stati sviluppati vaccini VLP per proteggere contro il papillomavirus umano (HPV). Questi vaccini funzionano perché imitano la struttura dei virus, permettendo al sistema immunitario di riconoscerli e rispondere senza il rischio di malattia.

La Sicurezza delle VLP

Le VLP sono particolarmente sicure perché non contengono materiale genetico del virus, il che significa che non possono replicarsi. Questo le rende una buona scelta per lo sviluppo di vaccini. Le VLP somigliano molto ai veri virus, il che significa che possono provocare una forte risposta immunitaria. Quando utilizzate nei vaccini, possono attivare diverse parti del sistema immunitario, inclusa la produzione di anticorpi e l'attivazione di cellule speciali che possono uccidere le cellule infette.

Oltre a questo, le VLP possono essere personalizzate per presentare diverse proteine estranee, migliorando la loro capacità di indurre una risposta contro vari patogeni. La struttura ripetitiva delle VLP aiuta ad attivare le cellule B, che sono fondamentali per la produzione di anticorpi. Le ricerche hanno dimostrato che i vaccini realizzati con VLP possono essere più efficaci rispetto a quelli fatti solo con singoli Antigeni.

La Proteina Capsidica dell'Epatite B

La proteina core del virus dell'epatite B è nota per produrre VLP che hanno una specifica forma geometrica quando espressa in vari sistemi, tra cui batteri e lieviti. Questa proteina può formare una struttura robusta che il sistema immunitario riconosce bene. La forma e la struttura di queste VLP sono importanti per la loro efficacia come vaccini.

Tuttavia, sorgono sfide quando si cerca di aggiungere nuove proteine alle VLP esistenti. Se due proteine sono troppo vicine tra loro sulla VLP, potrebbero interferire con la funzione dell'altra. Per affrontare questo problema, gli scienziati hanno sviluppato un metodo che consente di aggiungere una proteina estranea in modo tale che non rompa la struttura della VLP. Questo metodo è stato utilizzato per creare quello che è conosciuto come VelcroVax, che incorpora una proteina di legame specifico che cattura antigeni da altri virus.

Produzione del Vaccino N-VelcroVax

La produzione del N-VelcroVax, che è una versione aggiornata del VelcroVax, prevede diversi passaggi. L'obiettivo era creare una piattaforma in grado di catturare diversi antigeni virali in modo efficace. Modificando la proteina core dell'epatite B, gli scienziati hanno introdotto una sequenza che avrebbe aiutato a catturare l'antigeno target. Questo consente una migliore interazione con altre proteine virali, migliorando l'efficacia complessiva del vaccino.

Il N-VelcroVax è stato prodotto con successo in un sistema batterico chiamato ClearColi. Questo sistema è vantaggioso perché riduce la contaminazione con sostanze nocive, rendendo il prodotto più sicuro per l'uso. Sia le proteine originali che quelle modificate sono state prodotte in modo efficiente in questo sistema.

Conferma della Struttura del N-VelcroVax

Dopo aver prodotto il N-VelcroVax, i ricercatori hanno dovuto confermare che avesse formato la struttura corretta. Utilizzando tecniche come il Western blotting, sono stati in grado di dimostrare che le proteine giuste erano presenti e nelle dimensioni attese.

Ulteriori analisi tramite tecniche di imaging avanzate, come la microscopia elettronica, hanno confermato che il N-VelcroVax aveva la forma desiderata. Le particelle sembravano come dovevano e erano nella gamma di dimensioni attese.

Esaminare Come N-VelcroVax Interagisce con Altre Proteine

Uno degli aspetti significativi del N-VelcroVax è la sua capacità di legarsi ad altre proteine, come la glicoproteina del virus di Junín. Mescolando N-VelcroVax con questa proteina target, i ricercatori hanno testato quanto bene interagissero. I risultati hanno mostrato che si legavano efficacemente, il che è cruciale per il funzionamento del vaccino.

Diversi metodi di test hanno confermato la capacità di legame del N-VelcroVax. Questo ha compreso l'uso di una tecnica chiamata ELISA, dove varie miscele di proteine sono state testate per determinare le condizioni ottimali per il miglior legame. Questi test hanno mostrato che i migliori risultati si ottenevano quando le due proteine erano mescolate in quantità uguali.

Visualizzare N-VelcroVax e i suoi Complessi

Per visualizzare ulteriormente le strutture, i ricercatori hanno utilizzato la criomicroscopia elettronica. Questa tecnica consente di avere uno sguardo approfondito alle particelle a temperature molto basse. I risultati hanno illustrato che il N-VelcroVax poteva formare due forme distinte, confermando che aveva la struttura corretta.

Inoltre, quando il N-VelcroVax è stato mescolato con la glicoproteina di Junín, sono stati notati alcuni cambiamenti nella struttura. È stata osservata l'interazione con la glicoproteina, ma con una bassa occupazione, suggerendo che la maggior parte dei siti erano non legati. Questo può rendere difficile visualizzare la struttura completa attraverso metodi standard.

Vantaggi della Nuova Piattaforma per i Vaccini

La nuova piattaforma N-VelcroVax rappresenta un avanzamento promettente nella tecnologia dei vaccini. Consente una presentazione flessibile di vari antigeni, il che potrebbe migliorare la risposta immunitaria a più patogeni. La possibilità di creare questi vaccini utilizzando metodi a basso costo potrebbe anche aumentare l'accesso, specialmente nei paesi a basso reddito.

Usare batteri come il ClearColi per la produzione riduce il rischio di contaminanti nocivi spesso associati ad altri sistemi. I bassi livelli di endotossine trovati nel N-VelcroVax sono cruciali per garantire la sicurezza nell'uso del vaccino.

Conclusione

Lo sviluppo del N-VelcroVax dimostra il potenziale per creare piattaforme vaccinali efficaci che possano adattarsi a varie sfide sanitarie. Utilizzando tecniche moderne e miglioramenti, gli scienziati stanno aprendo la strada a una nuova generazione di vaccini che potrebbero salvare molte vite. Ulteriori ricerche determineranno quanto efficace può essere il N-VelcroVax come piattaforma vaccinale nelle applicazioni del mondo reale. Questo potrebbe portare a progressi significativi nella lotta contro le malattie infettive.

Fonte originale

Titolo: A VLP vaccine platform comprising the core protein of hepatitis B virus with N-terminal antigen capture

Estratto: Nanoparticle presentation systems offer the potential to develop new vaccines rapidly in response to emerging diseases, a public health need that has become increasingly evident in the wake of the COVID-19 pandemic. Previously, we reported a nanoparticle scaffold system termed VelcroVax. This was constructed by insertion of a high affinity SUMO binding protein (Affimer), able to recognise a SUMO peptide tag, into the major immunodominant region of VLPs assembled from a tandem (fused dimer) form of hepatitis B virus (HBV) core protein (HBc). Here we describe a modified form of VelcroVax, comprising monomeric HBc with the Affimer inserted at the N-terminus (termed N-VelcroVax). In contrast to the tandem form of VelcroVax, N-VelcroVax VLPs were expressed well in E. coli. The VLPs effectively bound SUMO-tagged Junin virus glycoprotein, gp1 as assessed by structural and serological analyses. Cryo-EM characterisation of N-VelcroVax complexed with a SUMO-Junin gp1 showed continuous density attributable to the fused Affimer, in addition to evidence of target antigen capture. Collectively, these data suggest that N-VelcroVax has potential as a versatile next generation vaccine scaffold.

Autori: Nicola J Stonehouse, K. Fatema, J. S. Snowden, A. Watson, L. Sherry, N. A. Ranson, D. Rowlands

Ultimo aggiornamento: 2024-12-15 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.07.597873

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.07.597873.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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